菌株来源与保藏信息
ATCC 11778(Salmonella enterica serovar Typhimurium)是鼠伤寒沙门菌血清型的经典参考菌株,BSL-2。鼠伤寒沙门菌是全球食源性沙门菌感染中最常见的血清型之一——在 WHO 全球沙门菌监测网(GSS)的数据中占人类沙门菌分离株的 15-20%。ATCC 11778 作为鼠伤寒血清型的野生型参考株,不携带获得性耐药基因——其完整的毒力基因谱(包括 SPI-1、SPI-2 致病岛和 pSLT 毒力质粒)使其成为沙门菌侵袭机制和消毒剂评价的标准参考菌株。
杭州康氧以 ATCC 原装 0 代冻干粉形式提供,附 ATCC 检测报告(COA),含批号信息。
生物学特性
| 特征 | ATCC 11778 表现 |
| 革兰染色 | 阴性杆菌 |
| 氧化酶 | 阴性 |
| 运动性 | 阳性(周鞭毛) |
| H₂S 产生 | 强阳性——XLD 上黑色中心菌落——区别于志贺菌属 |
| 赖氨酸脱羧酶 | 阳性(区别于志贺菌属—阴性) |
| 乳糖发酵 | 阴性 |
| 血清型 | O 抗原 1,4,[5],12——H 抗原 i:1,2——B 群 |
| 菌落形态 | XLD 上红色菌落+黑色中心——SS 琼脂上无色半透明+黑色中心 |
| 侵袭性 | 阳性——含完整 SPI-1(T3SS-1)介导上皮细胞侵袭 |
| 毒力质粒 | pSLT 约 94kb——spvRABCD 操纵子阳性 |
ATCC 11778 与 14028(肠炎沙门菌血清型 Enteritidis)同属沙门菌属——但两者的 H 抗原和流行病学关联不同。11778(鼠伤寒)以广泛的宿主谱(人畜共患——可从牛、猪、家禽和爬行动物中分离)区别于 14028(肠炎——主要与禽蛋和禽肉传播相关)。在食品检验中——两者的分离率并列第一(各占约 15-20%)。
培养条件与保藏
| 参数 | 推荐条件 |
|---|
| 固体培养基 | TSA、XLD、HE 琼脂、SS 琼脂 |
| 液体培养基 | TSB、SC 肉汤(亚硒酸盐胱氨酸增菌) |
| 温度 | 35±2°C |
| 培养时间 | 18-24 h |
⚠ H₂S 检测关键:11778 的 H₂S 产生依赖于培养基中硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵的新鲜度——XLD 平板配制后 4°C 冷藏超过 72h 后 H₂S 显色显著减弱。使用新鲜配制(24h 内)的 XLD 并同时接种 TSI 穿刺——若 TSI 呈碱性/酸性+产气+H₂S 强阳性则确认沙门菌特征。
保藏条件
| 保藏方式 | 条件 | 期限 |
|---|
| TSA 斜面(4°C) | 封口膜密封 | 1-2 个月 |
| TSB+15% 甘油(-70°C) | 冻存管液氮速冻 | 2 年以上 |
| 冻干粉(4°C) | 原装密封 | 见 ATCC 检测报告 |
冻干粉复苏步骤
- 在 BSL-2 生物安全柜中开启冻干粉西林瓶。
- 用无菌注射器加入 0.3-0.5 mL TSB,轻轻旋转重悬。
- 转移至 TSA 平板,35±2°C 孵育 18-24 h。
- 复苏后挑取单菌落接种 XLD 和 TSI——确认 H₂S 阳性特征。
- TSB+15% 甘油 -70°C 冻存。
食品检验——沙门菌阳性对照
GB 4789.4 / ISO 6579 阳性对照
ATCC 11778 被 GB 4789.4(沙门氏菌检验)和 ISO 6579 指定为食品沙门菌检验的阳性对照菌株。完整的检验流程——SC 肉汤增菌→XLD/HE/BS 选择性琼脂分离→TSI+LIA 生化筛查→血清学分型——中每一步的阳性反应均需 11778 作为质控验证。
