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ATCC BAA-2146 产KPC肺炎克雷伯菌 Klebsiella pneumoniae 标准菌株
ATCC BAA-2146 产KPC-2型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌，CLSI mCIM/eCIM阳性质控。杭州康氧ATCC 0代原装供应。
✓ ATCC 原装 0 代
✓ COA 随货
✓ 冷链配送
✓ 技术支持
菌株来源与保藏信息
ATCC BAA-2146（Klebsiella pneumoniae）是一株产 KPC-2 型碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌临床参考菌株，BSL-2。该菌株于 2008 年从美国纽约的医院感染患者体内分离，其 blaKPC-2 基因位于 Tn4401 转座子上——这是 KPC 基因在全球传播的最主要遗传载体。BAA-2146 对几乎所有 β-内酰胺类抗生素（包括碳青霉烯类——亚胺培南、美罗培南、厄他培南）耐药，对头孢他啶-阿维巴坦敏感（KPC-2 对阿维巴坦敏感，区别于金属-β-内酰胺酶如 NDM 对阿维巴坦耐药）。作为 CLSI M100 推荐的 mCIM（改良碳青霉烯酶灭活试验）阳性质控菌株，BAA-2146 已替代传统的改良 Hodge 试验（MHT）成为碳青霉烯酶表型确证的参考标准。
杭州康氧以 ATCC 原装 0 代冻干粉形式提供，附 ATCC 检测报告（COA），含批号信息。
生物学特性
| 特征 | ATCC BAA-2146 表现 |
|---|---|
| 革兰染色 | 阴性杆菌 |
| 氧化酶 | 阴性 |
| MacConkey 生长 | 阳性——粉红色粘稠菌落（乳糖发酵产酸） |
| 碳青霉烯酶 | KPC-2 阳性（Ambler A 类丝氨酸碳青霉烯酶） |
| mCIM 试验 | 阳性——美罗培南抑菌圈 6–15mm（≤15mm 为阳性） |
| eCIM 试验 | 阴性——mCIM 阳性+eCIM 阴性 = KPC 等丝氨酸碳青霉烯酶 |
| 头孢他啶-阿维巴坦 | 敏感（MIC ≤8/4 μg/mL）——区别于 MBL（NDM/VIM/IMP） |
| 菌落形态 | TSA 上圆形凸起乳白色、粘液型（荚膜多糖过表达——拉丝试验阳性） |
| 荚膜血清型 | 未分型（临床分离参考株） |
| 获得性耐药基因谱 | blaKPC-2 + blaSHV + blaTEM + aac(6')-Ib + qnrB |
BAA-2146 的特征性超粘液表型（hypermucoviscous phenotype）与荚膜多糖过表达相关——在 TSA 上 24h 后用接种环触碰菌落可拉出 >5mm 的粘丝（"拉丝试验"阳性）。此表型由 RmpA/RmpA2 调节因子和 K1/K2 荚膜血清型的基因簇共同控制——在抗生素压力下（特别是在含亚胺培南的培养基上传代），此表型可能因外膜蛋白 OmpK35/OmpK36 的互补性缺失而减弱——菌落转为干燥小菌落——这并不代表菌株退化而是适应性的表型转换。
培养条件与保藏
保藏条件
| 保藏方式 | 条件 | 期限 |
|---|---|---|
| TSA斜面(4C) | 封口膜密封 | 1-2月 |
| TSB+15%甘油(-70C) | 冻存管液氮速冻 | 2年+ |
| 冻干粉(4C) | 原装密封 | 见ATCC检测报告 |
冻干粉复苏步骤
- 在生物安全柜中开启冻干粉西林瓶。
- 用无菌注射器加入0.3-0.5mL TSB，轻轻旋转重悬。
- 转移至TSA平板或斜面，35 +/- 2C孵育18-24h。
- 复苏后挑取单菌落验证纯度，确认表型合格后投入日常使用。
| 参数 | 推荐条件 |
|---|---|
| 固体培养基 | TSA、MacConkey、MHA（药敏试验） |
| 液体培养基 | TSB、CAMHB（肉汤稀释法 MIC 测定） |
