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ATCC 13985 产气荚膜梭菌 Clostridium perfringens 标准菌株

简要描述：ATCC 13985 产气荚膜梭菌A型参考株，GB 4789.13/ISO 7937食品检验阳性对照。杭州康氧ATCC 0代原装供应。...

更新时间：2026-08-07 10:19:27
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ATCC 13985 产气荚膜梭菌 Clostridium perfringens 标准菌株

ATCC 13985 产气荚膜梭菌A型参考株，GB 4789.13/ISO 7937食品检验阳性对照。杭州康氧ATCC 0代原装供应。

货期

3-7 周

规格

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ATCC标准菌株

详细介绍

菌株来源与保藏信息

产气荚膜梭菌 ATCC 13985（Clostridium perfringens (Veillon and Zuber) Hauduroy et al.）是 ATCC 保藏的一株 A 型产气荚膜梭菌标准菌株，BSL-2。该菌株在 GB 4789.13《食品安全国家标准食品微生物学检验产气荚膜梭菌检验》和 ISO 7937 中作为阳性对照菌株。产气荚膜梭菌根据产生的四种主要外毒素（α、β、ε、ι）分为 A–E 五个型，A 型是食物中毒暴发中最常见的型别——α 毒素（磷脂酶 C）是 A 型的主要毒力因子。ATCC 13985 的 α 毒素产量稳定，在 TSC 琼脂（胰胨-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂）上产生特征性黑色菌落（亚硫酸盐还原为硫化物），是食品检验实验室的标准配置菌株。

杭州康氧以 ATCC 原装 0 代冻干粉形式提供，附 ATCC 检测报告（COA），含批号信息。

生物学特性

特征	ATCC 13985 表现
革兰染色	阳性粗大杆菌，两端钝圆——芽孢椭圆形、次端生、芽孢囊膨大
厌氧性	专性厌氧——氧气浓度 > 0.5% 即抑制生长
溶血性	血琼脂上双溶血环——内环完全溶血（θ 毒素）、外环不完全溶血（α 毒素/磷脂酶 C）
卵磷脂酶（α 毒素）	阳性——卵黄琼脂上菌落周围出现不透明沉淀带（Nagler 反应：抗 α 毒素血清中和后不透明带消失）
触酶	阴性（区别于需氧芽孢杆菌）
乳糖发酵	阳性——产酸产气（"暴烈发酵"——TSC 琼脂深层菌落裂解培养基）
明胶液化	阳性
运动性	阴性——区别于其他梭菌属
TSC 菌落	黑色菌落（亚硫酸盐 → 硫化物 + Fe³⁺ → FeS 黑色沉淀）——产气荚膜梭菌的经典鉴别特征
最适温度	37–45°C（倍增时间仅 8–10 min——已知细菌中最快之一）

产气荚膜梭菌在 45°C 高温下的快速生长特性（45°C TSC 倾注法 24 h 即可见黑色菌落）是其食品微生物检验的鉴别基础——GB 4789.13 规定 36±1°C 厌氧培养 20–24 h 后计数黑色菌落。双溶血环和 Nagler 反应阳性是其与生孢梭菌（ATCC 19404）的核心鉴别点——19404 卵磷脂酶阴性、无溶血环、在 TSC 上不产生黑色菌落。

培养条件与保藏

厌氧培养体系

参数	推荐条件
选择性琼脂	TSC 琼脂（含环丝氨酸 400 mg/L 抑制兼性厌氧菌）
非选择性琼脂	血琼脂、RCM 琼脂
液体培养基	FTM（硫乙醇酸盐流体培养基）、RCM（强化梭菌培养基）
温度	37°C（常规培养）；45°C（快速鉴别）
培养时间	18–24 h（TSC 倾注）；厌氧罐中 AnaeroGen 或混合气体（80% N₂ + 10% H₂ + 10% CO₂）

保藏条件

保藏方式	条件	期限
RCM 深层琼脂（4°C）	厌氧罐保存	1–2 月
RCM + 15% 甘油（-70°C）	冻存管厌氧分装	2 年+
冻干粉（4°C）	原装密封	见 ATCC 检测报告

冻干粉复苏步骤

在厌氧工作站中或在生物安全柜中快速操作后立即转入厌氧罐——尽量减少空气暴露时间（< 5 min）。
用无菌注射器加入 0.3–0.5 mL 预还原 RCM（使用前于厌氧环境中放置 ≥ 12 h 去除溶解氧），轻轻旋转重悬。
转移至预还原血琼脂平板，37°C 厌氧培养 18–24 h。
复苏后验证菌落形态：血琼脂上双溶血环 + 卵黄琼脂上 Nagler 反应阳性（抗 α 毒素血清中和后可逆）——双重确认为产气荚膜梭菌。

