流感嗜血杆菌 ATCC 49247 是 CLSI 指定的流感嗜血杆菌药敏质控株,也是苛养菌质控里最讲究的一支——它需要 HTM 培养基和 CO₂ 环境,养不好,药敏质控就无从谈起。这篇文章把 49247 的来源、特性、培养和保藏讲清楚,数据依据 ATCC 官网产品资料和 CLSI M100。
一、菌株身份
| 项目 |
内容 |
| 学名 |
Haemophilus influenzae (Lehmann and Neumann) Winslow et al. |
| ATCC 编号 |
49247 |
| 菌株命名 |
TD-4 |
| 模式菌株 |
否 |
| 生物安全等级 |
BSL-2 |
| 分离来源 |
1984 年 1 月,男性肺炎患者的咳痰标本(美国马萨诸塞州 Worcester) |
| 基因组测序菌株 |
是 |
二、生物学特性
- 革兰氏阴性短杆菌(0.3~0.6 μm × 1.0~2.2 μm),无芽孢、无鞭毛,常单个或成对排列。
- 营养需求特殊:必须依赖 X 因子(氯化血红素)和 V 因子(NAD),只能在含双因子的培养基上生长——这是与副流感嗜血杆菌(仅需 V 因子)的鉴别要点。
- 生化:发酵葡萄糖、半乳糖产酸不产气;氧化酶阳性、触酶阳性、硝酸盐还原阳性;吲哚、尿素酶阴性。
- 条件致病菌,定植于人类鼻咽部,是儿童、老年人和免疫缺陷人群感染的重要病原体。
三、培养与保藏(苛养菌,注意细节)
| 项目 |
内容 |
| ATCC 推荐培养基 |
ATCC Medium 2167(Haemophilus Test Medium,HTM);ATCC Medium 814(GC 琼脂/肉汤) |
| 培养温度 |
37°C |
| 气体环境 |
95% 空气 + 5% CO₂(必须) |
| 培养时间 |
24~48 小时 |
| 药敏试验培养基 |
HTM 琼脂(CLSI 指定) |
保藏要点:冻干粉 2~8°C 保存;工作菌株传代 ≤5 代,-80°C 甘油冻存;苛养菌复苏失败率高,多备原代。
四、在标准体系中的位置
- CLSI M100 / M02 / M07:流感嗜血杆菌药敏质控株(HTM 培养基),纸片法与稀释法均适用。
- HTM 药敏体系:HTM 是专门为流感嗜血杆菌药敏设计的培养基(含 X/V 因子与特定阳离子),49247 是其质控基准。
- 35218 辅助质控:49247 是不产酶株,测不出酶抑制剂失效问题,需配合 35218(产 TEM-1)做 HTM 体系的辅助质控(详见对比文章)。
- 商业系统 QC:Sensititre 等厂商的流感嗜血杆菌/肺炎链球菌 MIC 质控套装(含 49247、49766、49619)。
五、常见问题
- 为什么必须用 HTM? 普通 MHA 不含 X/V 因子,流感嗜血杆菌不长;HTM 是 CLSI 为流感嗜血杆菌药敏专门规定的培养基。
- 没有 CO₂ 培养箱怎么办? 烛缸法可替代(生成约 5% CO₂),但要注意温度与湿度控制。
- 出口管制:流感嗜血杆菌类菌株采购时确认货期与合规要求。
参考资料
- ATCC 官网:Haemophilus influenzae 49247 产品页与 Product Sheet
- CLSI M100《Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing》
- Butler DL, et al. Antimicrob Agents Chemother 1999;43(2):283-288.(PMID 9925519)
- Thermo Sensititre QC 套装资料(ATCC Licensed Derivative)
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