| 温度 | 35±2°C |
| 培养时间 | 18–24 h |
⚠ 质控关键：BAA-2146 携带的 blaKPC-2 位于 Tn4401 转座子上——该转座子在不同代次的培养中可能发生切除（excision），导致 blaKPC-2 丢失并恢复对碳青霉烯类的部分敏感性。每次 mCIM 质控前必须在含厄他培南（2 μg/mL）或美罗培南（1 μg/mL）的 MHA 上划线验证耐药表型——BAA-2146 应在含药平板上正常生长。若含药平板无菌落生长——该株已退化——应从 -70°C 冻存管重新复苏。
保藏条件
| 保藏方式 | 条件 | 存活期限 |
|---|---|---|
| TSA 斜面（4°C） | 封口膜密封，冷藏 | 1–2 个月 |
| TSB+15% 甘油（-70°C） | 冻存管，液氮速冻后转 -70°C | 2 年以上 |
| 冻干粉（4°C） | 原装密封西林瓶 | 见 ATCC 检测报告标注有效期 |
冻干粉复苏步骤
- 在 BSL-2 生物安全柜中开启 BAA-2146 冻干粉西林瓶。
- 用无菌注射器加入 0.3–0.5 mL TSB，轻轻旋转重悬。
- 将菌悬液全部转移至 TSA 平板，35±2°C 孵育 18–24 h。
- 复苏成功后挑取单菌落——在 MacConkey 琼脂上确认粉红色粘稠菌落形态。
- 取纯菌落进行 mCIM 试验——确认美罗培南抑菌圈 6–15mm（阳性）——并同时进行 eCIM 确认为阴性，方可投入日常质控使用。
- 用 TSB+15% 甘油重悬分装，-70°C 冻存。
质控应用——mCIM/eCIM 阳性质控
mCIM 试验步骤（CLSI M100）
- 取 BAA-2146 过夜纯培养，用 2 mL TSB 配制 1 μL 接种环量的菌悬液。
- 放入含 10 μg 美罗培南纸片的菌悬液中，35±2°C 孵育 4h ± 15min。
- 取出美罗培南纸片贴于已涂布大肠埃希菌 25922 的 MHA 平板上。
- 35±2°C 孵育 18–24h 后测量抑菌圈——≤15mm 为 mCIM 阳性。
mCIM 质控配对
| 菌株 | 碳青霉烯酶 | mCIM | eCIM | 判读 |
|---|---|---|---|---|
| BAA-2146（阳性对照） | KPC-2（丝氨酸型） | 阳性（≤15mm） | 阴性 | 丝氨酸碳青霉烯酶（KPC/OXA-48-like） |
| 25922（阴性对照） | 无 | 阴性（≥18mm） | N/A | 无碳青霉烯酶活性 |
| BAA-2340（MBL 阳性） | NDM-1（金属型） | 阳性 | 阳性 | 金属-β-内酰胺酶（NDM/VIM/IMP） |
常见问题
Q: mCIM 阳性+eCIM 阳性——这个结果对吗？
不对。BAA-2146 携带 KPC-2（A 类丝氨酸碳青霉烯酶），对 EDTA 不敏感——eCIM 应为阴性（美罗培南抑菌圈与 mCIM 相差 ≤5mm）。若 eCIM 出现阳性（差值 ≥5mm），可能原因：① 孵育时间超出 4h ±15min 的允许范围——美罗培南被过度水解导致假 eCIM 阳性；② 接种菌量过多——超过了 1μL 接种环的标准量；③ 该批菌株被产 NDM 或 VIM 的杂菌污染——应重新从冻干粉复苏。
Q: BAA-2146 和 700603 都是产酶肺克——区别在哪？
700603 产 SHV-18 型 ESBL（广谱 β-内酰胺酶），仅水解三代头孢菌素（头孢他啶、头孢噻肟），对碳青霉烯类（亚胺培南、美罗培南）敏感。BAA-2146 产 KPC-2 型碳青霉烯酶——不仅水解三代头孢，还能水解碳青霉烯类——对亚胺培南和美罗培南均耐药。两者的 MIC 表型完全不同——700603 是 ESBL 确证试验（头孢他啶±克拉维酸）的阳性质控，BAA-2146 是 mCIM/eCIM 的阳性质控——不可互换。
Q: 可以用 BAA-2146 做碳青霉烯类的药敏 QC 吗？
