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ATCC 43598 艰难梭菌 Clostridioides difficile 标准菌株
ATCC 43598 艰难梭菌产毒株tcdA+/tcdB+，消毒剂杀芽孢参考株。杭州康氧ATCC 0代原装供应。
✓ ATCC 原装 0 代
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✓ 技术支持
菌株来源与保藏信息
艰难梭菌 ATCC 43598（Clostridioides difficile — 曾用名 Clostridium difficile）是 ATCC 保藏的一株产毒艰难梭菌参考菌株，BSL-2。该菌株产毒素 A（TcdA）和毒素 B（TcdB）——艰难梭菌感染的主要致病因子。ATCC 43598 在消毒剂评价中作为耐抗生素相关腹泻病原菌的代表菌株——其芽孢对医院环境常规消毒剂（季铵盐类和双胍类）的耐受性显著高于营养细胞——是评估消毒剂对艰难梭菌芽孢杀灭效力的关键参考菌株。在艰难梭菌核酸检测（PCR方法）的阳性对照中——43598 的 tcdA⁺/tcdB⁺ 基因型提供 tcdA/tcdB 双重 PCR 靶标的阳性信号。
杭州康氧以 ATCC 原装 0 代冻干粉形式提供，附 ATCC 检测报告（COA），含批号信息。
生物学特性
| 特征 | ATCC 43598 表现 |
|---|---|
| 革兰染色 | 阳性杆菌——芽孢次端生、芽孢囊膨大 |
| 厌氧性 | 专性厌氧 |
| 毒素A/B | 阳性——PCR tcdA⁺ tcdB⁺ |
| 卵磷脂酶 | 阴性——区别于产气荚膜梭菌 |
| 马尿酸盐水解 | 阴性 |
| CCFA菌落 | 黄色毛玻璃样菌落——马粪气味（对甲酚） |
| 芽孢耐消毒性 | 对醇类和季铵盐耐受——仅含氯消毒剂、过氧化物和醛类有效 |
培养条件与保藏
| 参数 | 推荐条件 |
|---|---|
| 选择性琼脂 | CCFA（环丝氨酸-头孢西丁-果糖琼脂）——黄色毛玻璃样菌落 |
| 液体培养基 | BHI肉汤（预还原）、FTM |
| 温度 | 35-37°C 厌氧培养 24-48h |
保藏条件
| 保藏方式 | 条件 | 期限 |
|---|---|---|
| CCFA斜面(4°C) | 厌氧罐 | 1-2月 |
| BHI+15%甘油(-70°C) | 冻存管厌氧分装 | 2年以上 |
| 冻干粉(4°C) | 原装密封 | 见ATCC检测报告 |
- 在厌氧工作站中快速操作——空气暴露<5min。
- 加入0.3-0.5mL预还原BHI——旋转重悬。
- 划线至CCFA+血琼脂——35-37°C厌氧培养48h。
- 复苏后验证：CCFA上黄色毛玻璃样菌落+马粪气味+PCR tcdA⁺/tcdB⁺。
质控应用
艰难梭菌消毒剂杀芽孢评价
艰难梭菌芽孢是医院环境中最难灭活的病原体芽孢之一——对醇类手消毒剂（60-80%乙醇/异丙醇）完全无效——仅含氯消毒剂（次氯酸钠 1000-5000 ppm）、过氧化氢（3-7.5%）和过氧乙酸可有效杀灭。在美国 CDC 和英国 NHS 的 CDI 防控指南中——43598 芽孢用于验证环境表面消毒剂对艰难梭菌芽孢的杀灭效力。
常见问题
Q: 43598为什么对醇类消毒剂耐受？
艰难梭菌芽孢的外壁（exosporium）由疏水性蛋白和糖蛋白构成——乙醇难以渗透进入芽孢核心——且乙醇不影响芽孢的DPA-Ca²⁺螯合物（芽孢热抵抗的核心分子）。仅氧化性消毒剂（次氯酸、过氧化氢）可破坏芽孢外壁蛋白交联——使消毒剂渗入芽孢核心。醇类手消毒剂对CDI预防完全无效——接触CDI患者后必须使用肥皂和水洗手（机械去除芽孢）。
Q: CCFA上43598菌落不够典型？
CCFA的果糖发酵产酸使溴甲酚紫指示剂由紫色转黄色——但需要在厌氧环境下孵育至少48h。若24h内观察——菌落仍呈无色——延长至48-72h黄色才可形成。CCFA中的头孢西丁(16mg/L)和环丝氨酸(500mg/L)对艰难梭菌的选择性取决于培养基的pH——pH>7.0时选择性下降——配制后pH应严格调至7.0±0.1。
Q: 43598用于PCR阳性对照时Ct值偏高怎么办？
艰难梭菌的DNA提取需要额外的溶菌酶和蛋白酶K处理——芽孢的细胞壁和芽孢皮层阻碍常规DNA提取。推荐的提取方案：菌体沉渣重悬于TE缓冲液——加入溶菌酶(20mg/mL) 37°C 30min——再加入蛋白酶K(2mg/mL) 56°C 30min——然后标准的苯酚-氯仿提取。若使用商业提取试剂盒——优先选用含研磨珠的"革兰阳性菌+真菌"提取方案。
订购信息
| 产品名称 | 艰难梭菌标准菌株（产毒株） |
|---|---|
| 拉丁名 | Clostridioides difficile |
| 保藏中心编号 | ATCC 43598 |
| 参考信息 | tcdA⁺ tcdB⁺/艰难梭菌消毒剂杀芽孢参考株 |
| 产品形式 | 冻干粉（0代原装），附ATCC检测报告 |
| 存储条件 | 2-8°C避光保存 |
如需批量订购或技术咨询，请联系杭州康氧医疗器械有限公司。
参考资料
- CDC (2018): Guideline for Disinfection and Sterilization in Healthcare Facilities
- ATCC官网：C. difficile 43598产品页与检测报告(COA)
- Voth DE & Ballard JD (2005): C. difficile toxins — Clinical Microbiology Reviews
- Wilcox MH et al. (2003): Comparison of the effect of detergent versus hypochlorite cleaning on environmental contamination and incidence of C. difficile infection — Journal of Hospital Infection
- Lawley TD et al. (2009): Proteomic and genomic characterization of C. difficile spores — Journal of Bacteriology
技术免责声明：本文技术参数来源于公开发表的ATCC官方产品信息及相关标准文件，仅供实验室专业人员参考。杭州康氧医疗器械有限公司对因使用本文信息产生的任何后果不承担责任。如需技术咨询或产品订购，请联系杭州康氧医疗器械有限公司。
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