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ATCC 49247 流感嗜血杆菌 Haemophilus influenzae NTHi 标准株

简要描述：ATCC 49247 流感嗜血杆菌NTHi（TEM-1+），CLSI苛养菌药敏QC株。杭州康氧ATCC 0代原装供应。...

更新时间：2026-08-08 14:16:11
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ATCC 49247 流感嗜血杆菌 Haemophilus influenzae NTHi 标准株

ATCC 49247 流感嗜血杆菌NTHi（TEM-1+），CLSI苛养菌药敏QC株。杭州康氧ATCC 0代原装供应。

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3-7 周

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ATCC标准菌株

详细介绍

菌株来源与保藏信息

流感嗜血杆菌标准株 ATCC 49247（Haemophilus influenzae）是 ATCC 保藏的经典苛养菌药敏质控参考株，BSL-2。49247 属于无荚膜不可分型流感嗜血杆菌（NTHi——non-typeable H. influenzae）——不产生荚膜多糖抗原（a~f 血清型阴性）——代表社区获得性呼吸道感染中最常见的流感嗜血杆菌类型。ATCC 49247 是CLSI M100 指定苛养菌药敏试验质控菌株——需在含 X 因子（血红素）和 V 因子（NAD）的培养基（HTM——Haemophilus Test Medium）上进行药敏试验。49247 以冻干粉（0 代原装）形式提供，附 ATCC 检测报告（COA），含批号信息。

杭州康氧以 ATCC 原装 0 代冻干粉形式提供，适用于 CLSI 苛养菌药敏质控、HTM/巧克力琼脂培养基批次验证及流感嗜血杆菌 β-内酰胺酶检测阳性质控。

生物学特性

特征	ATCC 49247（NTHi）
革兰染色	阴性小球杆菌——多形性（球杆状至长丝状）
生长因子需求	X 因子（血红素/hematin）+ V 因子（NAD）双依赖
荚膜	无荚膜（不可分型——a~f 血清阴性）
氧化酶	阳性（区别于肠杆菌科——但弱于铜绿假单胞菌）
触酶	阳性（弱）
β-内酰胺酶	阳性（TEM-1 型——氨苄西林耐药）
卟啉试验	阴性（需要外源血红素——不能自身合成卟啉）
卫星现象	T SA 上围绕金葡菌菌落出现卫星生长
CO₂ 需求	5% CO₂ 促进生长（烛缸法或 CO₂ 培养箱）

ATCC 49247 的 X+V 双因子依赖是鉴定流感嗜血杆菌最关键的生化特征。在 TSA 上不生长（无 X+V 因子）；在巧克力琼脂上生长良好（巧克力化过程裂解红细胞释放 X+V 因子）；在血琼脂上仅围绕金黄色葡萄球菌菌落生长（卫星现象——金葡菌溶血释放 V 因子）。49247 的 TEM-1 β-内酰胺酶使其对氨苄西林和阿莫西林天然耐药——CLSI 推荐对临床分离株常规检测 β-内酰胺酶（头孢硝噻吩纸片法），49247 可作为 β-内酰胺酶阳性质控。

培养条件与保藏

参数	推荐条件
固体培养基	巧克力琼脂、HTM 琼脂（药敏试验）、血琼脂+金葡菌划线（卫星试验）
液体培养基	HTM 肉汤（药敏）、BHI + 5% Fildes 增菌液
温度	35 ± 2°C
CO₂	5% CO₂（烛缸法或 CO₂ 培养箱）
培养时间	18~24 h

冻干粉复苏步骤

在生物安全柜中开启冻干粉西林瓶。
用无菌注射器加入 0.3~0.5 mL BHI 肉汤（含 5% Fildes 增菌液），轻轻旋转重悬。
转移至巧克力琼脂平板，35 ± 2°C、5% CO₂ 孵育 18~24 h。
复苏后在 HTM 琼脂上验证生长——在无 X+V 因子的 TSA 上划线验证不生长（确认无杂菌污染）。

⚠ 培养关键：①巧克力琼脂制备时需在 80°C 加热 10~15 min 至颜色变为巧克力色（裂解红细胞释放 X+V 因子）——温度过高（>90°C）或加热时间过长破坏 V 因子（NAD 热不稳定）——导致 49247 不生长或生长极差；②HTM 培养基中的酵母提取物提供 V 因子前体——不同品牌酵母提取物的 V 因子含量差异可达 5 倍——导致 49247 在不同批次 HTM 上的生长差异——推荐使用 Mueller-Hinton 巧克力琼脂作为生长对照。

