菌株来源与保藏信息
解脲脲原体 ATCC 27817(Ureaplasma urealyticum Shepard et al.)菌株代号 354,由 M.C. Shepard 等人分离自一例非淋菌性尿道炎(NGU)患者,为血清型 V(Serotype V) 参考株。解脲脲原体是泌尿生殖道最常见的支原体之一,与尿道炎、前列腺炎及不良妊娠结局相关,27817 是血清分型、核酸检测与药敏研究的重要参考菌株。
杭州康氧以 ATCC 原装形式提供本菌株(冷冻保藏型),附 ATCC 官方证书(COA)。生殖道支原体检测(培养法/PCR 法)质控首选此株。
生物学特性
解脲脲原体为脲原体属成员,无细胞壁,菌体极小(约 0.2–0.3 μm),革兰染色不易着色。独特之处在于其依赖尿素分解产氨供能(尿素酶阳性),液体培养基中生长表现为含尿素培养基的 pH 升高(酚红由黄变红/粉红)。固体培养基上形成极小的"煎蛋样"菌落(直径 15–60 μm,需放大镜观察)。
| 特征 | ATCC 27817 表现 |
| 细胞壁 | 无 |
| 血清型 | V(5 型) |
| 尿素酶 | 阳性(核心鉴别特征) |
| 葡萄糖发酵 | 阴性 |
| 生长温度 | 35–37°C |
| 生长速度 | 液体 16–48 h 变色;固体 7–10 天 |
解脲脲原体生长需甾醇(10–20% 马血清),对温度与 pH 变化敏感,碱性过强(pH>8)会快速死亡——培养中需及时转接。共 14 个血清型(1–14),27817 代表 V 型。
培养条件与保藏方法
复苏步骤
- 冻存管自 -80°C 取出后立即 37°C 水浴快速融化(勿反复冻融)。
- 生物安全柜内,将全部内容物转接至 4.5 mL 解脲脲原体肉汤(ATCC Medium 1092 或 Urea broth 10B,含 5–10% 马血清)。
- 连续稀释:0.5 mL → 4.5 mL 逐管稀释,保留空白对照管(生长以颜色变化指示,无可见浑浊)。
- 37°C 培养,液体 16–48 h 变绿/变红即示生长;固体平板需 7–10 天(CO₂ 或厌氧袋)。
常规培养
| 参数 | 推荐条件 |
| 液体培养基 | ATCC Medium 1092(Ureaplasma B-broth)/ Urea broth 10B(加马血清) |
| 固体培养基 | A8 鉴别琼脂(ATCC Medium 1332) |
| 温度 | 37°C |
| 培养时间 | 液体 16–48 h;固体 7–10 天 |
| 气体环境 | 液体需氧;固体需 10%+ CO₂ 或厌氧袋 |
保藏建议
| 保藏方式 | 条件 | 有效期 |
| 短期 | 肉汤培养物 4°C 冷藏 | ≤ 4 天 |
| 中长期冻存 | 冻存管(含血清),-80°C 或 -60°C 以下 | ≥ 2 年 |
| 长期保藏 | 冷冻干燥法(限经专门验证的株) | 视验证结果 |
⚠ 注意:本品为冷冻保藏型(-80°C 或更低),收到后须立即转入 -80°C,不可置于 2–8°C!解脲脲原体对碱极度敏感,肉汤变色(偏碱)后数小时内死亡,必须立即转接或冻存。本菌株 BSL-2,需在生物安全柜中操作。
质控与标准化应用
生殖道支原体检测质控
ATCC 27817 用于泌尿生殖道解脲脲原体检测的阳性对照:培养法(Urea broth/A8 琼脂)培养基性能验证、PCR/qPCR 核酸检测阳性对照,以及药敏试验(四环素、大环内酯类、喹诺酮类)质控株。
血清分型参考
解脲脲原体分 14 个血清型,27817 为 V 型标准参考株,用于生长抑制试验、免疫荧光及分子分型方法(MLST/血清型特异 PCR)的建立与验证。
临床与科研研究
用于非淋菌性尿道炎、男性不育、不良妊娠结局等临床相关性研究,及脲原体致病机制、抗生素耐药监测等基础研究。
常见问题与注意事项
Q: 为什么看不到浑浊,怎么判断生长?
解脲脲原体极小、生长不产生明显浑浊,液体培养以酚红指示剂变色(尿素分解产氨致 pH 升高)为唯一生长指标。肉汤变绿/变红即示生长,应立即转接,变深绿/蓝绿说明已过度偏碱,菌体可能已死亡。
Q: 27817 与其他血清型如何选用?
常规检测质控选用 27817(V 型)即可覆盖培养与 PCR 验证;若开展血清分型研究,需按目标血清型配置相应参考株(如 8 型为 ATCC 27618 等),可咨询我们配置全套血清型参考株组。
Q: 能用于临床诊断吗?
不能。本产品仅限科研、质检与教学用途,不可用于临床诊断、治疗或人体/动物接种。
Q: 27817的菌落为什么肉眼看不见?
解脲脲原体菌落直径10-30µm——远小于其他支原体(50-200µm)和细菌(1000-5000µm)。需要40×物镜观察A8琼脂上的"荷包蛋"形态。若用4×或10×物镜——建议先在菌落密集区用记号笔在平板背面标记位置——再转到高倍镜观察。
订购信息
| 产品名称 | 解脲脲原体标准菌株 ATCC 27817 |
| 拉丁名 | Ureaplasma urealyticum Shepard et al. |
| 保藏中心编号 | ATCC 27817 |
| 菌株代号/血清型 | 354 / 血清型 V |
| 产品形式 | 冷冻保藏型(-80°C 或更低),附 ATCC 官方证书 |
| 存储条件 | -80°C 或更低(不可冷藏) |
| 生物安全等级 | BSL-2 |
| 供应商 | 杭州康氧医疗器械有限公司 |
技术免责声明:本文技术参数来源于公开发表的ATCC官方产品信息及相关标准文件,仅供实验室专业人员参考。杭州康氧医疗器械有限公司对因使用本文信息产生的任何后果不承担责任。如需技术咨询或产品订购,请联系杭州康氧医疗器械有限公司。
参考资料
- ATCC 官网:Ureaplasma urealyticum Shepard et al. 27817 — 产品页与 Product Sheet
- Shepard MC, et al. Ureaplasma urealyticum gen. nov., sp. nov.: Proposed nomenclature for the human T(T-strain) Mycoplasmas. Int J Syst Bacteriol 24:160-171, 1974
- Black FT. Modifications of the growth inhibition test. Appl Microbiol 25:528-533, 1973
- Taylor-Robinson D (1996): Ureaplasma urealyticum — Clinical Microbiology Reviews
- Waites KB et al. (2005): Mycoplasmas and ureaplasmas as neonatal pathogens — Clinical Microbiology Reviews