菌株来源与保藏信息
ATCC 9763(Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hansen)是一株经典的单细胞真核模式微生物,BSL-1。酿酒酵母是食品工业中应用最广泛的酵母菌——涵盖面包发酵(S. cerevisiae 又称面包酵母)、啤酒酿造(艾尔酵母)和酒精生产。ATCC 9763 在制药行业中的核心意义是其作为真核微生物代表菌株——其细胞壁结构(以 β-葡聚糖和甘露糖蛋白为主而非肽聚糖)和完整的有丝分裂/减数分裂机制使其成为抗真菌药评价和防腐挑战试验中"真核挑战"的标准参考菌株。
杭州康氧以 ATCC 原装 0 代冻干粉形式提供,附 ATCC 检测报告(COA),含批号信息。
生物学特性
| 特征 | ATCC 9763 表现 |
| 分类 | 子囊菌门、酵母纲、酵母目——真核微生物 |
| 细胞形态 | 卵圆形至球形——5–10μm × 6–12μm |
| 出芽生殖 | 多边出芽(区别于裂殖酵母的二分裂) |
| 菌落形态 | SDA 上乳白色、凸起、奶油状光滑——48h 直径 2–4mm |
| 子囊孢子 | 含 1–4 个球形子囊孢子(减数分裂产物) |
| 假菌丝 | 可形成——在厌氧条件下或玉米粉琼脂上更明显 |
| 发酵 | 葡萄糖、麦芽糖、蔗糖阳性——乳糖阴性 |
| 最适温度 | 25–30°C——35°C 以上生长减缓 |
| 细胞壁 | β-1,3-葡聚糖 + 甘露糖蛋白——不含肽聚糖(真核特征) |
ATCC 9763 的细胞壁结构是其在制药和化妆品行业中最重要的生物学特征——β-葡聚糖和甘露糖蛋白层包围的细胞壁与细菌的肽聚糖细胞壁(如金黄色葡萄球菌 6538)或真菌的几丁质-葡聚糖细胞壁(如黑曲霉 16404)有本质区别——这一差异决定了抗真菌药(如两性霉素 B、氟康唑)在 9763 和 16404 上的 MIC 值完全不同。
培养条件与保藏
| 参数 | 推荐条件 |
|---|
| 固体培养基 | SDA(沙氏葡萄糖琼脂)、YM 琼脂、PDA(马铃薯葡萄糖琼脂) |
| 液体培养基 | SDB、YM 肉汤 |
| 温度 | 25±2°C(最适)——35°C 可生长但速度减半 |
| 培养时间 | 48–72h——酵母菌生长速度慢于细菌(倍增时间约 90–120min vs 细菌 20–40min) |
⚠ 与细菌混合培养注意:在防腐挑战试验中,9763 和细菌(如 6538/8739/9027)同时接种时——酵母的生长速度远慢于细菌——在混合接种的 TSA 平板上细菌菌落可能快速覆盖并压制酵母菌落的形成。推荐使用含氯霉素(50mg/L)的 SDA 作为酵母专属计数培养基——氯霉素抑制细菌生长而对酵母无影响,从而获得准确的酵母回收率计数。
保藏条件
| 保藏方式 | 条件 | 存活期限 |
|---|
| SDA 斜面(4°C) | 封口膜密封冷藏 | 3–6 个月(酵母较持久) |
| SDB+15% 甘油(-70°C) | 冻存管液氮速冻 | 2 年以上 |
| 冻干粉(4°C) | 原装密封西林瓶 | 见 ATCC 检测报告 |
冻干粉复苏步骤
- 在超净台中开启冻干粉西林瓶。
- 用无菌注射器加入 0.5 mL SDB,轻轻旋转重悬。
- 转移至 SDA 平板,25±2°C 孵育 48–72h。
- 复苏后挑取单菌落在 SDA 上传代一次——确认乳白色奶油状典型菌落形态。
- SDB+15% 甘油 -70°C 冻存。
防腐挑战——真核微生物代表
抗真菌药评价
ATCC 9763 是 CLSI M27(酵母菌肉汤稀释法抗真菌药敏试验)的推荐参考菌株。其对两性霉素 B 的 MIC 在 0.5–2 μg/mL 范围,对氟康唑的 MIC 在 1–4 μg/mL 范围——提供了针对多烯类(两性霉素 B)和三唑类(氟康唑)抗真菌药不同 MIC 范围的质控对照。9763 不含 ERG11 或 ERG3 突变——因此三唑类 MIC 处于敏感范围——与耐药酵母(如含 ERG11 过表达的临床分离株)形成对照。
与白念珠菌(10231)和黑曲霉(16404)的互补
三者构成防腐挑战中"真核微生物"的完整谱系:10231 代表酵母型真菌(出芽生殖,无假菌丝),9763 代表子囊菌酵母(子囊孢子+发酵代谢),16404 代表丝状真菌(菌丝+分生孢子+有氧代谢)。含抗真菌成分的防腐体系应分别验证对三株菌的效力——只做 10231 无法证明对 9763(发酵代谢路径不同)和 16404(菌丝生长模式不同)的有效性。
常见问题
Q: 9763 在 SDA 上 48h 了才长出小菌落——正常吗?
正常。酵母菌在冻干复苏后的第一代常表现出延迟期延长(lag time 24–48h)——远长于细菌的 2–4h。孵育温度也是关键——若在 35°C(细菌标准温度)孵育,9763 的生长速率仅为其最适温度(25°C)的 50–60%。建议使用 25°C 孵育并延长时间至 72h——在 72h 时菌落应达 2–4mm。
Q: 9763 可以替代 10231 做防腐挑战吗?
不可以直接替代——USP 51 和 ChP 1121 明确指定 10231(白色念珠菌)为防腐功效试验的酵母菌代表。但若产品的防腐体系标称含"广谱抗真菌"成分,可补充 9763 作为额外挑战菌株——提供对不同酵母物种和代谢类型的覆盖。在最终报告中注明"额外挑战菌株"并分别报告 10231 和 9763 的计数结果——不可将两者的数据合并。
订购信息
| 产品名称 | 酿酒酵母标准菌株 |
| 拉丁名 | Saccharomyces cerevisiae |
| 保藏中心编号 | ATCC 9763 |
| 参考信息 | 真核模式微生物 |
| 产品形式 | 冻干粉(0代原装),附ATCC检测报告 |
| 存储条件 | 2-8度C避光保存 |
如需批量订购或技术咨询,请联系杭州康氧医疗器械有限公司。
技术免责声明:本文技术参数来源于公开发表的 ATCC 官方产品信息及现行药典标准,仅供实验室专业人员参考。杭州康氧医疗器械有限公司对因使用本文信息产生的任何后果不承担责任。如需技术咨询或产品订购,请联系杭州康氧医疗器械有限公司。
参考资料
- ATCC 官网:Saccharomyces cerevisiae 9763 产品页与检测报告(COA)
- CLSI M27:Reference Method for Broth Dilution Antifungal Susceptibility Testing of Yeasts
- USP <51> Antimicrobial Effectiveness Testing
- 中国药典(ChP)2020 年版:通则 1121 抑菌效力检查法
- EUCAST E.Def 7.3:酵母菌抗真菌药药敏试验方法
- Fleet GH (1991): Cell walls of Saccharomyces cerevisiae—structure and assembly