肺炎链球菌是社区获得性肺炎的头号病原体,青霉素耐药问题逐年受关注,药敏质控更不能含糊。它的质控株是 ATCC 49619,培养基要用 MHA 加羊血,还要 5% CO₂。这篇把 49619 的用法讲清楚。
一、49619 在药敏质控里的角色
肺炎链球菌对青霉素类、大环内酯类等的耐药监测依赖准确的药敏结果。ATCC 49619 是 CLSI 指定的肺炎链球菌药敏质控株(血清型 19F),用于验证链球菌药敏系统:MHA+羊血培养基、纸片、菌液浓度、CO₂ 培养条件是否在控。
二、操作参数(依据 CLSI M02/M07 与 M100)
| 项目 |
要求 |
| 培养基 |
MHA + 5% 羊血(或溶血马血) |
| 菌悬液 |
0.5 麦氏浊度(制备后尽快接种) |
| 培养 |
35°C±2°C,5% CO₂,20~24 小时 |
| 判读 |
抑菌圈直径 / MIC 值与 M100 中 49619 的质控范围比对 |
常用质控药物:青霉素、阿莫西林、头孢曲松、头孢噻肟、美罗培南、红霉素、阿奇霉素、克林霉素、左氧氟沙星、莫西沙星、万古霉素、利奈唑胺、复方磺胺甲噁唑等,每种药物在 M100 中都有 49619 的质控范围。
三、关键细节
- 培养基必须是 MHA+羊血:普通 MHA 不含血,肺炎链球菌生长不良;羊血提供营养并支持 α-溶血观察;
- CO₂ 不可省:5% CO₂ 环境对链球菌生长和药敏结果都必要;
- 判读时间:20~24 小时,别拖到 48 小时——49619 会自溶,菌落消失后结果失真;
- 转接:冻存管复苏后初始培养可能需要转接一次去除冷冻保护剂,保证菌液质量。
四、失控排查顺序
- 培养基:MHA+羊血是否新鲜、血液浓度正确;
- CO₂ 条件:培养箱 CO₂ 浓度、湿度;
- 菌株:确认是 49619、代次 ≤5 代;
- 培养时间:是否超时导致自溶;
- 菌悬液:0.5 麦氏校准。
五、常见误区
- 用普通 MHA:链球菌不长或生长极差,结果无效;
- 培养 48 小时再判读:自溶导致假耐药/假敏感;
- 省略 CO₂:生长不良,抑菌圈失真;
- 拿 49619 做其他链球菌质控:49619 是肺炎链球菌质控株,化脓链球菌等其他链球菌的质控另有要求(如 ATCC 19615),别混。
参考资料
- CLSI M100《Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing》;CLSI M02、M07
- CLSI M45-A(苛养菌药敏方法学)
- ATCC 官网:Streptococcus pneumoniae 49619 产品页
- 各耐药监测技术规范中肺炎链球菌药敏质控要求
试验参数来自公开权威标准文本,执行时以最新有效版本原文为准。