菌株来源与保藏信息
鸟分枝杆菌标准株 ATCC 15769(Mycobacterium avium subsp. avium)是 ATCC 保藏的经典非结核分枝杆菌(NTM)参考株,BSL-2。15769 属于鸟分枝杆菌复合群(MAC——M. avium complex)——是免疫缺陷患者(AIDS、器官移植后)最常见的NTM感染病原体之一。由于分枝杆菌细胞壁富含分枝菌酸(mycolic acid)——形成高度疏水的蜡质外层——15769 对多种化学消毒剂具有极强的天然耐受性——其对季铵盐类和醇类消毒剂的抵抗力远超结核分枝杆菌。这一特性使 15769 被广泛用于消毒剂的杀分枝杆菌效力验证。ATCC 15769 以冻干粉形式提供,附 ATCC 检测报告(COA)。
杭州康氧以 ATCC 原装冻干粉形式提供,适用于消毒剂杀分枝杆菌效力验证及非结核分枝杆菌药敏试验。
生物学特性
| 特征 | ATCC 15769 |
| 抗酸染色 | 阳性——分枝杆菌属特征 |
| 生长速度 | 慢生长——Middlebrook 7H10 上 37°C 需 7~14 d 可见菌落 |
| 色素 | 非产色——菌落灰白色或淡黄色 |
| 烟酸 | 阴性(区别于结核分枝杆菌烟酸阳性) |
| 硝酸盐还原 | 阴性 |
| 热触酶 | 稳定(68°C 20 min 后仍阳性——区别于结核分枝杆菌) |
| 细胞壁 | 分枝菌酸 + 阿拉伯半乳聚糖 + 肽聚糖三层——高疏水性——消毒剂屏障 |
| 最适温度 | 37°C |
分枝杆菌细胞壁的分枝菌酸层(厚度约 8~10 nm——比革兰阴性菌外膜厚 2~3 倍)是其对消毒剂和抗生素天然耐药的结构基础。15769 的分枝菌酸碳链长度(C78~C90)比结核分枝杆菌(C76~C88)更长——疏水性更强——季铵盐类消毒剂(苯扎氯铵)穿透这层蜡质屏障的效率极低——需延长接触时间至 10~30 min 才能达到 log 减少 ≥ 4。
培养条件与保藏
| 参数 | 推荐条件 |
| 固体培养基 | Middlebrook 7H10/7H11 琼脂、LJ 斜面(碱性复红抑制杂菌) |
| 液体培养基 | Middlebrook 7H9 肉汤(+ OADC 增菌液——提供脂肪酸和牛血清白蛋白) |
| 温度 | 37°C |
| 培养时间 | 7~14 d(初次复苏);10~21 d(药敏试验) |
冻干粉复苏步骤
- 在生物安全柜(BSL-2)中开启冻干粉西林瓶。
- 用无菌注射器加入 0.5 mL Middlebrook 7H9 肉汤(含 OADC),旋转重悬。
- 转移至 Middlebrook 7H10 斜面或 LJ 斜面,37°C 孵育 7~14 d。
- 初次生长后挑取菌落——抗酸染色确认为抗酸杆菌——传代至新鲜培养基。
| 保藏方式 | 条件 | 期限 |
| 7H9+15%甘油(-70C) | 冻存管 | 2年+ |
⚠ 生长慢≠失活:15769 初次复苏需 7~14 d——在 48~72 h 未见生长属于正常现象(非冻干粉失活)。分枝杆菌的倍增时间约 15~20 h——比大肠埃希菌慢约 30 倍。切勿在 3 d 内因未见生长而丢弃培养管。
保藏条件
| 保藏方式 | 条件 | 期限 |
|---|
| TSA斜面(4C) | 封口膜密封 | 1-2月 |
| TSB+15%甘油(-70C) | 冻存管液氮速冻 | 2年+ |
| 冻干粉(4C) | 原装密封 | 见ATCC检测报告 |
质控应用
消毒剂杀分枝杆菌效力验证
15769 的消毒剂耐受性在细菌中仅次于细菌芽孢——介于营养细胞和芽孢之间。AOAC 和 EN 14348 将其列为"杀分枝杆菌效力"声明的标准测试株。在消毒剂悬浮试验中——与金葡菌(6538——5 min 接触即可杀灭)相比——15769 需要 10~30 min 的相同消毒剂浓度才能达到等同的 log 减少。若消毒剂可宣称对 15769 的杀分枝杆菌活性——则对铜绿假单胞菌和 MRSA 等营养细胞的杀灭效力自动推定成立。
常见问题
Q: 15769 在 TSA 上能生长吗?
不能。分枝杆菌细胞壁的特性使其在普通细菌培养基(TSA、血琼脂)上几乎不生长——必须使用含脂肪酸(通过 OADC 或蛋黄提供)的专用培养基(Middlebrook 7H10/7H11 或 LJ)。若在 TSA 上出现生长——为杂菌污染——需重新从冻干粉复苏。
Q: 消毒剂试验中分枝杆菌为什么用鸟分枝杆菌而不用结核分枝杆菌?
15769(鸟分枝杆菌)的消毒剂耐受性高于结核分枝杆菌——且 BSL-2(结核分枝杆菌需 BSL-3)。监管指南(如 EPA 和 EN)选择鸟分枝杆菌作为杀分枝杆菌效力的"worst-case"替代——若消毒剂可杀灭 15769——则对结核分枝杆菌的杀灭效力可推定成立。
订购信息
| 产品名称 | 鸟分枝杆菌标准株 |
| 保藏中心编号 | ATCC 15769 |
| 产品形式 | 冻干粉,附 ATCC 检测报告(COA),含批号信息 |
| 存储条件 | 2~8°C 避光保存 |
技术免责声明:本文技术参数来源于公开发表的ATCC官方产品信息及相关标准文献,仅供实验室专业人员参考。杭州康氧医疗器械有限公司对因使用本文信息产生的任何后果不承担责任。如需技术咨询或产品订购,请联系杭州康氧医疗器械有限公司。
参考资料
- ATCC 官网:Mycobacterium avium 15769 产品页
- EN 14348: Chemical disinfectants — Quantitative suspension test for mycobactericidal activity
- Griffith DE et al. (2007): ATS/IDSA guideline for NTM disease
- Falkinham JO (2003): Mycobacterial aerosols and respiratory infection — Emerg Infect Dis
- EN 14348: Mycobactericidal activity test