与肠炎沙门菌(14028)的协同
11778(鼠伤寒 B 群)和 14028(肠炎 D 群)覆盖了全球食品沙门菌分离株中约 30-40% 的血清型多样性。两者 O 抗原不同(B 群 vs D 群)——在血清学分型中应使用对应的单价抗血清分别验证凝集反应。含鼠伤寒和肠炎两种血清型的阳性对照组合是食品检验实验室的常规配置。
质控应用
食品检验阳性对照 GB 4789.4/ISO 6579
ATCC 11778 是 GB 4789.4 和 ISO 6579 指定的沙门菌检验阳性对照。检验流程为 BPW 非选择性预增菌(36C 8-18h)→ RV 肉汤/SC 肉汤选择性增菌(42C/36C 18-24h)→ XLD/HE/BS 分离。阳性对照的检出灵敏度应达到 1-10 CFU/25g——在 BPW 预增菌步骤中 11778 的复苏效率是方法验证的核心参数。若阳性对照未生长——首先排查 RV 肉汤中孔雀绿是否因光照降解(RV 肉汤应避光保存、配制后 1 月内使用)。
血清学分型阳性对照
ATCC 11778 的抗原式为 O:1,4,[5],12:H:i:1,2——属于 B 群鼠伤寒沙门菌。在沙门菌血清学分型中,11778 可作为 B 群 O 抗原凝集的阳性对照——O4 和 O12 的凝集反应应在 1 min 内出现明显凝集颗粒。H:i 的第 i 相鞭毛抗原凝集和 H:1,2 的第 1,2 相鞭毛抗原凝集可用于验证鞭毛抗原诱导和位相变异试验的可靠性。
常见问题 ============ -->
常见问题
Q: 11778 和 14028 可以只用一个做阳性对照吗?
在严格的 ISO 17025 认可体系下——不建议。两者的 O 抗原(B 群 vs D 群)不同——单用一种无法验证 O 抗血清的批间差异。至少应在抗血清新批次验证时同时使用两种血清型确认凝集反应——日常检验至少保留一种作为常规质控。
Q: SC 肉汤增菌后 11778 回收率低?
SC 肉汤中的亚硒酸盐对沙门菌有一定抑制作用——增菌时间严格控制在 18-24h——超时增菌(>48h)将因 pH 下降和硒累积毒性导致亚致死损伤。若样品基质中含高浓度竞争菌群(如生肉),考虑用 RV 肉汤(Rappaport-Vassiliadis)作为替代增菌液——RV 对沙门菌的选择性更强且毒性低于 SC。
订购信息
| 产品名称 | 鼠伤寒沙门菌标准菌株 |
| 拉丁名 | Salmonella Typhimurium |
| 保藏中心编号 | ATCC 11778 |
| 参考信息 | B群/O:1,4,[5],12 |
| 产品形式 | 冻干粉(0代原装),附ATCC检测报告 |
| 存储条件 | 2-8度C避光保存 |
如需批量订购或技术咨询,请联系杭州康氧医疗器械有限公司。
技术免责声明:本文技术参数来源于公开发表的 ATCC 官方产品信息及食品微生物检验标准,仅供实验室专业人员参考。鼠伤寒沙门菌为 BSL-2 级病原微生物。杭州康氧医疗器械有限公司对因使用本文信息产生的任何后果不承担责任。如需技术咨询或产品订购,请联系杭州康氧医疗器械有限公司。
参考资料
- ATCC 官网:Salmonella enterica serovar Typhimurium 11778 产品页与检测报告(COA)
- GB 4789.4-2016《食品安全国家标准 沙门氏菌检验》
- ISO 6579-1:2017 Horizontal method for the detection of Salmonella spp.
- EN 1040/EN 1276 消毒剂定量悬浮试验标准
- FDA BAM Chapter 5: Salmonella
- WHO Global Salm-Surv (GSS): 全球沙门菌血清型监测数据