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ATCC 35222 空肠弯曲菌 Campylobacter jejuni 标准菌株

简要描述：ATCC 35222 微需氧空肠弯曲菌，GB 4789.9/ISO 10272阳性对照。杭州康氧ATCC 0代原装供应。...

更新时间：2026-08-07 10:42:58
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ATCC 35222 空肠弯曲菌 Campylobacter jejuni 标准菌株

ATCC 35222 微需氧空肠弯曲菌，GB 4789.9/ISO 10272阳性对照。杭州康氧ATCC 0代原装供应。

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ATCC标准菌株

详细介绍

菌株来源与保藏信息

空肠弯曲菌 ATCC 35222（Campylobacter jejuni subsp. jejuni (Jones et al.) Veron and Chatelain）是 ATCC 保藏的一株临床分离空肠弯曲菌标准菌株，BSL-2。该菌株在 GB 4789.9《食品安全国家标准食品微生物学检验空肠弯曲菌检验》和 ISO 10272 中作为阳性对照菌株。空肠弯曲菌是全球细菌性肠炎的首要病原——年发病率超过沙门菌和志贺菌之和——家禽（尤其是鸡肉）的肠道携带率高达 50–80%。ATCC 35222 在弯曲菌选择性琼脂（mCCDA/Preston 琼脂）上产生特征性"扩散膜状"菌落，是食品检验和临床微生物室的标准配置株。

杭州康氧以 ATCC 原装 0 代冻干粉形式提供，附 ATCC 检测报告（COA），含批号信息。

生物学特性

特征	ATCC 35222 表现
革兰染色	阴性弯曲杆菌——S 形、"海鸥翅"形或螺旋形
氧化酶	阳性
触酶	阳性——区别于胎儿弯曲菌（触酶阴性）
马尿酸盐水解	阳性——Campylobacter jejuni 与 C. coli 的关键鉴别（C. coli 马尿酸阴性）
吲哚酚乙酸酯水解	阳性——与马尿酸互补确证空肠弯曲菌
H₂S（TSI）	阴性
硝酸盐还原	阳性
脲酶	阴性
微需氧性	专性微需氧——5% O₂ + 10% CO₂ + 85% N₂，大气氧浓度（21%）抑制生长
温度	42°C 生长（嗜热弯曲菌群——区别于胎儿弯曲菌的 25°C 生长/42°C 不生长）
mCCDA 菌落	灰色、扁平、沿划线方向扩散成膜状——"泳动扩散"（swarming motility）

空肠弯曲菌在 mCCDA 上的扩散生长是其单端鞭毛驱动的结果——鞭毛旋转产生的滑动运动使菌落在琼脂表面沿划线方向扩散，形成特征性的灰白色薄膜。这种扩散生长形态在 24–48 h 的培养中逐渐明显——初次分离时容易被经验不足的技术人员误认为污染而忽略。42°C 生长的能力是嗜热弯曲菌群（C. jejuni、C. coli、C. lari）的共同特征——25°C 生长的阴性反应将胎儿弯曲菌排除——在弯曲菌分类鉴定中使用两者作为温度鉴别双指标。

培养条件与微需氧体系

微需氧培养

参数	推荐条件
选择性琼脂	mCCDA（改良木炭-头孢哌酮-去氧胆酸盐琼脂）、Preston 琼脂、Skirrow 琼脂
非选择性琼脂	哥伦比亚血琼脂——用于纯度验证（mCCDA 上弯曲菌的菌落形态不典型）
气体条件	微需氧：5% O₂ + 10% CO₂ + 85% N₂——使用 CampyGen 产气袋（Oxoid CN0025）或三气培养箱
温度	42±1°C（嗜热弯曲菌群——42°C 抑制肠道共生菌群，提高检出率）
培养时间	42–48 h——弯曲菌生长慢，24 h 内菌落极小易漏检

保藏条件

保藏方式	条件	期限
血琼脂斜面（室温）	微需氧罐保存——4°C 冷藏加速死亡	1 周
Brucella 肉汤 + 15% 甘油（-70°C）	冻存管液氮速冻——含 5% 裂解马血	2 年以上
冻干粉（4°C）	原装密封	见 ATCC 检测报告

冻干粉复苏步骤

在生物安全柜中开启冻干粉西林瓶。
用无菌注射器加入 0.3–0.5 mL Brucella 肉汤（含 5% 裂解马血——补充弯曲菌生长必需的血红素），轻轻旋转重悬。
划线至 mCCDA + 血琼脂双平板，立即放入微需氧罐（加入 CampyGen 产气袋或充入 5% O₂ + 10% CO₂ + 85% N₂ 混合气），42±1°C 培养 48 h。
复苏后验证：mCCDA 上扩散膜状生长 + 氧化酶阳性 + 触酶阳性 + 马尿酸盐水解阳性——四项组合确认为空肠弯曲菌。

⚠ 弯曲菌复苏最容易犯的错——气体条件：不要把弯曲菌和厌氧菌混在一起放进厌氧罐！弯曲菌是微需氧——需要 5% O₂——纯厌氧（0% O₂）条件下不生长。CampyGen 袋（Oxoid CN0025）≠ AnaeroGen 袋（Oxoid AN0025）——两者外观相似但产生的气体成分完全不同。若实验室只有厌氧罐，可用烛缸法（candle jar）替代——点燃蜡烛后密闭罐盖，蜡烛熄灭后罐内 O₂ 约为 5–8%、CO₂ 约为 8–12%——可满足弯曲菌生长。