质控应用

食品中产气荚膜梭菌检验（GB 4789.13）

ATCC 13985 是 GB 4789.13 指定阳性对照——TSC 琼脂倾注法（36±1°C 厌氧 20–24 h）后计数黑色菌落，随机挑取 5 个菌落做确证试验（革兰染色 + 乳糖明胶培养基）。阳性对照的回收率（实测 CFU / 理论接种 CFU × 100%）应 ≥ 50%——低于此标准提示 TSC 中环丝氨酸效价下降或厌氧环境失效。每批 TSC 培养基配制后必须以 13985 做促生长验证。

灭菌验证与消毒剂评价

产气荚膜梭菌是芽孢类细菌中对环氧乙烷（EO）中等耐受性的代表菌株——其芽孢 DEO（600 mg/L，54°C，50% RH）约为 3–6 min，介于生孢梭菌（DEO 7–15 min）和萎缩芽孢杆菌（DEO 2–3 min）之间。在湿热灭菌验证中，13985 芽孢的 D₁₂₁ 约为 0.5–1.5 min——可作为湿热灭菌过渡期指示菌（生物负载中最耐热的非芽孢菌 → 产气荚膜梭菌芽孢 → 嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢的三级挑战体系中的中间级别）。

常见问题

Q: TSC 琼脂上黑色菌落不够明显是怎么回事？
三方面排查：（1）亚硫酸盐含量——TSC 中 Na₂S₂O₅ 浓度应为 0.1%，配制超过 2 周的 TSC 平板亚硫酸盐氧化失效导致黑色减弱；（2）铁离子来源——柠檬酸铁铵（0.1%）而非 FeCl₃ 是标准配方——FeCl₃ 在 TSC 的弱碱性 pH 下易形成 Fe(OH)₃ 胶体，降低可利用 Fe³⁺；（3）琼脂深度——TSC 倾注法而非涂布法——深层菌落有利于厌氧微环境形成和 H₂S 在菌落周围的浓集。

Q: 13985 和 19404（生孢梭菌）在厌氧罐中怎么区分？
（1）TSC 琼脂——13985 黑色菌落、19404 不产生黑色菌落；（2）卵黄琼脂——13985 不透明沉淀带（卵磷脂酶+）、19404 无；（3）代谢产物——13985 产气（暴烈发酵）、19404 不产气。三点组合可 100% 区分。

Q: 厌氧培养没有专用工作站怎么办？
使用厌氧罐 + 厌氧产气袋（AnaeroGen 或 AnaeroPack）即可满足 GB 4789.13 要求——放入氧气指示条（刃天青或亚甲基蓝）确认去氧效果（刃天青粉色→无色、亚甲基蓝蓝色→无色）。注意：开罐取样时氧气指示条会重新变色——这是正常现象，不代表培养失败。

订购信息

产品名称	产气荚膜梭菌标准菌株
拉丁名	Clostridium perfringens（A 型）
保藏中心编号	ATCC 13985
参考信息	α 毒素（磷脂酶 C）阳性 / GB 4789.13 阳性对照 / 双溶血环
产品形式	冻干粉（0 代原装），附 ATCC 检测报告
存储条件	2–8°C 避光保存

如需批量订购或技术咨询，请联系杭州康氧医疗器械有限公司。

参考资料

GB 4789.13-2012《食品安全国家标准食品微生物学检验产气荚膜梭菌检验》
ISO 7937:2004 Horizontal method for the enumeration of Clostridium perfringens
ATCC 官网：Clostridium perfringens 13985 产品页与检测报告（COA）
Rood JI & Cole ST (1991): Molecular genetics and pathogenesis of Clostridium perfringens — Microbiological Reviews
McClane BA (2001): Clostridium perfringens — Chapter in Food Microbiology (ASM Press)
Labbe RG & Juneja VK (2013): Clostridium perfringens — Chapter in Guide to Foodborne Pathogens

技术免责声明：本文技术参数来源于公开发表的 ATCC 官方产品信息及相关标准文件，仅供实验室专业人员参考。杭州康氧医疗器械有限公司对因使用本文信息产生的任何后果不承担责任。如需技术咨询或产品订购，请联系杭州康氧医疗器械有限公司。

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食品中产气荚膜梭菌检验（GB 4789.13）

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