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ATCC 200957 阪崎肠杆菌 Cronobacter sakazakii 标准菌株

简要描述：ATCC 200957 阪崎肠杆菌参考株，GB 4789.40婴幼儿配方奶粉检验阳性对照。杭州康氧ATCC 0代原装供应。...

更新时间：2026-08-07 10:22:18
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ATCC 200957 阪崎肠杆菌 Cronobacter sakazakii 标准菌株

ATCC 200957 阪崎肠杆菌参考株，GB 4789.40婴幼儿配方奶粉检验阳性对照。杭州康氧ATCC 0代原装供应。

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3-7 周

规格

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ATCC标准菌株

详细介绍

菌株来源与保藏信息

阪崎肠杆菌 ATCC 200957（Cronobacter sakazakii，曾用名 Enterobacter sakazakii）是 ATCC 保藏的一株临床分离阪崎肠杆菌参考菌株，BSL-2。该菌株分离自新生儿脑脊液——与新生儿脑膜炎/坏死性小肠结肠炎的暴发相关。阪崎肠杆菌属于肠杆菌科阪崎肠杆菌属（Cronobacter），2008 年经多相分类学修订从肠杆菌属独立为 7 个种，其中阪崎肠杆菌（C. sakazakii）是临床病例中最常检出的物种。ATCC 200957 在婴幼儿配方奶粉（PIF）的微生物检验中作为 GB 4789.40 / ISO 22964 阳性对照菌株，是奶粉生产企业质检实验室的标准配置菌株之一。

杭州康氧以 ATCC 原装 0 代冻干粉形式提供，附 ATCC 检测报告（COA），含批号信息。

生物学特性

特征	ATCC 200957 表现
革兰染色	阴性短杆菌——单在、成对或短链排列
周鞭毛	运动性阳性（区别于肺炎克雷伯菌）
氧化酶	阴性
触酶	阳性
乳糖发酵	阳性（24–48 h）
ONPG	阳性
V-P	阳性
赖氨酸脱羧酶	阴性——关键鉴别特征（与产气肠杆菌区分）
鸟氨酸脱羧酶	阳性
黄色素	Tryptone Soy Agar 25°C 培养 48–72 h 产生黄色色素——阪崎肠杆菌的经典鉴别特征
最适温度	35–37°C（但 6–47°C 宽温域生长是其环境存活力的基础）

阪崎肠杆菌在 TSA 上的菌落呈圆形、凸起、光滑、黄色——黄色色素是阪崎肠杆菌属区别于其他肠杆菌的关键形态特征。在 VRBG 琼脂（结晶紫-中性红-胆盐-葡萄糖琼脂）上产酸呈紫色菌落，周围有胆盐沉淀环。ATCC 200957 的另一个重要特征是形成荚膜——用 India ink 法或荚膜染色可观察到清晰的荚膜层，该荚膜由 K 抗原（酸性多糖）组成——对巨噬细胞吞噬和干燥环境具有保护作用，是导致其在 PIF 干燥粉末中长期存活（> 2 年）的分子基础。

⚠ 检出干扰：阪崎肠杆菌在常规肠杆菌科选择性培养基上（MacConkey、HE、XLD）的菌落形态与大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌非常相似——均为乳糖发酵型粉红色/紫色菌落。仅凭常规选择性琼脂无法区分。必须依赖黄色素产生（TSA 25°C 48 h）和生化鉴定（API 20E 或 VITEK 2 GN 卡）进行确证。

培养条件与保藏

增菌培养

参数	推荐条件
选择性增菌	改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（mLST）+ 万古霉素（10 mg/L），36±1°C 培养 22–26 h
二次增菌	mLST 培养物接种 Brain Heart Infusion（BHI）肉汤，36±1°C 培养 22–26 h
分离琼脂	显色阪崎肠杆菌琼脂（DFI 琼脂）——蓝绿色菌落；或 TSA（25°C 观察黄色素）
液体培养基	TSB、BHI 肉汤——阪崎肠杆菌在营养丰富的培养基中生长旺盛
温度	35–37°C（增菌）；25°C（色素产生）
培养时间	18–24 h（增菌/分离）；48–72 h（黄色素观察）

保藏条件

保藏方式	条件	存活期限
TSA 斜面（4°C）	封口膜密封冷藏	1–2 个月
TSB + 15% 甘油（-70°C）	冻存管液氮速冻	2 年以上
冻干粉（4°C）	原装密封西林瓶	见 ATCC 检测报告

冻干粉复苏步骤

在生物安全柜中开启冻干粉西林瓶。
用无菌注射器加入 0.3–0.5 mL TSB，轻轻旋转重悬。
转移至 TSA 斜面或平板，35–37°C 孵育 18–24 h。
复苏后挑取单菌落，在 TSA 上 25°C 培养 48–72 h——验证黄色素产生（阪崎肠杆菌确证的形态学关键特征）。同时用 API 20E 或 VITEK 2 生化鉴定确证菌种。

