铜绿假单胞菌 ATCC 27853 是药敏质控清单里唯一的非发酵菌代表,也是水质检测、培养基验收的常客。它有一个出了名的"脾气":突变快,复测不能靠传代,得重新开管。这篇文章把 27853 的来源、特性、培养和保藏讲清楚,数据依据 ATCC 官网产品资料和 CLSI M100。
一、菌株身份
| 项目 |
内容 |
| 学名 |
Pseudomonas aeruginosa (Schroeter) Migula |
| ATCC 编号 |
27853(另有 27853D-5 基因组 DNA、CRM-27853 认证参考物质、27853-MINI-PACK 等形式) |
| 菌株命名 |
Boston 41501 |
| 等效保藏编号 |
WDCM 00025 |
| 模式菌株 |
否 |
| 生物安全等级 |
BSL-2 |
| 分离来源 |
血培养(blood culture) |
| 基因组测序菌株 |
是 |
ATCC 官网历史备注:早期目录曾误标 27853 与 NCTC 10662 相同,已更正。引用文献时注意别沿用旧说法。
二、生物学特性
- 革兰氏阴性杆菌,专性需氧,有动力(单端鞭毛)。
- 菌落:营养琼脂上 35~37°C 培养 24 小时,呈典型非黏液型蓝绿色菌落(产绿脓素/荧光素),直径 1.2~1.8 mm;羊血琼脂上呈 β-溶血。
- 氧化酶阳性;不发酵葡萄糖(氧化型代谢);利用枸橼酸盐。
- 可观察到两种菌落形态,ATCC 已分别鉴定确认属同一菌株,不是污染。
三、培养与保藏(重点)
| 项目 |
内容 |
| ATCC 推荐培养基 |
ATCC Medium 18(TSA / TSB) |
| 培养温度 |
37°C |
| 培养时间 |
18~24 小时 |
| 气体环境 |
需氧 |
ATCC 官方特别提示(务必注意):
1. 27853 突变较快。如果需要重复某抗生素的测试,不能通过传代复测,必须重新打开一支新管,从原始菌种重新开始——这是它与大多数质控株最大的不同;
2. 可能观察到两种菌落形态,均属同一菌株;
3. 工作菌株传代 ≤5 代,-80°C 甘油冻存,多备原代冻存管。
四、在标准体系中的位置
- CLSI M100 / M02 / M07:非发酵菌药敏质控株(铜绿假单胞菌代表),纸片法与稀释法均适用,含碳青霉烯类等药物的质控范围。
- CLSI M2-A9 / M7-A8:药敏方法学标准中的参考应用。
- Mueller-Hinton 琼脂评估:MHA 批次验收质控菌。
- 水质检测:WaterBugs 等形式用于水/废水质量控制(定量 QC,单次接种 <50 CFU 模拟水样)。
- 食品检测:食品微生物检验的质控应用。
- 商业系统质控:Abbott、API、Autobac、BBL、VITEK、MicroScan、Roche、Sensititre 等。
- 认证参考物质:CRM-27853(ISO 17034 认证流程生产);注意 ATCC 公告——活菌 CRM 将于 2026 年底停产,后续以 MicroQuant 形式提供。
五、常见问题
- 为什么不能传代复测? 27853 突变率高,传代后表型可能改变,复测结果不可比,必须新开管。
- BSL-2 防护:铜绿假单胞菌是条件致病菌,操作按 BSL-2 执行。
- 和 9027 的区别:27853 是药敏质控株,9027 是消毒检测株,应用轨道不同(详见对比文章)。
参考资料
- ATCC 官网:Pseudomonas aeruginosa 27853 / 27853-MINI-PACK / CRM-27853 产品页
- GenBank:AB037545(16S rRNA)、AF094719 等
- CLSI M100 / M02 / M07;CLSI M2-A9、M7-A8
- ISO 20776-1;ISO 17034(CRM 生产流程)
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