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ATCC 27562 长双歧杆菌 Bifidobacterium longum 标准菌株

简要描述：ATCC 27562 长双歧杆菌益生菌参考株。杭州康氧ATCC 0代原装供应。...

更新时间：2026-08-07 10:41:54
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ATCC 27562 长双歧杆菌 Bifidobacterium longum 标准菌株

ATCC 27562 长双歧杆菌益生菌参考株。杭州康氧ATCC 0代原装供应。

货期

3-7 周

规格

冻干粉 · 1 支/管

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ATCC标准菌株

详细介绍

菌株来源与保藏信息

ATCC 27562（Bifidobacterium longum subsp. longum）是从健康成人粪便中分离的长双歧杆菌参考菌株，BSL-1。长双歧杆菌是成人肠道微生物群中最丰富的双歧杆菌物种之一——占双歧杆菌群落的 30-60%——也是最早定植于母乳喂养新生儿肠道的双歧杆菌之一（出生后 3-5 天即可从胎粪中分离）。该菌通过"果糖-6-磷酸磷酸酮酶途径"（F6PPK——又称双歧分流）将葡萄糖发酵为乙酸和乳酸（摩尔比约 3:2）——乙酸的抑菌作用（降低肠道 pH 至 5.0-5.5）和免疫调节功能（刺激肠道 IgA 分泌、诱导调节性 T 细胞分化）是长双歧杆菌发挥益生功能的主要机制。

杭州康氧以 ATCC 原装 0 代冻干粉形式提供，附 ATCC 检测报告（COA），含批号信息。

生物学特性

特征	ATCC 27562 表现
革兰染色	阳性——不规则分枝杆状——V/Y 形末端膨大排列——陈旧培养中变为球杆状
触酶	阴性——但部分双歧杆菌含假触酶——H₂O₂ 弱阳性（缓慢性冒泡）
代谢特征	F6PPK 途径（双歧分流）——葡萄糖发酵为乙酸+乳酸（3:2）——不产 CO₂
F6PPK 活性	阳性——双歧杆菌属鉴定的酶学金标准
氧需求	专性厌氧——大气条件（21%O₂）下不生长——但部分菌株有中等耐氧性（<5%O₂）
最适 pH	6.5-7.0——pH<4.5 或 >8.5 不生长
最适温度	37°C——42°C 不生长（区别于粪肠球菌和部分乳酸菌）
菌落形态	MRS+半胱氨酸琼脂厌氧 37°C 48h——针尖至 0.5mm 乳白圆形光滑小菌落
糖发酵谱	阿拉伯糖、木糖、核糖阳性（B. longum 特征）——区别于 B. breve（阿拉伯糖/木糖阴性）

长双歧杆菌的"双歧分流"代谢途径是该属区别于乳酸菌属（Lactobacillus）的最根本生化特征——乳酸菌通过 Embden-Meyerhof-Parnas（EMP）途径将葡萄糖转化为几乎纯粹的乳酸（同型发酵），而双歧杆菌通过 F6PPK 途径生产摩尔比 3:2 的乙酸和乳酸混合物——这一差异导致两种益生菌在肠道中发挥截然不同的短链脂肪酸谱和 pH 调节效应。F6PPK 酶的检测（使用果糖-6-磷酸作为底物——通过乙酰磷酸的羟肟酸铁比色法定量）是双歧杆菌属最权威的酶学鉴定方法。

培养条件与保藏

参数	推荐条件
固体培养基	MRS 琼脂 + 0.05% L-半胱氨酸盐酸盐（还原剂）+ 0.5% 葡萄糖
液体培养基	MRS 肉汤 + 0.05% 半胱氨酸——使用前煮沸驱氧至刃天青变无色
选择性培养基	BSM 琼脂（双歧杆菌选择性——含莫匹罗星或锂-丙酸钠作为选择剂）
气体	严格厌氧：85%N₂+10%H₂+5%CO₂——厌氧罐（GasPak）+ 厌氧指示条
温度	37°C
时间	48h（平板上菌落达 0.5-1mm 可计数）

⚠ 厌氧关键——双歧杆菌的氧敏感性：长双歧杆菌自身不表达完整的活性氧清除系统（超氧化物歧化酶 SOD 活性极低或无，无触酶——虽有假触酶但无法有效清除 H₂O₂）。在大气条件下暴露 >1h 即发生不可逆的氧化损伤——细胞膜脂质过氧化→膜通透性丧失→细胞死亡。所有复苏和传代操作应在厌氧工作站或充氮手套箱中完成。若无双歧杆菌专用设备——在厌氧罐中使用 GasPak EZ 厌氧产气袋+厌氧指示条（美蓝——无色=厌氧——蓝色=漏气）。不可使用 CO₂ 产气袋（5-10%CO₂ 环境对双歧杆菌并非厌氧！——残余 O₂ 高达 15%）。

保藏条件

保藏方式	条件	存活期限
MRS+半胱氨酸深层穿刺（4°C）	石蜡封层——隔绝氧气	2-4 周
MRS+半胱氨酸+20% 甘油（-70°C）	冻存管——厌氧制备后液氮速冻	2 年以上
冻干粉（4°C）	原装密封西林瓶（真空包装）	见 ATCC 检测报告

