菌株来源与保藏信息
宋内志贺菌 ATCC 13076（Shigella sonnei (Levine) Weldin）是 ATCC 保藏的一株 D 群志贺菌标准菌株，BSL-2。该菌株最初从急性菌痢患者粪便中分离，其血清型为 Sonnei（O 抗原为 D 群形式 I 和形式 II），是全球发达国家中最常见的志贺菌血清型。ATCC 13076 在食品微生物检验、药品控制菌检查和消毒剂评价中均被指定为标准阳性对照菌株。
杭州康氧以 ATCC 原装 0 代冻干粉形式提供，附 ATCC 检测报告（COA），含批号信息。BSL-2 操作。
生物学特性
| 特征 | ATCC 13076 表现 |
|---|
| 革兰染色 | 阴性短杆菌 |
| 运动性 | 阴性（与沙门菌和大肠埃希菌的关键区分） |
| 乳糖发酵 | 阴性（MacConkey 上无色菌落——与大肠埃希菌重要区分） |
| TSI 反应 | 碱/酸，不产 H₂S，不产气（区别于沙门菌和变形杆菌） |
| 赖氨酸脱羧酶 | 阴性（区别于沙门菌属） |
| 吲哚 | 阴性 |
| XLD 琼脂 | 红色菌落（不产 H₂S——与沙门菌的黑色中心关键区分） |
| HE 琼脂 | 绿色菌落（不产 H₂S） |
| 血清型 | D 群 Sonnei（O 抗原形式 I + 形式 II） |
志贺菌属是无动力（区别于沙门菌）、赖氨酸脱羧酶阴性（区别于大肠埃希菌和沙门菌）、H2S 阴性——宋内志贺菌偶见极弱 H2S，使用新鲜配制不超过 24h 的 XLD 平板可抑制假阳性。乳糖迟发酵型——24h 为无色菌落，48-72h 因乳糖渗透酶诱导可能转为浅粉色（与大肠埃希菌快速粉红相区别）。宋内志贺菌 O 抗原为单一 I 相抗原——在人工培养基上传代过程中，O 抗原合成基因簇（rfb 位点）可能因 IS 元件插入而失活，导致菌落由 S 型变为 R 型并丧失血清凝集能力。因此推荐从冻干粉复苏后不超过 5 代即用于血清学分型。
食品与水微生物检验
饮用水检验中的指示菌
ATCC 13076 在 GB 5749-2022《生活饮用水卫生标准》和 GB/T 5750.12《生活饮用水标准检验方法 微生物指标》中被指定为志贺菌检验的阳性对照菌株。饮用水不得检出志贺菌——阴性结果的有效性依赖于阳性对照菌株 ATCC 13076 在同一批次培养基和培养条件下是否成功生长。
与 ATCC 14028 的分工
| 特征 | ATCC 13076（志贺菌） | ATCC 14028（沙门菌） |
|---|
| 运动性 | 阴性 | 阳性 |
| H₂S 产生 | 阴性 | 阳性 |
| 乳糖 | 阴性 | 阴性 |
| 应用 | 饮用水+食品检验 | 药品+食品+消毒剂评价 |
常见问题
Q: 血清学凝集阴性但生化鉴定符合志贺菌属——怎么办？
宋内志贺菌的 O 抗原在传代超过 5 次或培养超过 48h 后可能发生 S→R 相变异——R 型菌落粗糙、与抗 O 血清不凝集。解决方案：使用 13076 的新鲜冻干粉重新复苏（最可靠）；在无法完成血清学分型的情况下，补充分子鉴定——ipaH 基因 PCR（志贺菌属和 EIEC 共有侵袭性质粒抗原基因）或 16S rRNA 基因测序，与血清学分型结果同等有效。
Q: GN 肉汤增菌后回收率不稳定怎么办？
GN 肉汤中的脱氧胆酸钠和柠檬酸钠对志贺菌有抑制作用。提高回收率方案：将 GN 肉汤增菌时间从 6-8h 缩短至 4-6h；增菌后同时接种 XLD 和 MacConkey 琼脂；若样品含消毒剂残留，增菌前加入 0.1% 吐温 80+0.3% 卵磷脂作为中和剂。
订购信息
| 产品名称 | 宋内志贺菌标准菌株 ATCC 13076 |
|---|
| 拉丁名 | Shigella sonnei (Levine) Weldin |
|---|
| 保藏中心编号 | ATCC 13076 |
|---|
| 产品形式 | 冻干粉（0 代原装），附 ATCC 检测报告（COA） |
|---|
| 供应商 | 杭州康氧医疗器械有限公司 |
|---|
