菌株来源与保藏信息
金黄色葡萄球菌 ATCC 29213(Staphylococcus aureus subsp. aureus Rosenbach)是 CLSI M100 指定的葡萄球菌属药敏试验质控菌株,用于 MIC 测定(肉汤微量稀释法)的日常质控。该菌株最初分离自临床伤口感染样本,对甲氧西林敏感(MSSA),不携带 mecA 基因,β-内酰胺酶弱阳性。ATCC 29213 的基因型背景清晰(已全基因组测序),在连续传代中耐药表型高度稳定。
杭州康氧以 ATCC 原装 0 代冻干粉形式提供,附 ATCC 检测报告(COA),含批号信息。
生物学特性
| 特征 | ATCC 29213 表现 |
| 革兰染色 | 阳性球菌,葡萄串状 |
| 凝固酶 | 阳性 |
| mecA 基因 | 阴性(MSSA) |
| β-内酰胺酶 | 弱阳性——对青霉素的 MIC 为 0.25–1 μg/mL |
| 溶血性 | β 溶血 |
| DNase | 阳性 |
| 耐药型 | 野生型 MSSA——除青霉素(β-内酰胺酶)外对常规药物敏感 |
| 最适温度 | 35±2°C |
金黄色葡萄球菌 ATCC 29213 是 β-内酰胺酶阴性、mecA 基因阴性的甲氧西林敏感型金黄色葡萄球菌(MSSA)——这是 CLSI 选择它作为葡萄球菌药敏质控株而非 6538 的关键原因。6538(同样为 MSSA)是防腐挑战菌株,主要用于化妆品和消毒剂的微生物挑战试验——而 29213 是经过 CLSI 多中心协同研究验证的专用 MIC 测定质控菌株,其 MIC 范围覆盖了从青霉素到万古霉素的完整抗菌谱。29213 的 PBP2a 蛋白(由 mecA 编码)表达阴性——在头孢西丁纸片试验中产生 ≥22mm 的抑菌圈——这与 MRSA(如 ATCC 43300)的 ≤21mm 形成鲜明对照。对于从事葡萄球菌药敏试验的实验室,29213 是每日质控板上不可或缺的菌株。
培养条件与保藏
| 参数 | 推荐条件 |
| 固体培养基 | TSA、MHA(需补充 2–5% 裂解马血用于甲氧苄啶/磺胺类药敏) |
| 液体培养基 | TSB、CAMHB |
| 温度 | 35±2°C(不可高于 37°C——mecA 表达是温度敏感的) |
⚠ 注意:ATCC 29213 的 β-内酰胺酶表达在 TS B中可轻微上调。用于药敏试验的过夜培养物必须从 TSA(非血琼脂)挑取——血琼脂中的血细胞成分可提供外源营养、改变生长速率、间接影响 MIC。
保藏条件
| 保藏方式 | 条件 | 存活期限 |
|---|
| TSA 斜面(4°C) | 封口膜密封冷藏 | 1-2 个月 |
| TSB+15% 甘油(-70°C) | 冻存管,液氮速冻后转 -70°C | 2 年以上 |
| 冻干粉(4°C) | 原装密封西林瓶 | 见 ATCC 检测报告标注有效期 |
冻干粉复苏步骤
- 在生物安全柜中开启冻干粉西林瓶。
- 用无菌注射器加入 0.3-0.5 mL TSB,轻轻旋转重悬。
- 将菌悬液全部转移至 TSA 斜面或平板,35±2°C 孵育 18-24h。
- 复苏成功后挑取单菌落在 MHA 平板上划线——确认菌落形态和纯度。
- 取过夜培养的纯菌落配制 0.5 McFarland 菌悬液,接种 MHA 药敏平板——与 CLSI M100 中列出的 QC 范围核对,确认菌株对抗生素的 MIC 值在允许范围内,方可投入日常质控使用。
药敏质控应用
CLSI M100 指定质控范围
| 抗菌药物 | MIC(μg/mL) |
| 苯唑西林 | 0.12–0.5 |
| 万古霉素 | 0.5–2 |
| 达托霉素 | 0.12–1 |
| 克林霉素 | 0.06–0.25 |
| 复方新诺明(TMP/SMX) | ≤ 0.5/9.5 |
| 利奈唑胺 | 1–4 |
| 左氧氟沙星 | 0.12–0.5 |
| 红霉素 | 0.25–1 |
与 ATCC 25923 的分工
29213 用于 MIC 测定质控,25923 用于纸片扩散法质控。CLSI 明确将两株菌的质控范围分开列出——29213 的重复性在微量肉汤稀释法中更优,25923 在纸片扩散法中更优。不可互换——用 25923 做 MIC 质控或用 29213 做纸片法质控都会给出错误范围。
与 ATCC 6538 的分工
ATCC 6538 是防腐挑战株(USP <51>),ATCC 29213 是药敏质控株(CLSI M100)。两者同为金葡菌但法规定位不同——6538 未被 CLSI 纳入药敏体系,29213 未被药典纳入防腐体系。
常见问题
Q: 29213 的万古霉素 MIC 持续偏高(2 μg/mL)正常吗?