质控应用

禽肉与食品检验——GB 4789.9 / ISO 10272

ATCC 35222 是 GB 4789.9 指定的阳性对照——检验流程为 Bolton 肉汤（含 5% 裂解马血 + 头孢哌酮/万古霉素/两性霉素 B 选择性补充剂）37°C 微需氧预增菌 4 h → 42°C 继续增菌 20–44 h → mCCDA 划线 → 42°C 微需氧 48 h 培养。阳性对照的检出限应 ≤ 10 CFU/25 g 鸡肉——在 Bolton 增菌体系中 35222 的生长不应受头孢哌酮（32 mg/L）抑制。若 35222 阳性对照未生长——排查 Bolton 增菌液的选择性补充剂效价（尤其是头孢哌酮的降解——配制后 4°C 保存 ≤ 7 天）。

微需氧培养体系验证

ATCC 35222 可用于实验室微需氧培养设备的性能验证——每更换一批 CampyGen 产气袋或每次校准三气培养箱后，以 35222 + ATCC 25922（需氧生长阳性对照）+ ATCC 19404（厌氧生长阳性对照）三菌组合做培养环境验证。35222 应在微需氧条件下生长、大气氧条件下不生长（或严重抑制——菌落数下降 > 2 log）；25922 应在微需氧和大气氧下均生长；19404 应仅在厌氧条件下生长。三者的交叉验证可完整评估培养箱/产气袋对不同气体条件需求的满足程度。

常见问题

Q: mCCDA 上扩散生长不明显——是不是菌株退化了？
mCCDA 的水分含量是决定扩散生长形态的关键因素——倾倒后琼脂平板在 37°C 烘箱中半开盖干燥 15–20 min（去除表面多余水分）可明显促进扩散膜状菌落形成。若直接使用刚配制未干燥的 mCCDA——过湿的表面张力抑制鞭毛驱动的滑动运动——菌落呈小而凸起的圆形（类似其他肠杆菌）。干燥后的 mCCDA 应在 1 周内使用——过度干燥导致琼脂收缩后弯曲菌生长受抑。

Q: 35222 的马尿酸盐水解反应很弱——算阳性还是阴性？
使用茚三酮法——将 24 h 血琼脂培养物挑一环悬浮于 0.4 mL 1% 马尿酸钠溶液中，37°C 水浴 2 h 后加入 0.2 mL 3.5% 茚三酮试剂（丙酮:丁醇=1:1），再 37°C 水浴 10 min。阳性呈深紫色——弱紫色（淡紫/浅粉）可能提示：（a）细菌量不足——刮取 2–3 环培养物重试；（b）马尿酸钠溶液过期——苯甲酸钠氧化导致茚三酮非特异性显色减弱。弱阳性应以吲哚酚乙酸酯水解试验辅助确证——若两者均为弱阳性，推荐以 16S rRNA 测序或 MALDI-TOF 鉴定做终极确证。

Q: GB 4789.9 要求 42°C 培养——没有 42°C 培养箱怎么办？
标准规定 42±1°C——常规的 35°C 或 37°C 培养箱不能满足要求。这是弯曲菌检验的标准强制条件——35°C 培养的空肠弯曲菌阳性对照（35222）生长速度会减慢至 42°C 的 30–50%，严重时 48 h 无菌落可见——导致假阴性。实验室若无 42°C 培养箱——替代方案是用水浴培养——将接种后的 mCCDA 平板放入密封袋中，置于 42°C 恒温水浴的浮板上——水浴比空气培养箱的温度均匀性好、散热慢——但需注意密封袋内微需氧气体条件需用 CampyGen 袋维持。

订购信息

产品名称	空肠弯曲菌标准菌株
拉丁名	Campylobacter jejuni subsp. jejuni
保藏中心编号	ATCC 35222
参考信息	马尿酸阳性 / 42°C 生长 / GB 4789.9/ISO 10272 阳性对照
产品形式	冻干粉（0 代原装），附 ATCC 检测报告
存储条件	2–8°C 避光保存

如需批量订购或技术咨询，请联系杭州康氧医疗器械有限公司。

参考资料

GB 4789.9-2014《食品安全国家标准食品微生物学检验空肠弯曲菌检验》
ISO 10272-1:2017 Horizontal method for detection of Campylobacter spp.
ATCC 官网：Campylobacter jejuni 35222 产品页与检测报告（COA）
Nachamkin I et al. (2008): Campylobacter — Chapter in Manual of Clinical Microbiology (ASM Press)
Park SF (2002): The physiology of Campylobacter species and its relevance to their role as foodborne pathogens — International Journal of Food Microbiology
Bolton FJ & Robertson L (1982): A selective medium for isolating Campylobacter jejuni/coli — Journal of Clinical Pathology

技术免责声明：本文技术参数来源于公开发表的 ATCC 官方产品信息及相关标准文件，仅供实验室专业人员参考。杭州康氧医疗器械有限公司对因使用本文信息产生的任何后果不承担责任。如需技术咨询或产品订购，请联系杭州康氧医疗器械有限公司。

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微需氧培养

保藏条件

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禽肉与食品检验——GB 4789.9 / ISO 10272

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