菌株来源与保藏信息
支气管鲍特杆菌 ATCC 4617(Bordetella bronchiseptica (Ferry) Moreno-Lopez)菌株代号 NRRL B-140(其他保藏号:DSM 10303、NCTC 8344、WHO 11 等),已完成全基因组测序。该株是抗生素微生物效价测定(粘菌素、多粘菌素 B 药敏纸片试验)的标准测试菌株,被推荐用于 EP 2.7.2 及 USP 抗生素微生物检测,同时是实验动物(犬、猪、啮齿类)呼吸道感染的常见病原。
杭州康氧以 ATCC 原装 0 代形式提供本菌株,附 ATCC 官方证书(COA)。定量基因组 DNA 版本(4617-DQ)亦可供 qPCR 标准曲线使用。
生物学特性
支气管鲍特杆菌为革兰阴性小球杆菌,大小约 0.3–0.5×1.0–1.5 μm,有动力(周生鞭毛),无芽孢,专性需氧。在 Bordet-Gengou 培养基或血琼脂上 37°C 培养 24 h 形成直径 1–2 mm、灰白色、光滑凸起菌落,不产色素。该菌尿素酶阳性、氧化酶阳性,可区别于百日咳鲍特菌。
| 特征 | ATCC 4617 表现 |
| 革兰染色 | 阴性 |
| 动力 | 阳性(周生鞭毛) |
| 尿素酶 | 阳性(快速分解尿素) |
| 氧化酶 | 阳性 |
| 触酶 | 阳性 |
| 麦康凯生长 | 可生长(与百日咳鲍特菌鉴别) |
| 生长温度 | 35–37°C |
该菌是犬窝咳(犬传染性支气管炎)的重要病原,也可感染猪(萎缩性鼻炎)及实验动物呼吸道,为条件致病菌。与百日咳鲍特菌(B. pertussis)相比,宿主范围更广、麦康凯可生长、尿素酶阳性。
培养条件与保藏方法
复苏步骤
- 冻干粉室温平衡 10–15 分钟。
- 生物安全柜内,用约 0.5 mL 无菌 Bordet-Gengou 肉汤(ATCC Medium 35)或营养肉汤重悬冻干粉。
- 悬液转接至 5–6 mL 相应肉汤管,取数滴接种 B-G 琼脂平板(含甘油/血)。
- 37°C 需氧培养 24 h。
常规培养
| 参数 | 推荐条件 |
| 固体培养基 | Bordet-Gengou 琼脂(ATCC Medium 35)、血琼脂、营养琼脂 |
| 液体培养基 | B-G 肉汤、营养肉汤 |
| 温度 | 37°C |
| 培养时间 | 24 h(初次复苏可延至 48 h) |
| 气体环境 | 需氧 |
保藏建议
| 保藏方式 | 条件 | 有效期 |
| 短期工作菌种 | 血琼脂斜面 2–8°C,每 2–4 周传代 | 1 个月 |
| 中长期冻存 | 15–20% 甘油肉汤,-70°C | ≥ 2 年 |
| 长期保藏 | 冷冻干燥法 | ≥ 10 年 |
⚠ 注意:本菌株为 BSL-2 生物安全等级,操作需在 II 级生物安全柜中进行。用于效价测定时菌种代次管理尤为关键(≤5 代),避免应答特性漂移影响抑菌圈结果。
质控与标准化应用
抗生素微生物效价测定
ATCC 4617 是 EP 2.7.2(抗生素微生物测定法)及 USP 抗生素微生物检测的指定测试菌株,用于粘菌素(colistin)、多粘菌素 B(polymyxin B)等抗菌药物的纸片扩散/管碟法效价测定,评价抑菌圈直径与浓度响应关系。
实验动物呼吸道病原监测
支气管鲍特杆菌是 SPF 级实验动物(大鼠、豚鼠、兔、犬)呼吸道监测项目之一(GB 14922),4617 作为阳性对照菌用于培养法与血清学检测体系验证。
药敏纸片质量控制
作为粘菌素/多粘菌素 B 药敏纸片的质控株,用于评估纸片含药量、试验体系及判读标准的准确性。
常见问题与注意事项
Q: 4617 与百日咳鲍特菌如何区分?
4617(支气管鲍特菌)尿素酶阳性、麦康凯可生长、有动力;百日咳鲍特菌尿素酶阴性、麦康凯不生长、无动力。两者均致呼吸道感染但宿主与检测方法不同。
Q: 为什么效价测定必须严格控制代次?
抗生素效价测定依赖菌株对药物的稳定应答(抑菌圈大小)。传代过多会导致敏感性漂移,使效价计算结果失真,故工作菌种严格控制在 5 代以内。
Q: 能用于临床诊断吗?
不能。本产品仅限科研、质检与教学用途,不可用于临床诊断、治疗或人体/动物接种。
Q: 4617对犬用疫苗开发的意义?
支气管鲍特杆菌是犬舍咳疫苗的核心抗原之一——4617作为标准参考株用于疫苗效力试验的攻毒菌株。其O抗原和百日咳毒素启动子(ptx)的缺失使其区别于百日咳鲍特杆菌——在百日咳疫苗的纯度检测中作为交叉反应阴性对照。
订购信息
| 产品名称 | 支气管鲍特杆菌标准菌株 ATCC 4617 |
| 拉丁名 | Bordetella bronchiseptica (Ferry) Moreno-Lopez |
| 保藏中心编号 | ATCC 4617(NRRL B-140) |
| 产品形式 | 冻干粉(0 代原装),附 ATCC 官方证书 |
| 存储条件 | 2–8°C 避光保存 |
| 生物安全等级 | BSL-2 |
| 供应商 | 杭州康氧医疗器械有限公司 |
技术免责声明:本文技术参数来源于公开发表的ATCC官方产品信息及相关标准文件,仅供实验室专业人员参考。杭州康氧医疗器械有限公司对因使用本文信息产生的任何后果不承担责任。如需技术咨询或产品订购,请联系杭州康氧医疗器械有限公司。
参考资料
- ATCC 官网:Bordetella bronchiseptica (Ferry) Moreno-Lopez 4617 — 产品页与 Product Sheet
- 欧洲药典 EP 2.7.2 Microbiological Assay of Antibiotics
- USP Antibiotics-Microbial Assays(USP34-NF29 引用)
- GB 14922—2022 实验动物 微生物学等级及监测
- Mattoo S & Cherry JD (2005): Molecular pathogenesis of Bordetella — Clinical Microbiology Reviews
- Goodnow RA (1980): Biology of B. bronchiseptica — Microbiological Reviews