质控应用

婴幼儿配方奶粉（PIF）检验

ATCC 200957 是 GB 4789.40《食品安全国家标准食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验》和 ISO 22964 指定的阳性对照菌株。在奶粉生产企业的环境监控和成品放行检验中，200957 用于验证 mLST-Vm 增菌体系的检出灵敏度——人工接种浓度为 1–10 CFU / 100 g PIF 的验证实验是方法验证的基本要求。阪崎肠杆菌在 PIF 粉末中极低的感染剂量（< 3 CFU / 100 g 即构成风险）要求检验方法具有极高的灵敏度——200957 作为阳性对照的验证结果直接决定方法的检出限声明。

奶粉加工环境监控

阪崎肠杆菌在奶粉加工厂潮湿区域（喷雾干燥塔冷凝水、地板排水沟、输送带接触面）可形成生物膜——生物膜中的阪崎肠杆菌对常规 CIP（就地清洗）消毒剂的耐受性比浮游菌高 10–100 倍。工厂环境监控计划（EMP）中，200957 用作消毒剂效力评价和表面采样方法验证的参考菌株——在模拟的不锈钢表面生物膜模型中验证棉拭子擦拭法和海绵采样法的回收率。

阪崎肠杆菌热抵抗性验证

阪崎肠杆菌在 PIF 复水过程中的热抵抗性（D58–D60）显著高于沙门菌和大肠埃希菌——其 D58 值约为 0.3–1.0 min（在脱脂乳基质中），D60 值为 0.2–0.5 min。这一特性意味着：如果 PIF 冲调用水温度低于 70°C（WHO 推荐使用 > 70°C 热水冲调 PIF），阪崎肠杆菌可能存活。200957 在乳基质中的 D 值测定是奶粉热加工工艺验证（如巴氏杀菌温度-时间组合）的核心参数之一。

常见问题

Q: 阪崎肠杆菌和产气肠杆菌怎么区分？
最容易混淆的两株菌。关键鉴别：（1）赖氨酸脱羧酶——阪崎肠杆菌阴性，产气肠杆菌阳性；（2）黄色素——阪崎肠杆菌在 TSA 25°C 产生黄色色素，产气肠杆菌不产生；（3）鸟氨酸脱羧酶——阪崎肠杆菌阳性。三者同时做，交叉验证准确率 > 99%。仅凭 ONPG/V-P 两项无法可靠区分——两者均为阳性。

Q: 为什么 mLST 增菌液中要加万古霉素？
阪崎肠杆菌对万古霉素天然耐药（MIC ≥ 32 mg/L）——这是肠杆菌科中少有的特征。mLST-Vm 中 10 mg/L 万古霉素的选择压力抑制大多数革兰阳性菌（包括乳杆菌和链球菌）和其他肠杆菌科（如大肠埃希菌万古霉素 MIC ≤ 4 mg/L），但不影响阪崎肠杆菌的生长。若抑制效果不理想（背景菌过多），可将万古霉素浓度上调至 20 mg/L——阪崎肠杆菌仍能正常生长。

Q: 200957 的黄色素在传代后会消失吗？
可能。阪崎肠杆菌的黄色素合成由 crt 基因簇编码——该基因簇位于质粒或基因组岛区域，在非选择性连续传代（> 15–20 代）后可能因基因丢失或沉默而失去产色素能力。若发现 25°C TSA 培养 72 h 后黄色素显著减弱或消失，应怀疑菌株退化——建议重新从冻干粉复苏并限制传代次数（< 5 代）。

订购信息

产品名称	阪崎肠杆菌标准菌株
拉丁名	Cronobacter sakazakii（syn. Enterobacter sakazakii）
保藏中心编号	ATCC 200957
参考信息	临床分离株 / GB 4789.40 指定阳性对照 / 黄色素阳性
产品形式	冻干粉（0 代原装），附 ATCC 检测报告
存储条件	2–8°C 避光保存

如需批量订购或技术咨询，请联系杭州康氧医疗器械有限公司。

参考资料

GB 4789.40-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验》
ISO 22964:2017 Microbiology of the food chain — Horizontal method for the detection of Cronobacter spp.
ATCC 官网：Cronobacter sakazakii 200957 产品页与检测报告（COA）
WHO/FAO (2008): Enterobacter sakazakii (Cronobacter spp.) in powdered follow-up formulae — MRA Series 15
Iversen C et al. (2008): The taxonomy of Enterobacter sakazakii: proposal of a new genus Cronobacter gen. nov. — BMC Evolutionary Biology
Farmer JJ et al. (1980): Enterobacter sakazakii: a new species of Enterobacteriaceae isolated from clinical specimens — Int J Syst Bacteriol

技术免责声明：本文技术参数来源于公开发表的 ATCC 官方产品信息及相关标准文件，仅供实验室专业人员参考。杭州康氧医疗器械有限公司对因使用本文信息产生的任何后果不承担责任。如需技术咨询或产品订购，请联系杭州康氧医疗器械有限公司。

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ATCC 200957 阪崎肠杆菌 Cronobacter sakazakii 标准菌株

增菌培养

保藏条件

冻干粉复苏步骤

婴幼儿配方奶粉（PIF）检验

奶粉加工环境监控

阪崎肠杆菌热抵抗性验证

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