需要关注但可能仍在质控范围内。CLSI 万古霉素 MIC 质控范围为 0.5–2 μg/mL。若持续在 2 μg/mL(范围上限边缘),检查:① 接种浓度是否偏高(> 0.5 McF);② 培养时间是否 > 24h(延长培养可使 MIC 虚高 1 个稀释度);③ 更换新批号 CAMHB。若排除技术因素后 MIC 仍持续为 2 且 > 上限,菌株可能已发生自发性万古霉素中间耐药(VISA)变异——需更换新支冻干粉。
Q: 苯唑西林 MIC 用于判断 MRSA 吗?
ATCC 29213 的苯唑西林 MIC 质控范围为 0.12–0.5 μg/mL(MSSA 范围),用于验证 MIC 方法的准确性,而非作为 MRSA 判读的参照。MRSA 的苯唑西林折点 ≥ 4 μg/mL——若 29213 的 MIC > 2 μg/mL,说明方法问题而非菌株变成了 MRSA。
Q: 29213 和 6538 都是金葡菌 MSSA,可以互换吗?
不可以。虽然两者的耐药谱高度重合,但 29213 是 CLSI 经过多中心协同研究(M23-A4)验证的专用 MIC 质控菌株——其对每一种抗生素的 MIC 范围都经过了数百个实验室的统计验证。6538 是防腐挑战试验用菌株,其 MIC 质控数据未被 CLSI 收录。在药敏试验中混用 6538 代替 29213 将导致无法引用 CLSI 标准进行质控判断——外部审计时会直接开不符合项。
订购信息
| 产品名称 | 金黄色葡萄球菌标准菌株 ATCC 29213 |
| 拉丁名 | Staphylococcus aureus subsp. aureus Rosenbach |
| 保藏中心编号 | ATCC 29213 |
| 产品形式 | 冻干粉(0 代原装),附 ATCC 检测报告(COA) |
| 供应商 | 杭州康氧医疗器械有限公司 |
技术免责声明:本文技术参数来源于公开发表的 ATCC 官方产品信息、CLSI M100 文件以及现行药典标准,仅供实验室专业人员参考。药敏试验结果受培养基品牌、接种量、孵育条件和判读方式等多种因素影响——不同实验室间的 MIC 值在 ±1 个二倍稀释度内的波动属于方法学可接受的变异范围。杭州康氧医疗器械有限公司对因使用本文信息产生的任何后果不承担责任。如需技术咨询或产品订购,请联系杭州康氧医疗器械有限公司。
参考资料
- ATCC 官网:Staphylococcus aureus 29213 产品页与检测报告(COA)
- CLSI M100:Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing,现行版本
- EUCAST:EUCAST clinical breakpoints,万古霉素 MIC 测定方法与 QC 范围
- FDA-CDER:Antibacterial Susceptibility Test Interpretive Criteria
- CLSI M07:Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests
- CLSI M02:Performance Standards for Antimicrobial Disk Susceptibility Tests