菌株来源与保藏信息
大肠埃希菌 ATCC 11775(Escherichia coli (Migula) Castellani and Chalmers)是 ATCC 保藏的一株经典非致病性大肠埃希菌标准菌株,BSL-1。该菌株是大肠埃希菌的物种模式株——在伯杰氏系统细菌学手册和 NCBI 分类数据库中作为 E. coli 种的参考菌株(Reference Strain)。ATCC 11775 属于血清型 O1:K1(L1):H7——与致病性大肠埃希菌(如 O157:H7)不同,其不产志贺毒素(stx⁻)、不携带 LEE 毒力岛(eaeA⁻),在 BSL-1 实验室中可安全操作。ATCC 11775 在药典微生物限度检查中用于大肠菌群阳性对照,在消毒剂评价(EN 1040/EN 1276)和培养基促生长验证(MacConkey/VRBG/EMB)中作为标准肠杆菌科参考株。
杭州康氧以 ATCC 原装 0 代冻干粉形式提供,附 ATCC 检测报告(COA),含批号信息。
生物学特性
| 特征 | ATCC 11775 表现 |
| 革兰染色 | 阴性杆菌——直杆状、两端钝圆 |
| 氧化酶 | 阴性 |
| 乳糖发酵 | 阳性——MacConkey 上粉红色菌落、EMB 上金属光泽菌落 |
| IMViC | ++--(靛基质+、甲基红+、V-P-、柠檬酸盐-)——大肠埃希菌经典生化模式 |
| 尿素酶 | 阴性 |
| H₂S(TSI) | 阴性 |
| 赖氨酸脱羧酶 | 阳性 |
| 运动性 | 周鞭毛运动阳性 |
| 血清型 | O1:K1(L1):H7——非致病性血清型 |
| β-葡萄糖醛酸酶 | 阳性(MUG 试验阳性——荧光)——区别于沙门菌/志贺菌 |
| 菌落形态 | TSA 上乳白色光滑圆形菌落——37°C 24 h 菌落直径 2-3 mm |
ATCC 11775 作为大肠埃希菌的物种模式株——在微生物学分类中具有特殊地位——所有大肠埃希菌菌株的生化鉴定数据库均以 11775 的表型为参考基准校准。其在 EMB 琼脂上产生的特征性绿色金属光泽(乳糖强烈发酵产酸使染料沉淀于菌落表面)是大肠埃希菌区别于其他肠杆菌科的最直观的形态学鉴别特征。吲哚阳性(Kovacs 试剂——试纸顶端变红)进一步确证为吲哚阳性大肠埃希菌——区别于吲哚阴性的肺炎克雷伯菌和产气肠杆菌。
培养条件与保藏
常规培养
| 参数 | 推荐条件 |
| 固体培养基 | TSA、营养琼脂;MacConkey(粉红色菌落)、EMB(绿色金属光泽)、VRBG(红色菌落带胆盐沉淀环) |
| 液体培养基 | TSB、乳糖胆盐发酵培养基(大肠菌群检测) |
| 温度 | 35-37°C(可在 15-46°C 宽温域生长) |
| 培养时间 | 18-24 h |
保藏条件
| 保藏方式 | 条件 | 期限 |
| TSA 斜面(4°C) | 封口膜密封 | 1-2 月 |
| TSB + 15% 甘油(-70°C) | 冻存管液氮速冻 | 2 年以上 |
| 冻干粉(4°C) | 原装密封 | 见 ATCC 检测报告 |
冻干粉复苏步骤
- 在生物安全柜中开启冻干粉西林瓶。
- 用无菌注射器加入 0.3-0.5 mL TSB,轻轻旋转重悬。
- 划线至 TSA + MacConkey 双平板,35-37°C 孵育 18-24 h。
- 复苏后验证:MacConkey 上粉红色菌落 + EMB 上金属光泽 + 氧化酶阴性 + 吲哚阳性——四项组合确认为大肠埃希菌。
质控应用
大肠菌群检验阳性对照
ATCC 11775 是乳糖胆盐发酵培养基(LST)、VRBG 琼脂和 EMB 琼脂的促生长验证阳性对照。在 GB 4789.3 大肠菌群 MPN 法中,11775 接种于 LST 后在 36±1°C 培养 24-48 h 应产酸(培养基变黄)产气(倒管内气泡 ≥ 1/3 管)。每批次 LST 配制后应以 11775 + 9027(乳糖不发酵阴性对照)双菌验证——11775 应产酸产气、9027 应不产酸不产气。
消毒剂评价肠杆菌科参考株
在 EN 1040 和 EN 1276 消毒剂悬浮试验中,ATCC 11775 可与 ATCC 10536(肺炎克雷伯菌)互补作为肠杆菌科双代表菌株——11775 的吲哚阳性和 MUG 阳性表型使其在混合菌挑战试验中可通过生化方法与其他肠杆菌区分计数。在 AOAC 消毒剂效力试验中,11775 作为标准革兰阴性菌之一用于含氯消毒剂、季铵盐类消毒剂的杀菌效力验证。
常见问题
Q: 11775 和 25922 有什么区别——该选哪个?
