菌株来源与保藏信息
产气肠杆菌标准株 ATCC 13048(Enterobacter aerogenes,现分类为 Klebsiella aerogenes)是 ATCC 保藏的经典肠杆菌科参考株,BSL-1。13048 是环境水和食品微生物检验中最常用的革兰阴性发酵型肠杆菌代表株之一——被 USP <62> 和 EP 2.6.13 指定为非无菌产品微生物计数试验的促生长验证标准菌株——用于验证 TSA、MacConkey 琼脂和 VRBG 琼脂等培养基的批次性能。13048 以冻干粉(0 代原装)形式提供,附 ATCC 检测报告(COA),含批号信息。
杭州康氧以 ATCC 原装 0 代冻干粉形式提供,适用于培养基促生长验证(USP/EP/ChP)、消毒剂杀灭效力评价及环境监测质控。
生物学特性
| 特征 | ATCC 13048 |
| 革兰染色 | 阴性粗短杆菌——与肺炎克雷伯菌形态相似 |
| 氧化酶 | 阴性(肠杆菌科特征) |
| 发酵类型 | 兼性厌氧——葡萄糖发酵产酸产气 |
| 乳糖发酵 | 阳性——MacConkey 上粉红色粘稠菌落(乳糖发酵产酸使中性红变红) |
| 动力 | 阳性(周鞭毛——区别于肺炎克雷伯菌的阴性) |
| VP 试验 | 阳性(区别于大肠埃希菌的 VP 阴性) |
| 枸橼酸盐 | 阳性——西蒙氏枸橼酸盐琼脂变蓝 |
| 鸟氨酸脱羧酶 | 阳性——区别于肺炎克雷伯菌(阴性) |
| IMViC | --++(吲哚- 甲基红- VP+ 枸橼酸+)——肠杆菌属典型谱 |
ATCC 13048 与肺炎克雷伯菌(ATCC 10536)在 MacConkey 琼脂上的菌落形态几乎相同——均为粉红色粘稠菌落。区分二者的关键试验是动力(13048 阳性 / 10536 阴性)和鸟氨酸脱羧酶(13048 阳性 / 10536 阴性)。在培养基促生长验证中——13048 代表发酵型肠杆菌科的乳糖阳性菌群——与 25922(大肠埃希菌——吲哚阳性)和 10536(肺炎克雷伯菌——动力阴性)共同覆盖肠杆菌科生化表型的完整范围。
培养条件与保藏
| 参数 | 推荐条件 |
| 固体培养基 | TSA、MacConkey 琼脂(粉红)、VRBG 琼脂(红紫菌落+沉淀环) |
| 液体培养基 | TSB |
| 温度 | 30~35°C(USP 推荐 30~35°C) |
| 培养时间 | 18~24 h |
冻干粉复苏步骤
- 在超净工作台中开启冻干粉西林瓶。
- 用无菌注射器加入 0.3~0.5 mL TSB,轻轻旋转重悬。
- 转移至 TSA 和 MacConkey 琼脂平板,30~35°C 孵育 18~24 h。
- 验证 MacConkey 上粉红色菌落和动力阳性——确认产气肠杆菌后投入使用。
保藏条件
| 保藏方式 | 条件 | 期限 |
| TSA斜面(4C) | 封口膜密封 | 1-2月 |
| TSB+15%甘油(-70C) | 冻存管液氮速冻 | 2年+ |
| 冻干粉(4C) | 原装密封 | 见ATCC检测报告 |
质控应用
USP/EP/ChP——非无菌产品微生物计数促生长验证
ATCC 13048 是 USP、EP 和中国药典共同指定的培养基促生长验证标准菌株。在每批新制备的 TSA 平板上——接种 10~100 CFU 的 13048——30~35°C 18~24 h 后回收率应 ≥ 70%(与对照培养基相比)。若回收率 < 50%——排查培养基中胆盐或结晶紫浓度是否偏高(某些品牌 VRBG 中胆盐含量差异可达 2 倍——对 13048 生长的抑制程度不同)。
消毒剂评价——EN 1276 补充菌株
13048 在食品加工和化妆品行业的消毒剂评价中作为肠杆菌科补充测试菌——与大肠埃希菌(25922)互补——13048 对季铵盐类消毒剂的天然耐受性略高于大肠埃希菌(因外膜脂多糖 O 抗原链更长——阻碍季铵盐穿透外膜)——消毒剂制造商在配方优化时常用 13048 验证对肠杆菌科的广谱杀灭能力。
常见问题
Q: 13048 在 MacConkey 上菌落形态与大肠埃希菌有什么不同?
两者均为粉红色乳糖发酵菌落——但 13048 的菌落更粘稠(产荚膜——用接种环挑取时拉丝明显)且直径更大(2~3 mm vs 1.5~2 mm)。大肠埃希菌在 MacConkey 上菌落周围有胆盐沉淀环——13048 则没有或沉淀环极弱。
Q: 13048 在培养基促生长验证中的回收率标准是多少?
USP 要求:待验证培养基上 13048 的菌落数 ≥ 对照培养基上菌落数的 70%。若回收率在 50~70%——该批次培养基判为"条件接收"——可用于常规检验但不可用于稳定性试验等关键检测。若 < 50%——该批次培养基不合格。
订购信息
| 产品名称 | 产气肠杆菌标准株 |
| 拉丁名 | Klebsiella aerogenes(原 Enterobacter aerogenes) |
| 保藏中心编号 | ATCC 13048 |
| 产品形式 | 冻干粉(0 代原装),附 ATCC 检测报告(COA),含批号信息 |
| 存储条件 | 2~8°C 避光保存 |
技术免责声明:本文技术参数来源于 USP、EP、ATCC 官方信息及相关文献,仅供实验室专业人员参考。杭州康氧医疗器械有限公司对因使用本文信息产生的任何后果不承担责任。如需技术咨询或产品订购,请联系杭州康氧医疗器械有限公司。
参考资料
- ATCC 官网:Enterobacter aerogenes 13048 产品页
- USP:Microbiological Examination of Nonsterile Products
- EP 2.6.13:非无菌产品微生物检查
- 中国药典 1105:非无菌产品微生物限度检查——微生物计数法