菌株来源与保藏信息
草酸青霉标准株 ATCC 10476(Penicillium oxalicum)是 ATCC 保藏的真菌参考株,BSL-1。10476 属于子囊菌门散囊菌纲——产生大量分生孢子(绿色——青霉属典型形态)——在工业微生物学中被用于纤维素酶、淀粉酶和木聚糖酶的生产菌株筛选。10476 也是抗真菌药物敏感性试验(CLSI M38)的真菌质控菌株之一——与白色念珠菌(ATCC 10231)和黑曲霉(ATCC 16404)共同覆盖酵母菌+霉菌的真菌药敏质控范围。ATCC 10476 以冻干粉形式提供,附 ATCC 检测报告(COA)。
杭州康氧以 ATCC 原装冻干粉形式提供,适用于抗真菌药物敏感性试验、工业酶制剂菌株筛选及防腐剂抗真菌效力验证。
生物学特性
| 特征 | ATCC 10476(草酸青霉) |
| 分类 | 子囊菌门——散囊菌纲——散囊菌目——曲霉科——Penicillium |
| 菌落形态 | SDA 25°C 5 d:菌落绒状——中央灰绿色——边缘白色——背面淡黄色 |
| 分生孢子 | 帚状枝——瓶梗产孢——分生孢子球形至近球形——光滑——绿色 |
| 最适温度 | 25~28°C——37°C 生长极慢或不生长 |
| 产酶 | 纤维素酶、半纤维素酶(木聚糖酶)、淀粉酶——工业酶制剂代表菌株 |
| 抗真菌药物 | 对两性霉素 B(AMB)和伊曲康唑(ITC)敏感——CLSI M38 参考株 |
草酸青霉与产黄青霉(P. chrysogenum)形态相似——主要区别在于分生孢子梗的帚状枝分枝方式:草酸青霉为双轮生或三轮生不对称帚状枝——瓶梗排列松散;产黄青霉为三轮生对称帚状枝——瓶梗紧密排列。10476 在工业酶制剂领域的价值在于其完整的纤维素酶系——表达内切葡聚糖酶(EG)、外切纤维二糖水解酶(CBH)和 β-葡萄糖苷酶(BG)——三者协同完成纤维素到葡萄糖的转化。
培养条件与保藏
| 参数 | 推荐条件 |
| 固体培养基 | SDA(沙氏葡萄糖琼脂)、PDA(马铃薯葡萄糖琼脂)、CYA(察氏酵母膏琼脂) |
| 液体培养基 | SDB、PDB |
| 温度 | 25~28°C |
| 培养时间 | 3~5 d(SDA——分生孢子成熟);5~7 d(产酶培养——CMC 琼脂平板刚果红染色显示纤维素水解圈) |
保藏条件
| 保藏方式 | 条件 | 期限 |
|---|
| TSA斜面(4C) | 封口膜密封 | 1-2月 |
| TSB+15%甘油(-70C) | 冻存管液氮速冻 | 2年+ |
| 冻干粉(4C) | 原装密封 | 见ATCC检测报告 |
冻干粉复苏步骤
- 在超净工作台中开启冻干粉西林瓶。
- 用无菌注射器加入0.3-0.5 mL TSB,轻轻旋转重悬。
- 转移至TSA平板或斜面,35+/-2C孵育18-24h。
- 复苏后挑取单菌落验证纯度,确认表型合格后投入日常使用。
质控应用
CLSI M38 推荐的丝状真菌抗真菌药物敏感性试验质控株。在两性霉素 B 和伊曲康唑的 MIC 测定中——10476 的 MIC 值范围稳定——用于验证每批 RPMI-1640 培养基和药物板的批次一致性。在防腐剂挑战试验中——10476 可作为霉菌代表菌株的补充(与 16404 黑曲霉互补——黑曲霉孢子色深、生长速度快——草酸青霉孢子色浅——在化妆品和涂料中更常见为污染菌)。
常见问题
Q: 10476 的孢子悬液如何制备?
在 SDA 斜面 25°C 培养 5~7 d——分生孢子充分成熟(菌落呈灰绿色粉末状)后——用含 0.01% Tween 80 的无菌生理盐水 5 mL 冲洗斜面——轻轻刮取孢子——涡旋震荡 30 s 分散孢子——用血球计数板计数——调整至所需浓度。10476 孢子悬液 4°C 可保存 1~2 周——长期保存需 -80°C 冷冻。
Q: 10476 在 CLSI M38 中唑类药物 MIC 判读时间?
CLSI M38 规定丝状真菌的唑类药物 MIC 在 48 h 判读——以 80% 生长抑制为终点。10476 的伊曲康唑 MIC 约 0.25~1 mg/L——在两性霉素 B 中为 0.5~2 mg/L。若 48 h 生长对照孔生长不充分(< 3+)——延长至 72 h 判读。
Q: 10476在CLSI M38中两性霉素B的MIC QC范围是多少?
两性霉素B MIC 0.5-2 mg/L(CLSI M38 QC范围)。若MIC>2 mg/L——排查RPMI-1640中谷氨酰胺是否降解。
订购信息
| 产品名称 | 草酸青霉标准株 |
| 拉丁名 | Penicillium oxalicum |
| 保藏中心编号 | ATCC 10476 |
| 参考信息 | 丝状真菌——CLSI M38 抗真菌药敏 QC |
| 产品形式 | 冻干粉,附 ATCC 检测报告(COA),含批号信息 |
| 存储条件 | 2~8°C 避光保存 |
技术免责声明:本文技术参数来源于公开发表的ATCC官方产品信息及相关标准文献,仅供实验室专业人员参考。杭州康氧医疗器械有限公司对因使用本文信息产生的任何后果不承担责任。如需技术咨询或产品订购,请联系杭州康氧医疗器械有限公司。
参考资料
- ATCC 官网:Penicillium oxalicum 10476 产品页
- CLSI M38: Reference Method for Broth Dilution Antifungal Susceptibility Testing of Filamentous Fungi
- Gusakov AV et al. (2011): Cellulases from Penicillium species for bioconversion — Biotechnol Biofuels
- EUCAST E.Def 9.3: Antifungal susceptibility testing of molds
- Gusakov AV et al. (2011): Penicillium cellulases — Biotechnol Biofuels
- EUCAST E.Def 9.3: Mould susceptibility testing
- Gusakov AV et al. (2011): Penicillium cellulases