菌株来源与保藏信息
粪肠球菌 ATCC 29212(Enterococcus faecalis (Andrewes and Horder) Schleifer and Kilpper-Balz)是 CLSI M100 指定的肠球菌属药敏试验质控菌株。该菌株最初分离自临床尿液样本,对万古霉素敏感(VSE),不携带 vanA/vanB 耐药基因簇,对氨基糖苷类呈固有低水平耐药(无高水平氨基糖苷类耐药 HLAR 基因)。ATCC 29212 因其稳定的野生型耐药表型和快速生长特性,在肠球菌药敏质控中不可替代。
杭州康氧以 ATCC 原装 0 代冻干粉形式提供,附 ATCC 检测报告(COA),含批号信息。
生物学特性
| 特征 | ATCC 29212 表现 |
| 革兰染色 | 阳性球菌,成对或短链排列 |
| 触酶 | 阴性(与葡萄球菌的关键区分) |
| PYR | 阳性(吡咯烷酮酶——粪肠球菌特征) |
| 胆汁七叶苷 | 阳性(肠球菌属特征) |
| 6.5% NaCl 生长 | 阳性(肠球菌属特征) |
| 万古霉素敏感型 | VSE(vanA/vanB 阴性) |
| HLAR | 阴性——庆大霉素 MIC 500 μg/mL 时不生长 |
| 溶血性 | 通常 γ 溶血(非溶血),部分批次弱 β |
| 最适温度 | 35±2°C |
培养条件与保藏
| 参数 | 推荐条件 |
| 固体培养基 | TSA + 5% 羊血、MHA、BHI 琼脂 |
| 液体培养基 | BHI 肉汤、CAMHB(需补充 2.5–5% 裂解马血用于达托霉素等脂肽类) |
| 温度 | 35±2°C |
| 培养时间 | 18–24 h;药敏 16–20 h |
⚠ 达托霉素药敏提示:CLSI 要求达托霉素 MIC 测定时 CAMHB 必须补充钙离子至 50 mg/L(标准 CAMHB 的 Ca²⁺ 仅约 20–25 mg/L)。钙离子浓度不足会导致达托霉素 MIC 虚高(假耐药)——这是药敏实验室最常犯的错误之一。补充方法:向 1 L CAMHB 中加入无菌 CaCl₂ 储备液(终浓度 50 mg/L Ca²⁺),混匀后使用。
药敏质控应用
CLSI M100 指定质控范围
| 抗菌药物 | MIC(μg/mL) |
| 氨苄西林 | 0.5–2 |
| 万古霉素 | 1–4 |
| 达托霉素 | 1–8(需补充 50 mg/L Ca²⁺) |
| 利奈唑胺 | 1–4 |
| 高浓度庆大霉素 | 不生长(HLAR 阴性——500 μg/mL 筛选阴性) |
| 左氧氟沙星 | 0.5–2 |
高浓度庆大霉素筛选试验
ATCC 29212 的 HLAR 阴性表型使其在 500 μg/mL 庆大霉素筛选平板(BHI 琼脂 + 500 μg/mL 庆大霉素)上不生长——这是验证 HLAR 筛选方法的最关键质控。若 29212 在庆大霉素筛选平板上生长,说明庆大霉素浓度低于 500 μg/mL,需重配筛选平板。
常见问题
Q: 29212 和粪肠球菌 ATCC 51299(VRE 质控株)的区别?
ATCC 29212 = 万古霉素敏感株(VSE)——用于验证革兰阳性菌药敏方法的整体准确性。ATCC 51299 = 万古霉素耐药株(VRE,vanB 型)——专门用于验证万古霉素耐药筛选方法(如万古霉素 BHI 琼脂筛选平板)。两者互补:29212 确保方法不会"冤枉"敏感株,51299 确保方法不会"放过"耐药株。
Q: 为什么我的 29212 达托霉素 MIC 忽高忽低?
达托霉素 MIC 对 Ca²⁺ 浓度和培养基批号高度敏感。排查顺序:① 确认 CAMHB 已补钙至 50 mg/L;② 更换新批号 CAMHB(不同批号的 Ca²⁺ 可偏差 10–20%);③ 检查是否使用了同一批肉汤超过 7 天(Ca²⁺ 随时间从溶液中沉淀损失)。达托霉素质控波动是 CLSI 官方文件承认的已知难题——若排除上述因素后仍不稳定,建议换用新批号菌株。
订购信息
| 产品名称 | 粪肠球菌标准菌株 ATCC 29212 |
| 拉丁名 | Enterococcus faecalis (Andrewes and Horder) Schleifer and Kilpper-Balz |
| 保藏中心编号 | ATCC 29212 |
| 产品形式 | 冻干粉(0 代原装),附 ATCC 检测报告(COA) |
| 供应商 | 杭州康氧医疗器械有限公司 |
技术免责声明:CLSI 质控范围以最新版本为准,本文数据仅供参考。
参考资料
- CLSI M100: Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing, current
- ATCC: Enterococcus faecalis 29212 product page & COA
- CLSI M100: high-level aminoglycoside screening