大肠埃希菌ATCC 25922：来源、特性、培养与保藏

大肠埃希菌 ATCC 25922 是全球药敏试验质控使用率最高的标准菌株之一。它是 CLSI 指定的抗菌药物敏感性试验（AST）质控株，也是培养基测试、鉴定试剂盒验证的常客。这篇文章把它的来源、特性、培养和保藏一次讲清，数据依据 ATCC 官网产品资料和 CLSI M100。

一、菌株身份

ATCC 官网说明里有一条值得注意的历史备注：早期目录曾把它误标为与 NCTC 10418 相同，ATCC 已明确更正——25922 与 NCTC 10418 不是同一株菌，引用文献时别沿用旧说法。

二、生物学特性

2.1 形态

• 革兰氏阴性短杆菌，直径 0.5~1.0 μm，长 1.0~2.0 μm，单个或成对排列，无芽孢，有周生鞭毛（有动力）。
• 菌落：TSA 平板上 37°C 培养 16~18 小时，形成圆形、光滑湿润、边缘整齐、乳白色不透明的菌落，直径 2~3 mm。在麦康凯琼脂上因发酵乳糖产酸，呈鲜艳粉红色。

2.2 生化特征

• 氧化酶阴性；吲哚阳性、甲基红阳性、VP 阴性、枸橼酸盐阴性——经典的 IMViC 反应模式（++--），是肠杆菌科鉴定教学里的标准示范。
• 乳糖发酵阳性。
• 不产 verotoxin（VT 阴性）。
• 不产 β-内酰胺酶（blaTEM 阴性、blaSHV 阴性），不含 ESBL 基因。

2.3 药敏表型

ATCC 25922 对大多数抗菌药物呈敏感表型，这正是它作为质控株的价值所在：质控结果必须落在 CLSI 规定的窄范围内，任何偏离都提示试验系统（纸片、培养基、接种量、操作）可能出了问题。它可用于新霉素、黏菌素、卡那霉素、头孢氨苄、庆大霉素、头孢孟多、头孢噻吩、四环素、萘啶酸、氯霉素等多种药物的纸片扩散测试质控。

三、培养与保藏

3.1 培养基与条件

3.2 保藏注意事项（ATCC 官方提示，务必注意）

1. 肉汤传代会引起 MIC 漂移。ATCC 明确指出：反复在肉汤中传代常导致 MIC 水平改变，因此尽量在琼脂上保藏，并尽快制备冻存管。
2. 工作菌株传代不超过 5 代。
3. 冻存：-80°C 或更低（甘油冻存）；短期可用 2~8°C 斜面。
4. 冻干粉复苏后划线 TSA 平板，37°C 需氧培养 18~24 小时。

四、标准体系中的位置

• CLSI M100：肠杆菌科细菌药敏质控株，K-B 纸片法与肉汤稀释法通用（革兰阴性杆菌的"金标准"质控株）。
• 培养基适用性：麦康凯、EMB 等选择性培养基的生长支持验证；革兰氏染色阴性对照、氧化酶试验阴性对照。
• 商业系统质控：Abbott、API、Autobac、BBL、bioMérieux VITEK、Difco、IDS、Micro-Media、MicroScan、Roche Diagnostics、Sensititre 等产品的质控标准菌株。
• 食品/水质检测：AOAC、EPA 等方法的阴性对照与质控（如 EPA Method 1605 的质控）。
• 分子检测：基因组 DNA 产品（25922D-5）可用于 PCR、qPCR 方法开发与验证。

五、常见问题

1. BSL-1 也不能大意：虽然无致病性、是肠道正常菌群，常规实验室规范操作（超净台、无菌耗材、操作后灭菌）仍要执行。
2. 传代是最大风险点：MIC 漂移大多来自肉汤传代过多，琼脂保藏 + 及时冻存 + ≤5 代，是保持质控结果稳定的三条底线。
3. 别和 8739 混用：25922 是药敏质控株，8739 是 ISO 22196 抗菌塑料测试指定株，两者应用轨道不同（详见对比文章）。
4. 出口管制：大肠埃希菌类菌株多数不涉及 16-6A 管制，但采购时仍建议向供应商确认合规与货期。