菌株来源与保藏信息
肺炎链球菌 ATCC 10832(Streptococcus pneumoniae (Klein) Chester)是 ATCC 保藏的一株肺炎链球菌标准菌株,BSL-2。该菌株为无荚膜型(Rough 型)肺炎链球菌——不表达荚膜多糖——在血琼脂上菌落呈粗糙型(R型——区别于有荚膜的光滑S型)——这一特征使其成为肺炎链球菌荚膜缺失对照株。ATCC 10832 在奥普托欣敏感性试验(Optochin——乙基氢化铜蛋白)和胆汁溶解试验中作为阳性对照——是 α-溶血性链球菌中肺炎链球菌确证的标准参考株。无荚膜的10832对肺炎链球菌结合疫苗(PCV13/PCV20/PPSV23)的多糖抗体无反应——可作为疫苗效力试验中荚膜依赖性杀伤的阴性对照。
在疫苗开发中——10832的无荚膜表型可用作
调理吞噬杀伤试验的阴性对照——加入抗荚膜抗体和补体后无杀伤效应——而加入抗表面蛋白抗体(如抗PspA或抗PsaA)后则有杀伤——验证抗体介导的杀伤具有抗原特异性而非非特异性补体激活。
杭州康氧以 ATCC 原装 0 代冻干粉形式提供,附 ATCC 检测报告(COA),含批号信息。
生物学特性
| 特征 | ATCC 10832 表现 |
| 革兰染色 | 阳性双球菌——矛头状成对排列 |
| 荚膜 | 无荚膜(Rough型)——Quellung反应阴性 |
| α溶血 | 血琼脂上草绿色α溶血 |
| 奥普托欣敏感 | 抑菌圈≥14mm——乙基氢化铜蛋白纸片 |
| 胆汁溶解 | 阳性——10%去氧胆酸钠37°C 30min完全溶解 |
| 触酶 | 阴性 |
| CO₂需求 | 5-10% CO₂促进生长——烛缸法/CO₂培养箱 |
培养条件与保藏
| 参数 | 推荐条件 |
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| 固体培养基 | 哥伦比亚血琼脂——5-10% CO₂ |
| 温度 | 35-37°C CO₂ 18-24h |
保藏条件
| 保藏方式 | 条件 | 期限 |
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| 血琼脂斜面(室温) | CO₂罐——4°C死亡加速 | 1周 |
| BHI+15%甘油(-70°C) | 冻存管液氮速冻 | 2年以上 |
| 冻干粉(4°C) | 原装密封 | 见ATCC检测报告 |
- 在生物安全柜中开启冻干粉西林瓶。
- 加入0.3-0.5mL BHI肉汤——旋转重悬。
- 划线至血琼脂——35-37°C 5-10% CO₂孵育18-24h。
- 复苏后验证:α溶血+Optochin敏感(≥14mm)+胆汁溶解阳性——确认为肺炎链球菌无荚膜型。
质控应用
奥普托欣/胆汁溶解阳性对照
ATCC 10832 是肺炎链球菌确证试验的标准阳性对照——Optochin纸片(5µg)抑菌圈≥14mm为肺炎链球菌。胆汁溶解试验——10%去氧胆酸钠溶液37°C 30min后菌悬液由混浊变澄清——区别于其他α溶血链球菌(耐受胆汁)。
常见问题
Q: 10832无荚膜会不会影响Optochin敏感性?
不影响。Optochin的靶点是F₀F₁-ATPase的c亚基——与荚膜多糖的表达完全无关。有荚膜和无荚膜的肺炎链球菌对Optochin敏感性无统计学差异。但生长期对敏感性有影响——对数中期(培养12-16h)的Optochin抑菌圈大于平台期(24h)。
Q: CO₂培养箱中10832生长缓慢?
肺炎链球菌在5-10% CO₂中是兼性厌氧生长——CO₂促进但不绝对需求。如果CO₂培养箱中生长显著慢于烛缸法——排查CO₂培养箱传感器是否校准——浓度偏差至<3%或>15%均可抑制生长。
Q: 10832适用于临床肺炎链球菌的质控吗?
有限适用。10832无荚膜——在胆汁溶解和Optochin敏感性试验中作为阳性对照优于有荚膜株。但荚膜肿胀试验(Quellung/Neufeld反应)和血清型PCR中以10832做阴性对照——验证试剂不与非荚膜菌交叉反应。若需有荚膜的完整肺炎链球菌质控株——推荐ATCC 49619(血清型19F)。
Q: 10832在疫苗效力试验中如何用作阴性对照?
肺炎链球菌结合疫苗的调理吞噬杀伤试验中——10832(无荚膜R型)在加入抗荚膜抗体和补体后无杀伤——确证补体介导的杀伤需要抗荚膜抗体的存在。若10832出现杀伤——提示试剂中含有非特异性补体激活因子——试验无效。
订购信息
| 产品名称 | 肺炎链球菌标准菌株(无荚膜型) |
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| 拉丁名 | Streptococcus pneumoniae(Rough型) |
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| 保藏中心编号 | ATCC 10832 |
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| 参考信息 | 无荚膜R型/Optochin敏感/胆汁溶解阳性 |
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| 产品形式 | 冻干粉(0代原装),附ATCC检测报告 |
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| 存储条件 | 2-8°C避光保存 |
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如需批量订购或技术咨询,请联系杭州康氧医疗器械有限公司。
参考资料
- ATCC官网:S. pneumoniae 10832产品页与检测报告(COA)
- CLSI M45: 苛养菌药敏试验方法
- Lund E (1959): Diagnosis of pneumococci by the Optochin and bile tests — Acta Pathologica Microbiologica Scandinavica
- Tuomanen EI (2004): The pneumococcus — ASM Press
- Tuomanen EI et al. (1995): The pneumococcus — Clinical Microbiology Reviews
- Kadioglu A et al. (2008): The role of S. pneumoniae virulence factors — Nature Reviews Microbiology
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