CLSI M100 未将 BAA-2146 列入常规药敏质控菌株的 QC 范围表——因为 KPC-2 的表达水平在不同实验室间变异较大（受培养基批号、二价阳离子浓度和孵育时间影响）。BAA-2146 的应用限于碳青霉烯酶表型确证试验（mCIM/eCIM）的阳性质控——不可用于常规 MIC 或纸片扩散法的 QC。
订购信息
| 产品名称 | 产KPC肺炎克雷伯菌标准菌株 |
|---|---|
| 拉丁名 | Klebsiella pneumoniae |
| 保藏中心编号 | ATCC BAA-2146 |
| 参考信息 | blaKPC-2/Tn4401 |
| 产品形式 | 冻干粉（0代原装），附ATCC检测报告 |
| 存储条件 | 2-8度C避光保存 |
如需批量订购或技术咨询，请联系杭州康氧医疗器械有限公司。
菌株来源与保藏信息
ATCC BAA-2146（Klebsiella pneumoniae）是一株产 KPC-2 型碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌临床参考菌株，BSL-2。该菌株于 2008 年从美国纽约的医院感染患者体内分离，其 blaKPC-2 基因位于 Tn4401 转座子上——这是 KPC 基因在全球传播的最主要遗传载体。BAA-2146 对几乎所有 β-内酰胺类抗生素（包括碳青霉烯类——亚胺培南、美罗培南、厄他培南）耐药，对头孢他啶-阿维巴坦敏感（KPC-2 对阿维巴坦敏感，区别于金属-β-内酰胺酶如 NDM 对阿维巴坦耐药）。作为 CLSI M100 推荐的 mCIM（改良碳青霉烯酶灭活试验）阳性质控菌株，BAA-2146 已替代传统的改良 Hodge 试验（MHT）成为碳青霉烯酶表型确证的参考标准。
杭州康氧以 ATCC 原装 0 代冻干粉形式提供，附 ATCC 检测报告（COA），含批号信息。
生物学特性
| 特征 | ATCC BAA-2146 表现 |
|---|---|
| 革兰染色 | 阴性杆菌 |
| 氧化酶 | 阴性 |
| MacConkey 生长 | 阳性——粉红色粘稠菌落（乳糖发酵产酸） |
| 碳青霉烯酶 | KPC-2 阳性（Ambler A 类丝氨酸碳青霉烯酶） |
| mCIM 试验 | 阳性——美罗培南抑菌圈 6–15mm（≤15mm 为阳性） |
| eCIM 试验 | 阴性——mCIM 阳性+eCIM 阴性 = KPC 等丝氨酸碳青霉烯酶 |
| 头孢他啶-阿维巴坦 | 敏感（MIC ≤8/4 μg/mL）——区别于 MBL（NDM/VIM/IMP） |
| 菌落形态 | TSA 上圆形凸起乳白色、粘液型（荚膜多糖过表达——拉丝试验阳性） |
| 荚膜血清型 | 未分型（临床分离参考株） |
| 获得性耐药基因谱 | blaKPC-2 + blaSHV + blaTEM + aac(6')-Ib + qnrB |
BAA-2146 的特征性超粘液表型（hypermucoviscous phenotype）与荚膜多糖过表达相关——在 TSA 上 24h 后用接种环触碰菌落可拉出 >5mm 的粘丝（"拉丝试验"阳性）。此表型由 RmpA/RmpA2 调节因子和 K1/K2 荚膜血清型的基因簇共同控制——在抗生素压力下（特别是在含亚胺培南的培养基上传代），此表型可能因外膜蛋白 OmpK35/OmpK36 的互补性缺失而减弱——菌落转为干燥小菌落——这并不代表菌株退化而是适应性的表型转换。
培养条件与保藏
| 参数 | 推荐条件 |
|---|---|
| 固体培养基 | TSA、MacConkey、MHA（药敏试验） |
| 液体培养基 | TSB、CAMHB（肉汤稀释法 MIC 测定） |
| 温度 | 35±2°C |
| 培养时间 | 18–24 h |
