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ATCC 27370 流感嗜血杆菌 Haemophilus influenzae 标准菌株 - 杭州康氧标准菌株

ATCC 27370 流感嗜血杆菌 Haemophilus influenzae 标准菌株

简要描述:ATCC 27370 无荚膜型流感嗜血杆菌NTHi参考株。杭州康氧ATCC 0代原装供应。...

  • 更新时间:2026-08-07 10:40:22
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ATCC 27370 流感嗜血杆菌 Haemophilus influenzae 标准菌株 - 杭州康氧标准菌株 期货

ATCC 27370 流感嗜血杆菌 Haemophilus influenzae 标准菌株

ATCC 27370 无荚膜型流感嗜血杆菌NTHi参考株。杭州康氧ATCC 0代原装供应。
货期
3-7 周
规格
冻干粉 · 1 支/管
证书
ATCC COA 随货
价格
询价 / 阶梯价
📞 致电询价
ATCC 原装 0 代 COA 随货 冷链配送 技术支持
详细介绍
菌株来源与保藏信息

流感嗜血杆菌 ATCC 27370Haemophilus influenzae (Lehmann and Neumann) Winslow et al.)是 ATCC 保藏的一株无荚膜型(NTHi,nontypeable)流感嗜血杆菌标准菌株,BSL-2。该菌株不表达荚膜多糖——与 b 型流感嗜血杆菌(Hib,如 ATCC 10211)不同——使其成为研究非分型流感嗜血杆菌致病机制和苛养菌药敏试验的参考菌株。ATCC 27370 在 CLSI M45《苛养菌药敏试验方法》中被列为嗜血杆菌属药敏质控的参考菌株。无荚膜型流感嗜血杆菌是成人社区获得性肺炎、COPD 急性加重和中耳炎的重要病原——在非 Hib 疫苗覆盖人群中的致病比例逐年上升。

杭州康氧以 ATCC 原装 0 代冻干粉形式提供,附 ATCC 检测报告(COA),含批号信息。
生物学特性
特征ATCC 27370 表现
革兰染色阴性小球杆菌——多形性,可呈球杆状、丝状(营养贫乏时)
荚膜无荚膜(NTHi)——印度墨汁染色阴性、荚膜肿胀试验阴性、PCR bexA 基因阴性
X 因子(血红素)必需——卟啉试验阴性(自身不能合成血红素)
V 因子(NAD)必需——卫星现象阳性(在金黄色葡萄球菌菌落周围生长旺盛)
氧化酶阳性
触酶阳性
β-内酰胺酶阴性——氨苄西林敏感(BLNAR 阴性)
溶血性巧克力琼脂上不溶血(区别于溶血嗜血杆菌)
菌落形态巧克力琼脂上灰色、透明、扁平——湿润光泽的"露滴状"菌落,有鼠臭味(吲哚阳性)
CO₂ 需求5–10% CO₂ 促进初次分离生长——但非绝对必需(区别于淋病奈瑟菌)

流感嗜血杆菌的培养是微生物学实验室的基本功考验——X+V 双因子需求意味着普通血琼脂(羊血中的 V 因子在加热裂解红细胞前不可利用)上不生长,仅巧克力琼脂(加热裂解释放 V 因子)上可见菌落。卫星现象是鉴定嗜血杆菌属的经典试验——将待检菌密涂于不含 V 因子的琼脂,在中央点种金黄色葡萄球菌(ATCC 25923),37°C 5% CO₂ 培养 24 h 后仅在金葡菌菌落周围出现卫星菌落。NTHi 菌株由于无荚膜——菌落比 Hib 更扁平透明——初次分离时在巧克力琼脂上极易被经验不足的检验员漏检。

培养条件与保藏

苛养培养体系

参数推荐条件
固体培养基巧克力琼脂(加热羊血琼脂)——释放 V 因子并补充 X 因子;HTM(嗜血杆菌试验培养基,药敏专用)
分离/增菌巧克力琼脂 + 杆菌肽(300 mg/L)——抑制共生菌群,提高呼吸道标本中嗜血杆菌的检出率
温度35±2°C
CO₂5–10% CO₂(烛缸法或 CO₂ 培养箱)
培养时间24–48 h(巧克力琼脂);16–20 h(HTM 药敏试验——CLSI M45 规定)

保藏条件(苛养菌特殊要求)

保藏方式条件期限
巧克力斜面(室温)封口膜密封——4°C 冷藏加速死亡1 周(苛养菌不可久放)
脱脂牛奶 + 15% 甘油(-70°C)冻存管液氮速冻——含血红素和 NAD 的冻存液2 年以上
冻干粉(4°C)原装密封见 ATCC 检测报告

冻干粉复苏步骤

  1. 在生物安全柜中开启冻干粉西林瓶。
  2. 用无菌注射器加入 0.3–0.5 mL 预温(35°C)BHI 肉汤(补充 NAD 10 mg/L + 血红素 10 mg/L),轻轻旋转重悬。
  3. 划线至巧克力琼脂平板,立即放入 5–10% CO₂ 培养箱——不可在室温敞开放置 > 5 min(苛养菌对干燥和氧气高度敏感)。
  4. 35±2°C CO₂ 培养 24–48 h。复苏后验证:巧克力琼脂上生长 + 血琼脂上不生长 + 卫星现象阳性 + X+V 因子需求验证——四项组合确认为流感嗜血杆菌。
⚠ 苛养菌复苏关键:流感嗜血杆菌冻干粉开启后必须在 5 min 内完成接种——冻干粉吸湿后菌体细胞膜上的 X 因子转运蛋白和 V 因子依赖性脱氢酶迅速失活。若复苏失败(24 h 无菌落),不可反复涂板——应取新一支冻干粉重新复苏。已开启的冻干粉不可回存再用。
质控应用

