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/ 产品分类 点击展开+蜡样芽孢杆菌 ATCC 10537(Bacillus cereus Frankland and Frankland)是 ATCC 保藏的一株经典需氧芽孢杆菌标准菌株,BSL-1。该菌株与 ATCC 6633(枯草芽孢杆菌)同属需氧芽孢杆菌类群,但二者在芽孢耐热性、毒素产生谱和消毒剂敏感谱方面存在显著差异。ATCC 10537 的芽孢具有中等耐热性(D100 约 2-5 min)——介于 6633 和生孢梭菌之间,使其成为湿热水灭菌验证和食品热加工工艺验证的理想中间指示菌株。在 EN 14347(化学消毒剂杀芽孢效力试验)和 AOAC 966.04(杀芽孢消毒剂载体试验)中作为强制性测试菌株被列入标准。
| 特征 | ATCC 10537 表现 |
|---|---|
| 革兰染色 | 阳性大杆菌(营养期);芽孢不着色 |
| 芽孢 | 椭圆、中生至次端生,芽孢囊不膨大——镜下与 6633 无法区分 |
| 卵磷脂酶 | 阳性(卵黄琼脂上菌落周围出现不透明沉淀带)——区别于 6633(阴性) |
| 触酶 | 阳性 |
| V-P | 阳性 |
| 淀粉水解 | 阳性 |
| 硝酸盐还原 | 阳性 |
| 酪氨酸分解 | 阳性——区别于 6633(变异) |
| 毒素产生 | 溶血素 BL(Hbl)和非溶血性肠毒素(Nhe)——蜡样芽孢杆菌腹泻型毒素 |
| 菌落形态 | TSA 上粗糙、不规则边缘、蜡样光泽——"蜡样"名称来源 |
| 最适温度 | 30–37°C |
ATCC 10537 的营养细胞与枯草芽孢杆菌在形态上难以区分——二者均为革兰阳性大杆菌、产中生芽孢。关键的生化鉴别点:(1)卵磷脂酶阳性——10537 在卵黄琼脂上产生不透明沉淀带(Nagler 反应阴性,即透明带不产生),而 6633 卵磷脂酶阴性;(2)酪氨酸分解——10537 阳性;(3)芽孢耐热性——10537 的 D100 约为 2-5 min,低于 6633(D100 约 10-20 min)。这三项组合可可靠区分两株工业上最重要的芽孢杆菌标准菌株。
| 参数 | 推荐条件 |
|---|---|
| 固体培养基 | TSA、营养琼脂、卵黄琼脂(验证卵磷脂酶阳性) |
| 液体培养基 | TSB、BHI 肉汤 |
| 温度 | 30–37°C |
| 培养时间 | 18–24 h(营养期);48–72 h(芽孢形成至 > 90%) |
| 保藏方式 | 条件 | 期限 |
|---|---|---|
| TSA斜面(4C) | 封口膜密封 | 1-2月 |
| TSB+15%甘油(-70C) | 冻存管液氮速冻 | 2年+ |
| 冻干粉(4C) | 原装密封 | 见ATCC检测报告 |
ATCC 10537 是 EN 14347(化学消毒剂杀芽孢效力试验)和 AOAC 966.04 的指定测试菌株之一——其芽孢用于验证含氯消毒剂、过氧化物消毒剂和醛类消毒剂的杀芽孢效力。与 6633 相比,10537 的芽孢对过氧乙酸和二氧化氯的敏感度略有不同——在接触时间 5 min、过氧乙酸 0.1% 条件下,10537 的 log reduction 通常比 6633 低约 0.5–1 log——提示以 6633 芽孢验证的消毒程序对蜡样芽孢杆菌芽孢的效力可能不足。BS EN 14347 要求两种芽孢杆菌芽孢(通常 10537 + 6633)同时测试,不可互相替代。
蜡样芽孢杆菌的芽孢是巴氏杀菌乳和冷藏食品中最常见的耐热芽孢污染源之一。ATCC 10537 芽孢的 D₉₀ 约为 5–10 min(在磷酸盐缓冲液中),D₉₅ 约为 1–3 min——这一热抵抗性在芽孢类细菌中处于中低水平(远低于嗜热脂肪芽孢杆菌的 D₁₂₁ > 1 min),但恰好覆盖了巴氏杀菌(72°C 15 s)后残留的芽孢风险区间。食品加工企业在设计冷藏食品的货架期时,以 10537 芽孢作为模型进行热加工致死曲线验证。
| 特征 | ATCC 10537 蜡样芽孢杆菌 | ATCC 6633 枯草芽孢杆菌 |
|---|---|---|
| 卵磷脂酶 | 阳性 | 阴性 |
| D₁₀₀ | 2–5 min | 10–20 min |
| 肠毒素 | Hbl + Nhe | 无 |
| EN 14347 目录 | 强制测试菌 | 强制测试菌 |
| 消毒剂敏感谱 | 对 PAA 稍敏感 | 对 PAA 稍耐受 |
Q: 10537 的芽孢和 6633 的芽孢在消毒剂测试中可以互换吗?
不可以。EN 14347 明确要求两种菌的芽孢分别测试——不可互相替代。实际测试数据中,10537 芽孢对过氧乙酸(0.1%,5 min)的 log reduction 通常比 6633 低 0.5–1 log——如果仅用 6633 验证并声称对芽孢杆菌芽孢有效,可能对蜡样芽孢杆菌芽孢效力不足,在食品加工环境(蜡样芽孢杆菌芽孢的检出率通常高于枯草芽孢杆菌)中构成安全隐患。
Q: 芽孢悬液制备后卵磷脂酶活性下降——是菌株退化了吗?
可能不是。卵磷脂酶(磷脂酶 C)的表达在芽孢形成过程中被母细胞分泌到培养基中——芽孢洗涤次数过多(> 5 次)会将吸附在芽孢表面的残留磷脂酶 C 洗脱。若需验证卵磷脂酶表型,应用新鲜营养期菌苔在卵黄琼脂上观察——芽孢悬液中卵磷脂酶活性下降不等于菌株退化。
Q: 10537 能产生呕吐毒素吗?操作时需要注意什么?
ATCC 10537 的毒素产生谱主要是 Hbl 和 Nhe 两种肠毒素——这是腹泻型毒素,不是呕吐毒素 cereulide。呕吐毒素由带有 ces 基因簇的特定蜡样芽孢杆菌菌株产生(如 ATCC 14579 和部分食物中毒分离株),10537 的基因组序列未检出 ces 基因。操作时按 BSL-1 标准规范——生物安全柜中操作芽孢悬液、避免气溶胶、芽孢污染的实验材料 121°C 灭菌处理后丢弃。
| 产品名称 | 蜡样芽孢杆菌标准菌株 |
|---|---|
| 拉丁名 | Bacillus cereus Frankland and Frankland |
| 保藏中心编号 | ATCC 10537 |
| 参考信息 | 卵磷脂酶阳性 / EN 14347 强制测试菌 / D₁₀₀ 2–5 min |
| 产品形式 | 冻干粉(0 代原装),附 ATCC 检测报告 |
| 存储条件 | 2–8°C 避光保存 |
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