⚠ 质控关键：BAA-2146 携带的 blaKPC-2 位于 Tn4401 转座子上——该转座子在不同代次的培养中可能发生切除（excision），导致 blaKPC-2 丢失并恢复对碳青霉烯类的部分敏感性。每次 mCIM 质控前必须在含厄他培南（2 μg/mL）或美罗培南（1 μg/mL）的 MHA 上划线验证耐药表型——BAA-2146 应在含药平板上正常生长。若含药平板无菌落生长——该株已退化——应从 -70°C 冻存管重新复苏。
保藏条件
| 保藏方式 | 条件 | 存活期限 |
|---|---|---|
| TSA 斜面（4°C） | 封口膜密封，冷藏 | 1–2 个月 |
| TSB+15% 甘油（-70°C） | 冻存管，液氮速冻后转 -70°C | 2 年以上 |
| 冻干粉（4°C） | 原装密封西林瓶 | 见 ATCC 检测报告标注有效期 |
冻干粉复苏步骤
- 在 BSL-2 生物安全柜中开启 BAA-2146 冻干粉西林瓶。
- 用无菌注射器加入 0.3–0.5 mL TSB，轻轻旋转重悬。
- 将菌悬液全部转移至 TSA 平板，35±2°C 孵育 18–24 h。
- 复苏成功后挑取单菌落——在 MacConkey 琼脂上确认粉红色粘稠菌落形态。
- 取纯菌落进行 mCIM 试验——确认美罗培南抑菌圈 6–15mm（阳性）——并同时进行 eCIM 确认为阴性，方可投入日常质控使用。
- 用 TSB+15% 甘油重悬分装，-70°C 冻存。
质控应用——mCIM/eCIM 阳性质控
mCIM 试验步骤（CLSI M100）
- 取 BAA-2146 过夜纯培养，用 2 mL TSB 配制 1 μL 接种环量的菌悬液。
- 放入含 10 μg 美罗培南纸片的菌悬液中，35±2°C 孵育 4h ± 15min。
- 取出美罗培南纸片贴于已涂布大肠埃希菌 25922 的 MHA 平板上。
- 35±2°C 孵育 18–24h 后测量抑菌圈——≤15mm 为 mCIM 阳性。
mCIM 质控配对
| 菌株 | 碳青霉烯酶 | mCIM | eCIM | 判读 |
|---|---|---|---|---|
| BAA-2146（阳性对照） | KPC-2（丝氨酸型） | 阳性（≤15mm） | 阴性 | 丝氨酸碳青霉烯酶（KPC/OXA-48-like） |
| 25922（阴性对照） | 无 | 阴性（≥18mm） | N/A | 无碳青霉烯酶活性 |
| BAA-2340（MBL 阳性） | NDM-1（金属型） | 阳性 | 阳性 | 金属-β-内酰胺酶（NDM/VIM/IMP） |
常见问题
Q: mCIM 阳性+eCIM 阳性——这个结果对吗？
不对。BAA-2146 携带 KPC-2（A 类丝氨酸碳青霉烯酶），对 EDTA 不敏感——eCIM 应为阴性（美罗培南抑菌圈与 mCIM 相差 ≤5mm）。若 eCIM 出现阳性（差值 ≥5mm），可能原因：① 孵育时间超出 4h ±15min 的允许范围——美罗培南被过度水解导致假 eCIM 阳性；② 接种菌量过多——超过了 1μL 接种环的标准量；③ 该批菌株被产 NDM 或 VIM 的杂菌污染——应重新从冻干粉复苏。
Q: BAA-2146 和 700603 都是产酶肺克——区别在哪？
700603 产 SHV-18 型 ESBL（广谱 β-内酰胺酶），仅水解三代头孢菌素（头孢他啶、头孢噻肟），对碳青霉烯类（亚胺培南、美罗培南）敏感。BAA-2146 产 KPC-2 型碳青霉烯酶——不仅水解三代头孢，还能水解碳青霉烯类——对亚胺培南和美罗培南均耐药。两者的 MIC 表型完全不同——700603 是 ESBL 确证试验（头孢他啶±克拉维酸）的阳性质控，BAA-2146 是 mCIM/eCIM 的阳性质控——不可互换。
Q: 可以用 BAA-2146 做碳青霉烯类的药敏 QC 吗？
CLSI M100 未将 BAA-2146 列入常规药敏质控菌株的 QC 范围表——因为 KPC-2 的表达水平在不同实验室间变异较大（受培养基批号、二价阳离子浓度和孵育时间影响）。BAA-2146 的应用限于碳青霉烯酶表型确证试验（mCIM/eCIM）的阳性质控——不可用于常规 MIC 或纸片扩散法的 QC。
