菌株来源与保藏信息
单核细胞增生李斯特菌 ATCC 19115(Listeria monocytogenes (Murray et al.) Pirie)由 Seeliger 等人保藏,菌株代号 Li 2,分离自人类样本。该株为血清型 4b,是食品微生物检验中最常引用的单增李斯特菌质控菌株之一,已完成全基因组测序,作为 Preceptrol 参考培养物在全球实验室使用。
杭州康氧以 ATCC 原装 0 代形式提供本菌株,每批次附带 ATCC 官方证书(Certificate of Analysis)。工作菌种自冻干管起使用不超过第 5 代,避免致病性与生化表型漂移。
生物学特性
单核细胞增生李斯特菌为革兰阳性短杆菌,大小约 0.5×1.0–2.0 μm,常单个或短链排列,无芽孢,具周生鞭毛(25°C 下运动活跃,37°C 运动减弱)。菌落细小,血琼脂上呈窄 β 溶血环,与其他李斯特菌种的溶血特征不同。
| 特征 | ATCC 19115 表现 |
| 革兰染色 | 阳性 |
| 血清型 | 4b(食品/临床流行血清型) |
| 溶血性 | β 溶血(窄溶血环) |
| 触酶 | 阳性 |
| CAMP 试验 | 阳性(与金黄色葡萄球菌协同增强溶血) |
| 动力 | 25°C 阳性(倒置显微镜可见翻滚运动) |
| 生长温度 | 4–45°C(嗜冷性,冷链食品可缓慢增殖) |
在 TSA/BHI 琼脂上 35–37°C 培养 24 h 形成直径 1–2 mm、灰白色、光滑湿润菌落。在 PALCAM 或 Oxford 选择性培养基上呈现典型黑色菌落(esculin 水解),可用于初步鉴定。
培养条件与保藏方法
复苏步骤
- 冻干粉室温平衡 10–15 分钟,避免直接打开导致水汽进入。
- 生物安全柜内,用 0.5–1.0 mL 无菌 BHI 肉汤(ATCC Medium 44)重悬冻干粉。
- 将悬液全部转接至 5–6 mL BHI 肉汤管,混匀后取数滴划线接种 BHI 琼脂平板。
- 37°C 需氧培养 24 h。初次复苏菌落细小属正常,传一代后生长恢复典型状态。
常规培养
| 参数 | 推荐条件 |
| 固体培养基 | BHI 琼脂、TSA、血琼脂(可加 5% 羊血观察溶血) |
| 液体培养基 | BHI 肉汤、TSB |
| 温度 | 35–37°C(选择性增菌用 30°C) |
| 培养时间 | 18–24 h(增菌可延长至 48 h) |
| 气体环境 | 需氧(兼性厌氧) |
保藏建议
| 保藏方式 | 条件 | 有效期 |
| 短期工作菌种 | BHI 斜面 2–8°C,每月传代 | 1 个月 |
| 中长期冻存 | 15–20% 甘油 BHI,-70°C | ≥ 2 年 |
| 长期保藏 | 冷冻干燥法 | ≥ 10 年 |
⚠ 注意:本菌株为 BSL-2 生物安全等级,属人兽共患病原,操作需在 II 级生物安全柜中进行。传代超过 5 代可能影响溶血活性与毒力相关基因表达,建议按代次管理。
质控与标准化应用
食品微生物检验
ATCC 19115 是 GB 4789.30(单核细胞增生李斯特氏菌检验)的标准质控菌株,用于培养基促生长验证、增菌液性能测试及方法适用性确认。在 ISO 11290 体系中同样作为李斯特菌检测方法验证的参考株。
CAMP 试验阳性对照
李斯特菌鉴定中的 CAMP 试验,需以金黄色葡萄球菌(如 ATCC 25923)提供 CAMP 因子。19115 作为 β 溶血阳性株,用于验证 CAMP 试验体系的正确性——在血平板上与金葡划线垂直交叉,出现箭头状增强溶血区即判阳性。
食品安全监测与风险研究
李斯特菌是冷链食品(即食肉制品、乳制品、熟食)监控的重点食源性病原。19115 血清型 4b 为临床暴发常见血清型,常用于杀菌工艺验证、冷链风险模拟及分子检测(PCR/测序)阳性对照。
常见问题与注意事项
Q: 19115 和 19111 有什么区别?
两者均为单增李斯特菌质控株:19111 常作为培养基验收与药敏参考(血清型 1/2a 或 4b 因批而异),19115 为经典的食品检验阳性对照株(血清型 4b)。具体用途以标准方法引用为准,采购前可先确认目标标准条款。
Q: 为什么 25°C 培养要观察动力?
单增李斯特菌在 25°C 下鞭毛表达活跃,呈翻滚样运动,是与其他李斯特菌及革兰阳性杆菌鉴别的重要特征;37°C 时鞭毛减少,运动观察须在低温进行。
Q: 能用于临床诊断吗?
不能。本产品仅限科研、质检与教学用途,不可用于临床诊断、治疗或人体/动物接种。
Q: 19115(4b)和13032(1/2a)在食品检验中如何搭配使用?
两株血清型互补覆盖>90%临床病例。GB 4789.30推荐两者同时使用作为完整阳性对照——19115代表与妊娠和新生儿感染相关的4b血清型、13032代表食品和环境中最常检出的1/2a血清型。单一血清型阳性对照不足以验证检测体系对全部致病性李斯特菌血清型的覆盖。
订购信息
| 产品名称 | 单核细胞增生李斯特菌标准菌株 ATCC 19115 |
| 拉丁名 | Listeria monocytogenes (Murray et al.) Pirie |
| 保藏中心编号 | ATCC 19115 |
| 菌株代号 | Li 2(血清型 4b) |
| 产品形式 | 冻干粉(0 代原装),附 ATCC 官方证书 |
| 存储条件 | 2–8°C 避光保存 |
| 生物安全等级 | BSL-2 |
| 供应商 | 杭州康氧医疗器械有限公司 |
技术免责声明:本文技术参数来源于公开发表的ATCC官方产品信息及相关标准文件,仅供实验室专业人员参考。杭州康氧医疗器械有限公司对因使用本文信息产生的任何后果不承担责任。如需技术咨询或产品订购,请联系杭州康氧医疗器械有限公司。
参考资料
- ATCC 官网:Listeria monocytogenes (Murray et al.) Pirie 19115 — 产品页与 COA
- GB 4789.30—2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 单核细胞增生李斯特氏菌检验
- ISO 11290-1:2017 Microbiology of the food chain — Horizontal method for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes
- GB 4789.30-2016《单核细胞增生李斯特菌检验》
- Swaminathan B & Gerner-Smidt P (2007): The epidemiology of human listeriosis — Microbes and Infection