菌株来源与保藏信息
龟分枝杆菌脓肿亚种标准株 ATCC 19977(Mycobacterium chelonae,现分类为 Mycobacteroides chelonae)是 ATCC 保藏的快速生长非结核分枝杆菌(RGM)参考株,BSL-2。19977 是快速生长分枝杆菌的代表菌株——与慢生长分枝杆菌(如鸟分枝杆菌 15769——需 7~14 d 可见菌落)不同——19977 在 3~5 d 内即在固体培养基上形成可见菌落。19977 是消毒剂杀分枝杆菌效力评价中快速生长分枝杆菌的标准测试株,被 AOAC 和 EPA 用于验证消毒剂对分枝杆菌的杀灭效力。ATCC 19977 以冻干粉形式提供,附 ATCC 检测报告(COA)。
杭州康氧以 ATCC 原装冻干粉形式提供,适用于消毒剂杀分枝杆菌效力验证、快速生长分枝杆菌药敏试验及内镜消毒剂评价。
生物学特性
| 特征 | ATCC 19977 |
| 抗酸染色 | 阳性 |
| 生长速度 | 快速——3~5 d(区别于慢生长分枝杆菌 7~14 d) |
| 色素 | 非产色——菌落乳白色至淡黄色 |
| 硝酸盐还原 | 阴性 |
| 铁摄取 | 阴性 |
| 5% NaCl 耐受 | 阳性(龟分枝杆菌特征——区别于脓肿分枝杆菌) |
| 最适温度 | 28~35°C |
龟分枝杆菌在环境中广泛分布于水系统和土壤——是医院内与内镜、注射和手术器械相关的非结核分枝杆菌感染中最常见的快速生长分枝杆菌。19977 的分枝菌酸层虽比慢生长分枝杆菌薄——但其对戊二醛(2% 碱性戊二醛——内镜消毒金标准)的耐受性仍高于任何营养细胞——需 20~45 min 接触才能达到杀分枝杆菌效力。
培养条件与保藏
| 参数 | 推荐条件 |
| 固体培养基 | Middlebrook 7H10、LJ 斜面 |
| 液体培养基 | Middlebrook 7H9 + OADC |
| 温度 | 28~35°C |
| 培养时间 | 3~5 d(快速——显著快于鸟分枝杆菌) |
⚠ BSL-2:操作 19977 须在生物安全柜中进行——冻干粉开瓶时避免气溶胶产生。
保藏条件
| 保藏方式 | 条件 | 期限 |
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| TSA斜面(4C) | 封口膜密封 | 1-2月 |
| TSB+15%甘油(-70C) | 冻存管液氮速冻 | 2年+ |
| 冻干粉(4C) | 原装密封 | 见ATCC检测报告 |
冻干粉复苏步骤
- 在超净工作台中开启冻干粉西林瓶。
- 用无菌注射器加入0.3-0.5 mL TSB,轻轻旋转重悬。
- 转移至TSA平板或斜面,35+/-2C孵育18-24h。
- 复苏后挑取单菌落验证纯度,确认表型合格后投入日常使用。
质控应用
EPA / AOAC 指定的消毒剂杀分枝杆菌效力评价标准测试株。与鸟分枝杆菌(15769——慢生长——消毒剂耐受性较强)互补——19977 代表快速生长分枝杆菌——对戊二醛和过氧乙酸的耐受性介于结核分枝杆菌和鸟分枝杆菌之间。EPA 要求可宣称"杀分枝杆菌"的消毒剂须同时通过 19977 和 15769 的测试。内镜自动清洗消毒机(AER)的消毒效力验证也以 19977 为主要挑战菌之一。
常见问题
Q: 19977 和 15769 在消毒剂试验中有什么区别?
19977 为快速生长分枝杆菌(3~5 d 菌落)——消毒剂耐受性中等;15769 为慢生长(7~14 d)——消毒剂耐受性较高。EPA 要求两者均通过才可宣称"杀分枝杆菌"——若仅通过 19977 而未通过 15769——只能宣称"杀快速生长分枝杆菌"而不能通称"杀分枝杆菌"。
订购信息
| 产品名称 | 龟分枝杆菌标准株(快速生长型) |
| 保藏中心编号 | ATCC 19977 |
| 产品形式 | 冻干粉,附 ATCC 检测报告(COA),含批号信息 |
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技术免责声明:本文技术参数来源于公开发表的ATCC官方产品信息及相关标准文献,仅供实验室专业人员参考。杭州康氧医疗器械有限公司对因使用本文信息产生的任何后果不承担责任。如需技术咨询或产品订购,请联系杭州康氧医疗器械有限公司。
参考资料
- ATCC 官网:Mycobacterium chelonae 19977 产品页
- EPA DIS/TSS-12: Disinfectant efficacy testing for mycobacteria
- Brown-Elliott BA et al. (2012): Antimicrobial susceptibility of rapidly growing mycobacteria
- Brown-Elliott BA et al. (2012): RGM susceptibility — Clin Microbiol Rev
- EPA DIS/TSS-12: Mycobactericidal testing