苛养菌药敏质控(CLSI M45)

ATCC 27370 在 CLSI M45《苛养菌药敏试验方法》中被指定为嗜血杆菌属的参考质控菌株。HTM 微量肉汤稀释法——氨苄西林的 MIC 质控范围为 0.25–1 mg/L(敏感)、复方新诺明的质控范围为 0.12/2.4–0.5/9.5 mg/L。27370 由于 β-内酰胺酶阴性——在氨苄西林药敏中为敏感参考株——与产 β-内酰胺酶的嗜血杆菌(如 ATCC 49247,BLPAR)在氨苄西林 MIC 上的差异可达 16–64 倍。药敏试验的每批试验必须同时运行 27370(敏感对照)和 49247(耐药对照)。

巧克力琼脂培养基促生长验证

每批巧克力琼脂配制后必须以 27370 做促生长验证。接种 10³–10⁴ CFU 后 35°C CO₂ 培养 20–24 h,菌落数应 ≥ 理论接种量的 70%。若低于 50%——排查三方面:(1)羊血加热温度不足(应 80°C 15 min——温度过高 V 因子破坏、过低红细胞裂解不完全);(2)琼脂中血红蛋白铁含量——不同品牌羊血的 V 因子含量可差异 2–3 倍;(3)琼脂倾倒后放置 > 7 天——V 因子氧化降解。

常见问题

Q: 27370(NTHi)和 Hib(b 型荚膜株)的最关键区别是什么?
荚膜有无——直接决定抗生素选择和治疗策略的区别。NTHi 菌株无荚膜疫苗靶点——Hib 结合疫苗对 NTHi 无交叉保护。致病谱差异:Hib 主要导致侵袭性疾病(脑膜炎、菌血症、会厌炎——<5 岁儿童),NTHi 导致黏膜表面感染(中耳炎、鼻窦炎、COPD 急性加重——成人和儿童均可)。在药敏试验中——NTHi 菌株的整体抗生素敏感率低于 Hib——尤其氨苄西林(产 TEM-1 型 β-内酰胺酶的比例在 NTHi 中为 25–35%,Hib 中为 10–15%)。

Q: 卫星现象阴性——但巧克力琼脂上生长良好——是嗜血杆菌吗?
可能不是。卫星现象阴性提示该菌可以自身合成 V 因子(NAD 从头合成途径完整),不属于嗜血杆菌属——应考虑奈瑟菌属(淋病奈瑟菌和脑膜炎奈瑟菌均为卫星现象阴性)或副猪嗜血杆菌以外的巴斯德菌科成员。卫星现象阳性是嗜血杆菌属(Haemophilus)的必要条件之一——若二氧化碳需求强(CO₂ 培养箱外不生长)+ 卫星现象阴性,优先怀疑淋病奈瑟菌。

Q: 27370 传代几次后生长变慢——是衰退了吗?
可能且常见。无荚膜流感嗜血杆菌在体外连续传代中 X 因子受体(HxuABC 系统)和 V 因子依赖性脱氢酶的表达量会逐渐下调——导致对培养基中血红素和 NAD 的利用效率下降。建议:(1)传代次数限制在 5 代以内——超过 5 代从冻干粉重新复苏;(2)每次传代后在巧克力琼脂上观察菌落大小——若 24 h 菌落直径 < 1 mm(正常应为 1.5–2 mm),表明传代过度——立即重开新支复苏。

订购信息
产品名称流感嗜血杆菌标准菌株(无荚膜型)
拉丁名Haemophilus influenzae(NTHi)
保藏中心编号ATCC 27370
参考信息无荚膜(bexA⁻)/ X+V双因子必需 / CLSI M45苛养菌药敏QC株
产品形式冻干粉(0 代原装),附 ATCC 检测报告
存储条件2–8°C 避光保存

如需批量订购或技术咨询,请联系杭州康氧医疗器械有限公司。

参考资料

  1. CLSI M45: Methods for Antimicrobial Dilution and Disk Susceptibility Testing of Infrequently Isolated or Fastidious Bacteria — 3rd Edition
  2. ATCC 官网:Haemophilus influenzae 27370 产品页与检测报告(COA)
  3. Murphy TF (2003): Respiratory infections caused by non-typeable Haemophilus influenzae — Current Opinion in Infectious Diseases
  4. Kilian M (2005): Haemophilus — Bergey's Manual of Systematic Bacteriology
  5. Doern GV et al. (2000): Antimicrobial resistance among clinical isolates of Haemophilus influenzae — Antimicrobial Agents and Chemotherapy
  6. Hardy GG et al. (2003): The pathogenesis of disease due to nontypeable Haemophilus influenzae — Methods in Molecular Medicine
技术免责声明:本文技术参数来源于公开发表的 ATCC 官方产品信息及相关标准文件,仅供实验室专业人员参考。杭州康氧医疗器械有限公司对因使用本文信息产生的任何后果不承担责任。如需技术咨询或产品订购,请联系杭州康氧医疗器械有限公司。

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