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ATCC 25922在药敏质控里怎么用?

发布日期:2026-09-05 08:53:18   浏览量:18

药敏试验做得准不准,一半靠操作,一半靠质控菌株。大肠埃希菌 ATCC 25922 是 CLSI M100 里肠杆菌科细菌的通用质控株,K-B 纸片法和肉汤稀释法都用它。这篇把 25922 在药敏质控里的具体用法、关键参数和常见坑讲清楚,实验室照着做就行。


一、25922 在药敏质控里的角色

大肠埃希菌是临床最常见的革兰阴性致病菌之一,也是肠杆菌科的代表。ATCC 25922 作为敏感型质控株(不产 β-内酰胺酶、不含 ESBL 基因),承担两类任务:

  1. 验证药敏试验系统:纸片、MHA/CAMHB 培养基、菌液浓度、接种量、培养条件是否在控;
  2. 作为结果判定的基准:它的质控范围在 CLSI M100 里逐年公布、每年更新。一旦 25922 的结果超出允许范围,当天该批患者样本的药敏结果全部无效。

ATCC 25922 与 ATCC 35218 是成对关系:25922 是敏感株,35218 是产 TEM-1 型 β-内酰胺酶的产酶株,两者搭配覆盖革兰阴性菌药敏质控的两个方向(详见对比文章)。

二、K-B 纸片扩散法怎么用

关键操作参数(依据 CLSI M02 与 M100):

步骤 参数
菌悬液浓度 调至 0.5 麦氏浊度(约 1.5×10⁸ CFU/mL)
接种时限 调菌后 15 分钟内完成涂布接种
培养基 MHA(Mueller-Hinton 琼脂),厚度 4 mm
培养条件 35°C±2°C,16~18 小时
判读 量抑菌圈直径(mm),与 M100 质控范围比对

适用药物示例:新霉素、黏菌素、卡那霉素、头孢氨苄、庆大霉素、头孢孟多、头孢噻吩、四环素、萘啶酸、氯霉素等。每种药物纸片在 M100 中都有对应的 25922 质控范围,超出范围即判失控。

三、肉汤稀释法(MIC)怎么用

关键操作参数(依据 CLSI M07 与 M100):

步骤 参数
培养基 CAMHB(阳离子调节 MH 肉汤)
最终接种浓度 5×10⁵ CFU/mL
培养条件 35°C±2°C,16~20 小时
判读 MIC 值(μg/mL),与 M100 质控范围比对

特别注意:ATCC 官方明确提示,25922 在肉汤中反复传代会导致 MIC 漂移。做稀释法时工作菌株应来自琼脂平板新鲜培养物,且传代不超过 5 代。

四、质控频次与失控处理

  • 常规质控:CLSI 建议每周做一次,或每批次新培养基/新纸片启用时必做。
  • 失控处理:先查试剂(培养基 pH、纸片效价)、再查操作(菌液浓度、接种时限、培养温度时间),找到原因后重新质控;连续失控要停用该批次试剂。
  • 记录要求:质控结果、菌株批号(COA)、代次、传代日期都要记录,可追溯是 CMA/CNAS 评审的硬要求。

五、25922 的其他质控用途

除了药敏,25922 还常用于:

  • 革兰氏染色阴性对照
  • 氧化酶试验阴性对照
  • 麦康凯、EMB 等选择性培养基的生长支持验证;
  • 商业药敏/鉴定系统(VITEK、MicroScan、Sensititre 等)的验证质控;
  • 食品与水质检测方法(如 EPA 方法)的阴性对照。

六、常见误区

  1. 拿 25922 做抗菌材料检测:抗菌塑料测试(ISO 22196)指定的是 8739,不是 25922,别混。
  2. 传代不控制:肉汤传代是 MIC 漂移的第一大来源。
  3. 菌液浓度凭感觉:0.5 麦氏必须用比浊仪或标准管校准,浓度不准,结果全歪。
  4. 忽略时效:调菌后 15 分钟不接种、培养超 18 小时,都会让抑菌圈偏大或偏小。

参考资料

  1. CLSI M100《Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing》;CLSI M02(纸片扩散法);CLSI M07(稀释法)
  2. ATCC 官网:Escherichia coli 25922 产品页与 Product Sheet
  3. 国家/地方耐药监测技术规范中的药敏质控菌株要求
  4. ATCC 25922 在商业药敏系统中的应用资料(Abbott、VITEK、MicroScan 等)

试验参数均来自公开权威标准文本,执行时以最新有效版本原文为准。

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