菌株来源与保藏信息
蜡样芽孢杆菌 ATCC 14579(Bacillus cereus Frankland and Frankland)是 ATCC 保藏的一株蜡样芽孢杆菌模式株(Type Strain),BSL-2。该菌株的基因组于 2003 年完成全基因组测序——已作为蜡样芽孢杆菌的比较基因组学参考。ATCC 14579 携带ces 基因簇——可产生呕吐毒素 cereulide(耐热性环肽——121°C 90 min 不灭活——是蜡样芽孢杆菌食物中毒中最危险的热稳定毒素之一)。与 ATCC 10537 相比——14579 的 cereulide 产毒表型使其在食品安全风险评估中具有不可替代的参考价值——是验证食品中 cereulide 检测方法(LC-MS/MS)的阳性参考菌株。
杭州康氧以 ATCC 原装 0 代冻干粉形式提供,附 ATCC 检测报告(COA),含批号信息。
生物学特性
| 特征 | ATCC 14579 表现 |
| 革兰染色 | 阳性大杆菌——芽孢椭圆中生 |
| 卵磷脂酶 | 阳性 |
| cereulide 毒素 | ces⁺——产呕吐毒素——LC-MS/MS 检测阳性 |
| 肠毒素 Hbl/Nhe | 阳性——双肠毒素阳性——腹泻型+呕吐型完整毒素谱 |
| 触酶 | 阳性 |
| V-P | 阳性 |
| 基因组 | 5.4 Mb——含 ces 毒力岛和多个肠毒素操纵子 |
培养条件与保藏
| 参数 | 推荐条件 |
|---|
| 固体培养基 | TSA、卵黄琼脂(卵磷脂酶验证) |
| 液体培养基 | TSB——cereulide 合成需在营养丰富培养基中进行——M9最低盐不产毒 |
| 温度 | 30-37°C |
保藏条件
| 保藏方式 | 条件 | 期限 |
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| TSA斜面(4°C) | 封口膜密封 | 1-2月 |
| TSB+15%甘油(-70°C) | 冻存管液氮速冻 | 2年以上 |
| 冻干粉(4°C) | 原装密封 | 见ATCC检测报告 |
- 在生物安全柜中开启冻干粉西林瓶。
- 加入0.3-0.5mL TSB——旋转重悬。
- 划线至TSA+卵黄琼脂双平板——30-37°C孵育18-24h。
- 复苏后验证:卵磷脂酶阳性+溶血阳性——确认为蜡样芽孢杆菌。
⚠ BSL-2安全提示:14579产呕吐毒素cereulide——虽不在常规操作中产生气溶胶风险——但芽孢悬液制备时避免气溶胶扩散——受污染的耗材121°C灭菌后丢弃(cereulide耐热——121°C 90min不灭活——但可被0.1%次氯酸钠氧化分解)。
质控应用
食品安全——cereulide检测阳性对照
ATCC 14579 是 LC-MS/MS 检测食品中 cereulide 的阳性参考菌株。在米饭、意大利面等高淀粉食物中——14579 在 30°C 培养 24-48h 后可产生 0.5-5 µg/g 的 cereulide——远超过人中毒剂量(约 8-10 µg/kg 体重)。该菌株用于验证食品加工过程中快速冷却(米饭从 55°C 降至 20°C 应在 2h 内完成——否则残留芽孢萌发并产毒)对 cereulide 累积的抑制效果。
常见问题
Q: 14579和10537的核心区别?
14579 = ces⁺ 产呕吐毒素——cereulide阳性——用于食品安全cereulide检测验证。10537 = ces⁻ 仅产肠毒素——用于消毒剂杀芽孢效力评价。cereulide的耐热性(121°C 90min不灭活)使其成为食品安全区别于其他芽孢杆菌的关键毒力因子——高温消毒后死亡的蜡样芽孢杆菌芽孢中cereulide仍具毒性。
Q: 14579产毒量不稳定的原因?
cereulide的合成受ces非核糖体肽合成酶表达调控——其表达在营养丰富(高氨基酸——尤其缬氨酸和亮氨酸)和中等温度(20-30°C)条件下最高——在37°C和营养贫乏(TSB稀释10倍)条件下显著下降。若需高产量cereulide——使用TSB+1%葡萄糖——20-25°C静置培养48h——cereulide产量可达37°C摇菌的3-5倍。
订购信息
| 产品名称 | 蜡样芽孢杆菌标准菌株(模式株/产毒株) |
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| 拉丁名 | Bacillus cereus(Type Strain) |
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| 保藏中心编号 | ATCC 14579 |
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| 参考信息 | 模式株/ces⁺ cereulide⁺/全基因组 |
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| 产品形式 | 冻干粉(0代原装),附ATCC检测报告 |
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| 存储条件 | 2-8°C避光保存 |
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参考资料
- ATCC官网:B. cereus 14579产品页与检测报告(COA)
- Ehling-Schulz M et al. (2005): Emetic toxin formation of B. cereus — Applied and Environmental Microbiology
- Rasko DA et al. (2004): The genome sequence of B. cereus ATCC 14579 — Nucleic Acids Research
- Stenfors Arnesen LP et al. (2008): From soil to gut: B. cereus — FEMS Microbiology Reviews
- EFSA (2016): Risks for public health related to B. cereus — EFSA Journal
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