菌株来源与保藏信息
大肠埃希菌 ATCC 25922(Escherichia coli (Migula) Castellani and Chalmers)是全球微生物实验室中使用频率最高的药敏试验质控菌株之一。该菌株 1946 年由 FDA 西雅图实验室从临床样本中分离,后保藏于 ATCC。与 ATCC 8739(定位于防腐挑战)不同,ATCC 25922 被 CLSI M100(抗菌药物敏感性试验执行标准)指定为肠杆菌科药敏试验的推荐质控菌株,每批药敏纸片或 MIC 板的性能验证均需以本菌株进行质控测试。
ATCC 25922 全基因组已测序(GenBank CP009072),菌株不携带 ESBL、碳青霉烯酶或其他获得性耐药基因,属典型野生型敏感株。
杭州康氧以 ATCC 原装 0 代冻干粉形式提供,每批次附 ATCC 检测报告(COA),含批号信息。
生物学特性
| 特征 | ATCC 25922 表现 |
| 革兰染色 | 阴性短杆菌 |
| 氧化酶 | 阴性 |
| 吲哚 | 阳性 |
| MR-VP | MR 阳性 / VP 阴性 |
| 乳糖发酵 | 阳性(MacConkey 上粉红色菌落) |
| EMB 特征 | 金属绿色光泽 |
| β-内酰胺酶 | 低水平表达染色体 AmpC(不产超广谱酶) |
| 血清型 | O6 生物型 |
| 耐药谱 | 野生型——对常规抗菌药物敏感 |
| 最适温度 | 35±2°C |
培养条件与保藏
| 参数 | 推荐条件 |
| 固体培养基 | TSA、MHA(Mueller-Hinton 琼脂,药敏试验强制使用) |
| 液体培养基 | TSB、MHB(Mueller-Hinton 肉汤,MIC 测定用) |
| 温度 | 35±2°C |
| 培养时间 | 18–24 h;药敏试验使用对数期新鲜培养物 |
⚠ 药敏试验关键提示:CLSI 要求药敏质控菌株从非选择性培养基(TSA 或 MHA)上的过夜培养物挑取单个菌落制备接种悬液。禁止使用选择性培养基(MacConkey、EMB)上的菌落,因为染料和胆盐残留可能干扰抗菌药物活性。接种悬液浓度应为 0.5 McFarland(≈1.5×10⁸ CFU/mL),必须在 15 分钟内完成接种。
药敏质控应用
CLSI M100 指定质控范围
| 抗菌药物 | 纸片法抑菌圈(mm) | MIC(μg/mL) |
| 氨苄西林 | 16–22 | 2–8 |
| 头孢唑林 | 21–27 | 1–4 |
| 庆大霉素 | 19–26 | 0.25–1 |
| 环丙沙星 | 30–40 | 0.004–0.015 |
| 亚胺培南 | 26–32 | 0.06–0.25 |
| 左氧氟沙星 | 29–37 | 0.008–0.06 |
注:以上为常见药物的典型质控范围,具体以 CLSI M100 最新版为准。
药敏质控规则
每批药敏试验(纸片扩散法或 MIC 法)必须包含 ATCC 25922 作为质控菌株。质控频率:连续测试 20–30 天建立基线后,可降为每周一次。若质控值连续 2 次或 3 次中有 2 次超出范围(Westgard 规则 2₂ₛ),需排查:抗菌药物效价、培养基厚度(MHA 须 4±0.5 mm)、接种浓度、培养温度和时间。
ATCC 25922 vs ATCC 8739 分工
ATCC 25922 是药敏质控株(CLSI M100),ATCC 8739 是防腐挑战株(USP <51>)。两者不可互换——用 25922 做防腐挑战或用 8739 做药敏质控都会导致方法偏离。
常见问题
Q: 25922 的 MIC 出界了怎么办?
先排查最易出错环节:① 抗菌药物储存条件(是否在效期内、是否冻融);② MHA 厚度(过厚=抑菌圈偏小=MIC 偏高,过薄则相反);③ 0.5 McFarland 浊度是否准确(浊度仪须定期校准)。以上排除后仍未恢复,更换新批号 25922 重试。
Q: 25922 能做 ESBL 确认试验吗?
ATCC 25922 野生型对头孢他啶和头孢噻肟敏感(不产 ESBL),在 ESBL 表型确认试验中用作阴性质控(不加克拉维酸时敏感,加克拉维酸后抑菌圈无显著变化)。阳性对照使用 ATCC 700603(产 ESBL 肺炎克雷伯菌)。
Q: 低温存放后的 25922 接种药敏试验需提前活化吗?
需要。从 4°C 斜面或 -70°C 冻存取出的菌株,应先传代至 TSA/MHA 平板 35°C 过夜培养(第一代),再挑取单个菌落转接至新鲜平板过夜培养(第二代)——用第二代新鲜培养物制备药敏接种悬液。直接用第一代可能导致生长不均匀、抑菌圈偏小。
订购信息
| 产品名称 | 大肠埃希菌标准菌株 ATCC 25922 |
| 拉丁名 | Escherichia coli (Migula) Castellani and Chalmers |
| 保藏中心编号 | ATCC 25922 |
| 产品形式 | 冻干粉(0 代原装),附 ATCC 检测报告(COA) |
| 供应商 | 杭州康氧医疗器械有限公司 |
技术免责声明:CLSI 质控范围以 CLSI M100 最新版本为准,本文数据仅供参考。
参考资料
- CLSI M100: Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing, current
- ATCC: Escherichia coli 25922 product page & COA
- CP009072: E. coli ATCC 25922 complete genome (NCBI)