菌株来源与保藏信息
铜绿假单胞菌 ATCC 27853（Pseudomonas aeruginosa (Schroeter) Migula）是全球临床微生物实验室药敏试验中使用频率最高的非发酵革兰阴性菌质控菌株。1970 年代从血液培养样本中分离，后被 ATCC 收录并纳入 CLSI M100 体系。与 ATCC 9027（防腐挑战株）的区别在于：27853 的外排泵（MexAB-OprM）基础表达水平较低且不携带任何获得性耐药基因，这使得其对氨基糖苷类和氟喹诺酮类的 MIC 值稳定落在质控范围中段，非常适合药敏质控。
杭州康氧以 ATCC 原装 0 代冻干粉形式提供，附 ATCC 检测报告（COA），含批号信息。
生物学特性
| 特征 | ATCC 27853 表现 |
|---|
| 革兰染色 | 阴性杆菌，单端单鞭毛 |
| 氧化酶 | 阳性 |
| 42°C 生长 | 阳性 |
| 色素 | 绿脓素+荧光素（Pseudomonas Agar P 上明显） |
| 耐药基因 | 不携带碳青霉烯酶、ESBL、16S rRNA 甲基化酶 |
| 外排泵 | MexAB-OprM 基础表达（无过表达突变） |
| OprD 孔蛋白 | 完整表达（对亚胺培南正常敏感） |
| 最适温度 | 35±2°C |
培养条件与保藏
| 参数 | 推荐条件 |
|---|
| 固体培养基 | TSA、MHA（Mueller-Hinton 琼脂，药敏试验强制） |
| 液体培养基 | TSB、MHB（阳离子调节型，CAMHB） |
| 温度 | 35±2°C |
| 培养时间 | 18–24 h（TSA 上形成典型金属光泽菌落） |
⚠ 药敏关键：铜绿假单胞菌对阳离子浓度极其敏感——氨基糖苷类和粘菌素的 MIC 在 CAMHB 中因 Ca²⁺/Mg²⁺ 浓度的微小差异可波动 2–4 倍。必须使用阳离子调节型 MHB（CAMHB：Ca²⁺ 20–25 mg/L，Mg²⁺ 10–12.5 mg/L），不得用普通 MHB 替代。
药敏质控应用
CLSI M100 指定质控范围
| 抗菌药物 | 纸片法抑菌圈（mm） | MIC（μg/mL） |
|---|
| 庆大霉素 | 16–21 | 0.5–2 |
| 阿米卡星 | 18–26 | 1–4 |
| 环丙沙星 | 25–33 | 0.25–1 |
| 头孢他啶 | 22–29 | 1–4 |
| 亚胺培南 | 20–28 | 1–4 |
| 哌拉西林-他唑巴坦 | 25–33 | 1–8 |
| 多粘菌素（粘菌素） | — | 0.5–4 |
ATCC 27853 vs ATCC 9027 分工
27853 是药敏质控株（CLSI M100），用于验证每批药敏板的性能。耐药基因阴性、外排泵正常表达、OprD 完整——这些特征使其 MIC 值稳定在质控范围中央。9027 是防腐挑战株（USP <51>），用于验证防腐体系的杀菌效力。两者的法规应用场景完全不重叠，选错会导致方法偏离。
常见问题
Q: 27853 的庆大霉素 MIC 偏高怎么办？
铜绿假单胞菌氨基糖苷类 MIC 对CAMHB 阳离子浓度敏感——Ca²⁺/Mg²⁺ 偏低会导致 MIC 虚高。检查 MHB 是否为阳离子调节型，必要时用原子吸收光谱验证。若更换 CAMHB 后仍未恢复，排查接种悬液浓度是否偏低（低于 0.5 McF 导致初始菌量不足，表观 MIC 偏高）。
Q: 为什么我的 27853 对亚胺培南抑菌圈突然变小了？
ATCC 27853 在连续传代 > 10 次后可能自发产生 OprD 孔蛋白缺失突变，导致对碳青霉烯类药物的敏感性降低（MIC 升高、抑菌圈缩小）。这是铜绿假单胞菌的已知特性——解决方案：从冻存管开启新一支 0 代冻干粉复苏新鲜工作菌种，限制传代次数在 5 代以内。
Q: 多粘菌素 MIC 必须用肉汤稀释法吗？
是的。CLSI/EUCAST 明确规定多粘菌素 MIC 不得用纸片扩散法或梯度扩散法（Etest）替代——多粘菌素大分子在琼脂中扩散差，纸片法和 Etest 的假敏感率可达 30–40%。必须使用肉汤微量稀释法（BMD），且需添加表面活性剂（0.002% Tween 80）防止多粘菌素粘附于微孔板塑料表面。
订购信息
| 产品名称 | 铜绿假单胞菌标准菌株 ATCC 27853 |
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| 拉丁名 | Pseudomonas aeruginosa (Schroeter) Migula |
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| 保藏中心编号 | ATCC 27853 |
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| 产品形式 | 冻干粉（0 代原装），附 ATCC 检测报告（COA） |
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| 供应商 | 杭州康氧医疗器械有限公司 |
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技术免责声明：CLSI 质控范围以最新版本为准，本文数据仅供参考。
参考资料
- CLSI M100: Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing, current
- ATCC: Pseudomonas aeruginosa 27853 product page & COA
- EUCAST: colistin MIC determination guidelines
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