保藏条件

保藏方式	条件	期限
斜面(4C)	封口膜密封	1-2月
15%甘油(-70C)	冻存管液氮速冻	2年+
冻干粉(4C)	原装密封	见ATCC检测报告

质控应用

CLSI M100——苛养菌药敏质控

ATCC 49247 是 CLSI M100 指定的流感嗜血杆菌药敏试验质控菌株——与 ATCC 49619（肺炎链球菌苛养菌 QC）和 ATCC 27370（NTHi 无 β-内酰胺酶）共同构成苛养菌药敏质控三重组合。49247 的 β-内酰胺酶阳性表型使其在氨苄西林药敏中显示耐药——验证 HTM 培养基批次时氨苄西林 MIC 应 ≥ 4 mg/L（耐药——CLSI 折点 ≤ 1 mg/L 敏感）——同时阿莫西林-克拉维酸应恢复敏感（克拉维酸抑制 TEM-1）。

巧克力琼脂/HTM 培养基批次验证

49247 对培养基中 X+V 因子的浓度高度敏感——是巧克力琼脂和 HTM 培养基批次放行的金标准菌株。每批新制备的巧克力琼脂应以 49247 划线——35°C 5% CO₂ 18~24 h 后菌落直径应 ≥ 1.0 mm——若菌落极小（< 0.5 mm）或 24 h 不生长——排查巧克力化温度是否过高（V 因子破坏）或血源是否更换（不同来源红细胞裂解后 V 因子释放量不同）。

常见问题

Q: 49247 在血琼脂上为什么不生长？
正常——血琼脂中的红细胞未裂解——X 和 V 因子被封闭在红细胞内无法释放。流感嗜血杆菌在未裂解血琼脂上仅围绕产溶血素的金葡菌菌落出现卫星生长。若需在血琼脂上生长——须使用巧克力琼脂（加热裂解红细胞）。

Q: 49247 和 27370 都是 NTHi——怎么选？
49247 为β-内酰胺酶阳性（TEM-1）——适合氨苄西林耐药的阳性质控；27370 为β-内酰胺酶阴性——适合氨苄西林敏感质控及基础苛养菌培养基验证。二者配对构成流感嗜血杆菌药敏质控的完整组合。

Q: HTM 上 49247 生长差——可能原因？
①HTM 琼脂的 pH 值——流感嗜血杆菌最适 pH 7.2~7.4——pH < 7.0 生长抑制；②酵母提取物的 V 因子含量——不同品牌差异大——推荐验证新批次 HTM 后锁定品牌；③CO₂浓度——< 3% 生长显著减慢。

订购信息

产品名称	流感嗜血杆菌标准株（NTHi，β-内酰胺酶阳性）
拉丁名	Haemophilus influenzae
保藏中心编号	ATCC 49247
参考信息	NTHi / TEM-1 β-内酰胺酶阳性 / CLSI 苛养菌 QC
产品形式	冻干粉（0 代原装），附 ATCC 检测报告（COA），含批号信息
存储条件	2~8°C 避光保存

如需批量订购或技术咨询，请联系杭州康氧医疗器械有限公司。

技术免责声明：本文技术参数来源于公开发表的 CLSI M100 标准、ATCC 官方产品信息及相关文献，仅供实验室专业人员参考。杭州康氧医疗器械有限公司对因使用本文信息产生的任何后果不承担责任。如需技术咨询或产品订购，请联系杭州康氧医疗器械有限公司。

参考资料

ATCC 官网：Haemophilus influenzae 49247 产品页与 COA
CLSI M100: Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing，现行版本
CLSI M45: Methods for Antimicrobial Dilution and Disk Susceptibility Testing of Infrequently Isolated Bacteria
Dabernat H et al. (1998): Haemophilus influenzae beta-lactamase detection methods
ATCC product information: Chocolate agar and HTM quality control

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冻干粉复苏步骤

保藏条件

CLSI M100——苛养菌药敏质控

巧克力琼脂/HTM 培养基批次验证

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