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技术免责声明：本文技术参数来源于公开发表的 ATCC 官方产品信息、CLSI M100 文件及现行标准，仅供实验室专业人员参考。肺炎克雷伯菌为 BSL-2 级条件致病菌。杭州康氧医疗器械有限公司对因使用本文信息产生的任何后果不承担责任。如需技术咨询或产品订购，请联系杭州康氧医疗器械有限公司。
参考资料
- ATCC 官网：Klebsiella pneumoniae BAA-2146 产品页与检测报告（COA）
- CLSI M100：Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing，mCIM/eCIM 方法
- CLSI M07：Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests
- Yigit H et al. (2001): Novel carbapenem-hydrolyzing β-lactamase KPC-1 from a carbapenem-resistant strain of Klebsiella pneumoniae
- EUCAST：EUCAST guidelines for detection of resistance mechanisms，碳青霉烯酶确证方法
- CDC/APHL：碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌（CRE）检测与监测指南
- ATCC 25923 金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus 标准菌株
- ATCC 25922 大肠埃希菌 Escherichia coli 标准菌株
- ATCC 16404 巴西曲霉（黑曲霉）Aspergillus brasiliensis 标准菌株
- ATCC 10231 白色念珠菌 Candida albicans 标准菌株
- ATCC 27853 铜绿假单胞菌 Pseudomonas aeruginosa 标准菌株
- ATCC 4617 支气管鲍特杆菌 Bordetella bronchiseptica 标准菌株
- ATCC 6538 金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus 标准菌株
- ATCC 15531 肺炎支原体 Mycoplasma pneumoniae 标准菌株
- ATCC 19115 单核细胞增生李斯特菌 Listeria monocytogenes 标准菌株
- ATCC 29213 金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus 标准菌株
-
ATCC 25923 金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus 标准菌株
-
ATCC 25922 大肠埃希菌 Escherichia coli 标准菌株
-
ATCC 16404 巴西曲霉（黑曲霉）Aspergillus brasiliensis 标准菌株
-
ATCC 10231 白色念珠菌 Candida albicans 标准菌株
-
ATCC 27853 铜绿假单胞菌 Pseudomonas aeruginosa 标准菌株
-
ATCC 4617 支气管鲍特杆菌 Bordetella bronchiseptica 标准菌株
-
ATCC 6538 金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus 标准菌株
-
ATCC 15531 肺炎支原体 Mycoplasma pneumoniae 标准菌株
关于我们
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