肺炎克雷伯菌 ATCC 700603 是 ESBL(超广谱 β-内酰胺酶)确证试验必须使用的阳性对照株,携带 SHV-18 型 ESBL 基因。它的结果直接决定当天所有 ESBL 确证试验是否可信。这篇文章把 700603 的来源、特性、培养和保藏讲清楚,数据依据 ATCC 官网产品资料和 CLSI M100。
一、菌株身份
| 项目 |
内容 |
| 学名 |
Klebsiella pneumoniae subsp. pneumoniae (Schroeter) Trevisan |
| ATCC 编号 |
700603(另有 700603-MINI-PACK 等形式) |
| 菌株命名 |
K6 [CCUG 45421, LMG 20218, MCV37] |
| 模式菌株 |
否 |
| 生物安全等级 |
BSL-2 |
| 分离来源 |
住院患者尿液,美国弗吉尼亚州 Richmond,1994 年 |
| 核心特征 |
产 SHV-18 型 ESBL(blaSHV-18 基因,位于约 80 kb 质粒) |
700603 由 NCCLS(CLSI 前身)选定为 ESBL 确证试验质控株,是临床实验室检测产 ESBL 肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和大肠埃希菌的关键基准。文献出处:Rasheed JK 等,Antimicrob Agents Chemother 2000;44:2382-2388。
二、生物学特性与耐药背景
- 革兰氏阴性短杆菌,MHA 上 35°C 培养 18 小时,菌落较大、灰白色、黏液状(产荚膜多糖)。
- 生化:氧化酶阴性、吲哚阴性、尿素酶阳性、枸橼酸盐阳性、赖氨酸脱羧酶阳性。
- SHV-18 型 ESBL:属 Ambler A 类,由 SHV-1 经点突变演化而来(与 SHV-1 差 9 个核苷酸、5 个氨基酸替换,包括第 238 位 Gly→Ala、第 240 位 Glu→Lys),底物谱扩展至头孢噻肟、头孢他啶等三代头孢和氨曲南,但不能水解碳青霉烯类和头孢霉素类。
- 等电聚焦显示单一 β-内酰胺酶,pI 7.8,底物偏好头孢噻肟;该菌还缺失 OmpK35/OmpK37 外膜孔蛋白。
三、培养与保藏
| 项目 |
内容 |
| ATCC 推荐培养基 |
ATCC Medium 3(营养琼脂/肉汤) |
| 培养温度 |
37°C |
| 培养时间 |
18~24 小时 |
| 气体环境 |
需氧 |
| 药敏试验培养基 |
MHA |
保藏要点:700603 的 ESBL 表型是核心价值,传代过多可能导致质粒丢失、表型退化。工作菌株 ≤5 代,-80°C 甘油冻存,多备原代。
四、在标准体系中的位置
- CLSI M100:ESBL 表型确证试验必须使用的阳性对照株。头孢他啶/克拉维酸与头孢噻肟/克拉维酸复合纸片与单药纸片相比,抑菌圈直径应扩大 ≥5 mm;
- CLSI M2-A9 / M7-A8:纸片法与稀释法方法学中的质控应用;
- 商业系统 QC:BD Phoenix 革兰阴性 AST 药敏/鉴定系统质控株。
五、常见问题
- 700603 是碳青霉烯耐药株吗? 不是。SHV-18 水解三代头孢和氨曲南,但不能水解碳青霉烯类;碳青霉烯耐药另有专门的检测体系。
- 和 35218 的区别:35218 产 TEM-1 广谱酶(非 ESBL),700603 产 SHV-18 ESBL,用途不同(详见对比文章)。
- 出口管制:700603 属肺炎克雷伯菌类菌株,采购时确认货期与进出口合规要求。
参考资料
- ATCC 官网:Klebsiella pneumoniae 700603 / 700603-MINI-PACK 产品页
- Rasheed JK, et al. Antimicrob Agents Chemother 2000;44:2382-2388.(PMID 10952583)
- CLSI M100 / M02 / M07
- 各耐药监测技术规范中 ESBL 确证试验要求
数据均来自公开权威渠道,仅供实验室技术参考,不构成采购或临床决策建议。