金黄色葡萄球菌ATCC 6538：来源、特性、培养与保藏

做微生物质检这些年，金黄色葡萄球菌 ATCC 6538 大概是实验室里出场率最高的菌株之一。消毒剂评价用它，抗菌材料检测用它，药典的培养基适用性检查也用它。但它是怎么来的、该怎么养、怎么保藏，不少新同事第一次拿到冻干粉时还是说不清。这篇文章把菌株的来源、特性、培养和保藏一次讲透，数据依据 ATCC 官网产品和各国药典，可以对照着操作。

一、先认识这支菌

1.1 基本身份

上面这些都能在 ATCC 官网 6538 系列的产品页和 Product Sheet 里查到。有一点要特别说清楚：6538 不是模式菌株。它能混到今天这个地位，靠的是几十年里被各国标准反复引用，跟分类学上的模式地位是两码事。

1.2 历史沿革：一个"前抗生素时代"的标本

为什么管 6538 叫"前抗生素时代"的标本？因为它在 1937 年进入 ATCC 时，青霉素还没大规模用上。

• 19 世纪末：德国医生 Friedrich Rosenbach 首次从人类皮肤病变中分离并命名金黄色葡萄球菌，他做的伤口感染与脓肿研究，确定了这是一个凝固酶阳性的化脓性球菌。
• 1937 年：菌株正式收入 ATCC 保藏中心。
• 1940 年代：青霉素问世的头几年，ATCC 记录显示 6538P 变体曾用青霉素 P2 纸片检出"中等耐药"，但后来换 P10 纸片复查没有再现。ATCC 官方说明里写得很明确：用现代 CLSI 方法验证，这个耐药性不成立。所以现在 6538 对青霉素类就是敏感表型，写报告的时候别被老文献带偏。

这支菌后来被美国 FDA、WHO 体系以及多国药典收作参考菌株，MIL G-13734B 这类军标测试里也有它的名字（ATCC 官方推荐）。

为什么要在意这段历史？因为 6538 的基因组还停留在抗生素大规模使用之前。想研究金黄色葡萄球菌的耐药性、毒力是怎么一步步演化出来的，它就是最合适的对照基准。

二、生物学特性

2.1 形态与染色

• 革兰氏阳性球菌，镜检呈典型的葡萄串状排列——葡萄球菌属的名字就是这么来的（staphylo- = 葡萄串）。
• 菌落：在 TSA（胰酪大豆胨琼脂）或营养琼脂上培养 18~24 小时，菌落圆形、光滑、隆起、边缘整齐，直径约 2~3 mm，呈金黄色至橙黄色。aureus 在拉丁语里就是"金色"，名字由此而来。色素深浅受培养基和培养时间影响：刚长出的菌落颜色偏浅，放 24~48 小时后金黄色更明显。
• 血琼脂平板上可能出现不透明与半透明两种菌落形态，反映荚膜产生或代谢活性的差异，都是正常现象，别误判成污染。

2.2 关键生化特征

2.3 耐药谱背景

ATCC 6538 是甲氧西林敏感株（MSSA），对甲氧西林、万古霉素以及大多数 β-内酰胺类药物敏感。这个"敏感"背景让它当抗菌药物活性评价的阴性对照很合适，同时它也是监测新发耐药机制时灵敏度不错的"哨兵"菌株。

三、培养条件与保藏

3.1 培养基怎么选

ATCC 官方提示：传代尽量用 ATCC Medium 117，用替代培养基可能导致抗生素耐药谱等特定性状丢失。这一点做药敏质控的同事要格外注意。

3.2 培养参数

• 温度：35~37°C（ATCC 官方为 37°C；USP/EP 促生长试验为 30~35°C）
• 时间：18~24 小时（观察最终菌落形态可延至 48 小时）
• 气体环境：需氧（兼性厌氧，常规按需氧处理）
• 接种方式：斜面划线、平板涂布或肉汤接种均可，按用途定

3.3 复苏与传代

1. 冻干粉复苏：用适量无菌液体培养基溶解冻干粉，划线接种 TSA 平板，37°C 需氧培养 18~24 小时。
2. 代次管理：首次复苏是 P0 代，工作菌株别超过 P5 代。传多了表型会漂移，药敏 MIC 结果最受影响。
3. 工作菌株保藏：推荐 -70°C 甘油冻存；短期使用可 2~8°C 保存斜面。
4. ATCC 6538P MINI-PACK 形式：每管 200 µL 即用型甘油冻存，-80°C 或更低保存；-20°C 可短存（≤1 年）。解冻在 25~30°C 水浴快速进行（2~3 分钟），解冻后立即接种，不能再冻回去。

四、在标准体系里的位置

6538 能同时出现在药品、消毒、食品、纺织、家电、塑料这么多领域的检测标准里，一个重要原因是它"通用"：

• 美国药典 USP：<51> 抗菌效力测试、微生物限度检查促生长试验、指定微生物检测（金黄色葡萄球菌），标准菌株都是 ATCC 6538。
• 欧洲药典 EP：微生物限度计数（2.6.12）与指定微生物检测（2.6.13）等通则引用 S. aureus ATCC 6538。
• 日本药典 JP：同列标准试验菌株。
• 中国药典（ChP）：微生物限度检查、无菌检查培养基适用性验证等体系使用金黄色葡萄球菌标准菌株（各论中通常标注等效编号）。
• 中国国家标准/行业标准：GB 15979、GB 38456-2020、WS/T 650-2019、GB/T 20944.3、GB 21551.2、GB/T 31402-2023（等同采用 ISO 22196）。
• 国际标准：ISO 22196、ISO 20743、ASTM E2149 / E1053、EN 1040、JIS Z 2801、JIS L 1902 等。
• 美国 AOAC / EPA：洗手与消毒产品功效测试方法中的质控菌株。

采购的时候可以算一笔账：6538 一套菌种能同时覆盖药品、消毒、抗菌材料三类质控需求，比按项目单独买菌株省事也省钱，这也是多数实验室把它当"标配"的原因。

五、几个容易踩的坑

1. BSL-2 防护别放松：6538 虽是标准菌株，但属于 BSL-2 病原体，操作要在生物安全柜里进行，个人防护配齐。
2. 老文献的"耐药"别引用：早期青霉素耐药记录未经现代 CLSI 方法确认，现在 6538 就是敏感表型，报告里不用标耐药。
3. 传代次数：控制在 ≤5 代，这是保证药敏和抗菌结果可比性的前提。
4. 双菌落形态：血平板上出现不透明/半透明两种菌落是正常现象，不是污染。
5. 出口管制：ATCC 6538 属于特定出口管制类别（如 16-6A 相关清单）涉及菌株，采购时预留货期，下单前先确认进出口合规手续。

参考资料

1. ATCC 官网：Staphylococcus aureus subsp. aureus Rosenbach 6538 / 6538P / 6538DQ 产品说明书与产品页
2. GenBank 登录号 DQ212950（ATCC 6538 16S rRNA 基因序列）
3. 美国药典 USP <51> Antimicrobial Effectiveness Testing 及相关通则
4. 欧洲药典 EP 2.6.12 / 2.6.13；日本药典 JP（对应章节）
5. 《中国药典》微生物限度检查相关通则
6. WS/T 650-2019《抗菌和抑菌效果评价方法》
7. GB 15979《一次性使用卫生用品卫生标准》、GB 38456-2020《抗菌和抑菌洗剂卫生要求》
8. ISO 22196:2011《Measurement of antibacterial activity on plastics and other non-porous surfaces》

数据均来自公开权威渠道，仅供实验室技术参考，不构成采购或临床决策建议。