冻干粉复苏步骤

在厌氧工作站中开启冻干粉西林瓶——将厌氧工作站提前平衡至无氧状态（O₂<0.1%——使用氧气分析仪验证）。
用无菌注射器加入 0.3-0.5 mL 预还原的 MRS+半胱氨酸肉汤（煮沸驱氧至刃天青无色后冷却至 37°C 使用）。
轻轻旋转重悬——避免振荡产生气泡引入微量氧。
转移至预还原的 MRS+半胱氨酸琼脂平板——37°C 厌氧孵育 48h。
复苏成功后——F6PPK 酶活性检测确认为双歧杆菌属——接种 API 50CHL 糖发酵管——确认糖谱与长双歧杆菌一致。
MRS+半胱氨酸+20% 甘油 -70°C 冻存。

益生菌产品活菌计数与物种确证

益生菌产品的长双歧杆菌活菌计数方法学验证

FAO/WHO 益生菌评价指南要求益生菌产品标签上声明的活菌数应在保质期内达到 ≥10⁶-10⁸ CFU/g 或 CFU/mL 的水平。ATCC 27562 作为长双歧杆菌的代表株——用于益生菌产品（胶囊、粉剂、发酵乳制品）中双歧杆菌活菌计数方法的验证。标准流程：样品在 MRS+半胱氨酸琼脂上做梯度稀释——厌氧 37°C 48h 计数——同时用 BSM 选择性琼脂作为平行对照——鉴别长双歧杆菌与其他益生菌（如嗜酸乳杆菌 14917）的菌落总数差异。

16S rRNA 基因测序与 MALDI-TOF MS 鉴定

在益生菌产品的物种级确证中——表型鉴定（API 50CHL 糖发酵谱和 F6PPK 酶检测）为属级——物种级确证需补充 16S rRNA 基因 V1-V3 或 V3-V4 区的 Sanger 测序或全基因组测序。MALDI-TOF MS（Bruker Biotyper 或 VITEK MS）在更新数据库后可对长双歧杆菌进行物种级鉴定——但双歧杆菌属内的物种分辨率低于肠杆菌科——部分近缘种可能产生 2.0-2.3 的交叉评分——需以 16S rRNA 测序作为仲裁方法。

常见问题

Q: 厌氧罐培养 48h 仍无菌落——是不是菌株失活了？
三步排查：① 检查厌氧指示条（美蓝）——若呈蓝色说明厌氧罐漏气——O₂>0.5% 即可抑制双歧杆菌生长。② MRS 肉汤是否添加了半胱氨酸——未添加还原剂的 MRS 的氧化还原电位约 +150mV——双歧杆菌只能在 <-100mV 环境中生长——0.05% L-半胱氨酸可将 Eh 降至约 -300mV。③ 培养基是否过量灭菌——121°C 超过 20min 导致半胱氨酸氧化失效——颜色变黄——重新配制。

Q: 益生菌产品中的双歧杆菌活菌数在保质期内急剧下降——什么原因？
双歧杆菌在常温（25°C）含水环境中的存活率极差——半衰期仅 2-5 天。益生菌产品中活菌数急剧下降的常见原因：① 产品含水量（水活度 aw）>0.25——水分促进了氧化应激和膜脂过氧化。② 胶囊或粉剂中含有的其他成分（如果汁粉中的柠檬酸）使局部 pH 降至 <4.0——双歧杆菌不耐强酸。③ 储存温度 >25°C——每升高 10°C 双歧杆菌的失活速率约增加 3-5 倍。提高稳定性方案：冻干保护剂中加入海藻糖（5%）+ 脱脂乳粉（10%）——可显著提高常温和 37°C 加速试验中的存活率。

订购信息

产品名称	长双歧杆菌标准菌株 ATCC 27562
拉丁名	Bifidobacterium longum subsp. longum
保藏中心编号	ATCC 27562
代谢特征	F6PPK 阳性——双歧分流——乙酸:乳酸=3:2
产品形式	冻干粉（0代原装），附 ATCC 检测报告
存储条件	2-8°C 避光保存——厌氧或真空包装

如需批量订购或技术咨询，请联系杭州康氧医疗器械有限公司。

技术免责声明：本文技术参数来源于公开发表的 ATCC 官方产品信息、FAO/WHO 益生菌评价指南及相关文献，仅供实验室专业人员参考。杭州康氧医疗器械有限公司对因使用本文信息产生的任何后果不承担责任。如需技术咨询或产品订购，请联系杭州康氧医疗器械有限公司。

参考资料

ATCC 官网：Bifidobacterium longum 27562 产品页与检测报告（COA）
FAO/WHO (2002): Guidelines for the Evaluation of Probiotics in Food
Ventura M et al. (2007): Genomics of Bifidobacterium——analysis of F6PPK pathway evolution
de Vries W & Stouthamer AH (1967): Pathway of glucose fermentation in relation to the taxonomy of bifidobacteria（F6PPK 原始文献）
Biavati B & Mattarelli P (2012): Bifidobacterium——from the human gut to probiotic applications
Charteris WP et al. (1998): Effect of conjugated bile salts on antibiotic susceptibility of bile salt-tolerant Lactobacillus and Bifidobacterium isolates

ATCC 14917 嗜酸乳杆菌 Lactobacillus acidophilus 标准菌株

ATCC 35222 空肠弯曲菌 Campylobacter jejuni 标准菌株

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ATCC 27562 长双歧杆菌 Bifidobacterium longum 标准菌株

ATCC 27562 长双歧杆菌 Bifidobacterium longum 标准菌株

保藏条件

冻干粉复苏步骤

益生菌产品的长双歧杆菌活菌计数方法学验证

16S rRNA 基因测序与 MALDI-TOF MS 鉴定

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