肠球菌的药敏质控,尤其是万古霉素相关检测,认准粪肠球菌 ATCC 29212。它同时覆盖纸片法和稀释法,是 CLSI M100 里肠球菌属的质控基准。这篇把 29212 在肠球菌药敏质控里的用法讲清楚。
一、29212 在肠球菌质控里的角色
粪肠球菌是肠球菌属最常见的临床分离菌之一,也是 VRE(万古霉素耐药肠球菌)监测的基础对象。29212 作为万古霉素敏感株,承担肠球菌属药敏质控的两类任务:
- 验证药敏系统(MHA/CAMHB、纸片、菌液浓度、培养条件)是否在控;
- 作为"敏感基准",让实验室能及时发现万古霉素等药物的异常结果(抑菌圈/MIC 超出范围即提示系统问题)。
二、纸片法与稀释法参数(依据 CLSI M02/M07 与 M100)
| 项目 |
纸片法 |
稀释法(MIC) |
| 菌悬液 |
0.5 麦氏(约 1.5×10⁸ CFU/mL) |
最终约 5×10⁵ CFU/mL |
| 培养基 |
MHA |
CAMHB |
| 培养 |
35°C±2°C,16~18 小时 |
35°C±2°C,16~20 小时 |
| 判读 |
抑菌圈直径 vs M100 范围 |
MIC 值 vs M100 范围 |
常用质控药物:氨苄西林、万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺、庆大霉素(筛选浓度)、链霉素(筛选浓度)等。其中高浓度庆大霉素(120 μg)和链霉素(300 μg)纸片的筛选试验,需要与 HLAR 阳性对照株 51299 配合使用(详见 51299 文章)。
三、其他质控用途
- Mueller-Hinton 琼脂验收(CLSI M6-A2);
- 培养基测试(CLSI M22-A3、ISO 11133);
- 血清杀菌试验(CLSI M21-A)、杀菌活性测定(CLSI M26-A)对照;
- 触酶试验阴性对照;
- 商业系统 QC:BD Phoenix、MicroScan、Sensititre 革兰阳性药敏/鉴定系统质控。
四、失控排查顺序
- 接种浓度:0.5 麦氏校准、稀释准确度;
- 培养基:CAMHB 阳离子浓度、MHA 质量;
- 培养条件:温度、时间(肠球菌生长较慢,注意 24 小时观察);
- 菌株:确认是 29212、代次 ≤5 代。
五、常见误区
- 用 51299 做常规肠球菌质控:51299 是 HLAR 阳性株,万古霉素等常规药物质控范围只对 29212 有效;
- 忽略万古霉素筛选:开展 VRE 筛查必须 29212(敏感对照)+ 51299(HLAR 对照)成对使用;
- 传代失控:肠球菌传代过多同样会漂移,控制 ≤5 代。
参考资料
- CLSI M100《Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing》;CLSI M02、M07
- CLSI M6-A2、M22-A3、M21-A、M26-A
- ATCC 官网:Enterococcus faecalis 29212 产品页
- EUCAST 药敏质控文件
试验参数来自公开权威标准文本,执行时以最新有效版本原文为准。