11775 是物种模式株——生化表型最标准、基因组完整测序可参考、不涉及任何耐药机制——适合培养基质控、分类学参考、教学和消毒剂基线评价。25922 是药敏质控株——CLSI 指定纸片扩散法肠杆菌科QC 株——适合药敏试验和耐药监测。若做乳糖发酵/吲哚/IMViC/MUG 的生化教学——11775 是最标准的选择;若做药敏试验——25922 是唯一正确的选择。
Q: EMB 上 11775 的金属光泽不明显怎么办?
EMB 上金属光泽的产生需要乳糖强烈发酵 + 菌落接触琼脂表面后染料在菌落底部沉淀。若使用划线法(非倾注法)接种——菌落底部与琼脂接触面积不足——金属光泽可能减弱。建议:(1)配制 EMB 时乳糖浓度保证 1%;(2)划线后 37°C 培养 24 h——不要提前观察(20 h 以内光泽未完全形成);(3)若仍无光泽——改用 Levine EMB(伊红和美蓝浓度比原配方高 50%)替代 Holt-Harris EMB。
Q: 11775 的 K1 荚膜会影响消毒剂评价结果吗?
K1 荚膜是大肠埃希菌最常见的荚膜型之一——由 N-乙酰神经氨酸(唾液酸)组成的均聚多糖——具有免疫逃避和抗干燥功能。在消毒剂悬浮试验(EN 1040)中,K1 荚膜对季铵盐类和双胍类消毒剂的杀灭速率有轻微延迟效应——11775 的 log reduction 在接触 1 min 时可能比无荚膜株(如 25922)低 0.3-0.5 log、5 min 后差异消失。若消毒剂评价要求在短接触时间(30 s-1 min)内达到 > 5 log reduction——应同时测试 11775(有荚膜)和 25922(薄荚膜)双株以确保对荚膜和非荚膜菌的有效性。
订购信息
| 产品名称 | 大肠埃希菌标准菌株(物种模式株) |
| 拉丁名 | Escherichia coli(O1:K1:H7) |
| 保藏中心编号 | ATCC 11775 |
| 参考信息 | 物种模式株 / 吲哚+MUG+ / 大肠菌群阳性对照 / EN 1040 肠杆菌代表株 |
| 产品形式 | 冻干粉(0 代原装),附 ATCC 检测报告 |
| 存储条件 | 2-8°C 避光保存 |
如需批量订购或技术咨询,请联系杭州康氧医疗器械有限公司。
参考资料
- ATCC 官网:Escherichia coli 11775 产品页与检测报告(COA)
- GB 4789.3-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》
- EN 1040: Chemical disinfectants — Basic bactericidal activity
- Brenner DJ (1984): Family I. Enterobacteriaceae — Bergey's Manual of Systematic Bacteriology
- Blattner FR et al. (1997): The complete genome sequence of Escherichia coli K-12 — Science
- Ørskov F & Ørskov I (1992): Escherichia coli serotyping and disease — Canadian Journal of Microbiology
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