技术免责声明：本文技术参数来源于公开发表的 ATCC 官方产品信息、GB 5749 和 GB/T 5750 系列现行标准，仅供实验室专业人员参考。志贺菌属为 BSL-2 级病原微生物——经口摄入仅 10-100 个菌体即可导致细菌性痢疾，操作时应严格遵循实验室生物安全规范。在实际饮用水和食品检验中，培养基品牌、孵育温度和经验性抗生素使用等因素可能影响志贺菌的分离率，请结合实验室内部质量控制方案验证方法性能。杭州康氧医疗器械有限公司对因使用本文信息产生的任何后果不承担责任。如需技术咨询或产品订购，请联系杭州康氧医疗器械有限公司。
培养条件与保藏
| 参数 | 推荐条件 |
|---|
| 固体培养基 | TSA, MacConkey(无色菌落), XLD(红色菌落弱H2S), HE琼脂 |
| 液体培养基 | TSB, GN肉汤 |
| 温度 | 35+/-2C |
| 时间 | 18-24h |
复活注意: 志贺菌属环境存活弱于沙门菌，对干燥和低温敏感。工作斜面4C不超1周，中长期用15%甘油TSB -70C冻存。
保藏条件
| 保藏方式 | 条件 | 存活期限 |
|---|
| TSA 斜面（4°C） | 封口膜密封，冷藏 | 不超过 1 周（志贺菌冷藏活性下降快） |
| TSB+15% 甘油（-70°C） | 冻存管，液氮速冻后转 -70°C | 1-2 年 |
| 冻干粉（4°C） | 原装密封西林瓶 | 见 ATCC COA 标注有效期 |
消毒剂与补充应用
食品工业消毒剂评价
在食品加工环境消毒剂评价中，ATCC 13076作为革兰阴性肠道致病菌代表被纳入补充菌株。与沙门菌相比，志贺菌的耐酸系统(Gad谷氨酸脱羧酶)使其在pH 2.5-3.5的酸性环境中存活能力强于沙门菌——含有机酸的消毒剂配方须验证对13076的有效性，不可仅以沙门菌数据外推。
ATCC 13076 vs ATCC 14028 区分表
| 特征 | 13076志贺菌 | 14028沙门菌 |
|---|
| 运动性 | 阴性 | 阳性 |
| H2S | 阴性/极弱 | 强阳性 |
| 赖氨酸脱羧酶 | 阴性 | 阳性 |
| 应用侧重 | 饮用水+食品 | 药品+食品+消毒剂 |
常见问题
Q: XLD上13076产生黑色中心是沙门菌污染吗？
宋内志贺菌偶尔可产生弱H2S（浅棕色），远弱于沙门菌深黑色。怀疑时补充TSI和赖氨酸脱羧酶：志贺菌阴性，沙门菌阳性。
Q: 饮用水检验中如何确证志贺菌阳性？
生化鉴定+血清学分型。仅生化鉴定不做到血清学分型不属于GB/T 5750.12规定的完整确证流程。建议实验室配备志贺菌多价(AD群)和单价抗血清，并每年用人源质控血清验证凝集试验的灵敏度和特异性。
冻干粉复苏步骤
- 在 BSL-2 生物安全柜中操作——志贺菌属感染剂量极低（10-100 CFU）。
- 用无菌注射器向冻干粉西林瓶中加入 0.3-0.5 mL TSB，轻轻旋转重悬——勿剧烈振荡，志贺菌在液体中对剪切力敏感。
- 将菌悬液全部转移至 TSA 平板和 MacConkey 琼脂——MacConkey 上 13076 应呈无色半透明菌落。如果 24h 内出现深粉色菌落，提示大肠埃希菌污染——废弃并从备份冻干粉重新复苏。
- 35±2°C 孵育 18-24h。
- 复苏成功后挑取单菌落做氧化酶试验（阴性）、TSI 穿刺（碱/酸、不产气、无 H2S）和赖氨酸脱羧酶（阴性）——三项均符合志贺菌属特征方可确认复苏纯度。
- 工作菌种斜面 4°C 保存不超过 1 周。
增菌注意事项：GN 肉汤中的脱氧胆酸钠和柠檬酸钠对志贺菌本身有抑制作用——这是该培养基的固有矛盾。提高回收率方案：将 GN 肉汤增菌时间从 6-8h 缩短至 4-6h；增菌后同时接种 XLD 和 MacConkey 琼脂；若样品含消毒剂残留，增菌前加入 0.1% 吐温 80+0.3% 卵磷脂作为中和剂。
参考资料
- ATCC 官网：Shigella sonnei 13076 产品页与检测报告（COA）
- GB 5749-2022《生活饮用水卫生标准》微生物指标
- GB/T 5750.12-2023《生活饮用水标准检验方法 第12部分：微生物指标》
- GB 4789.5-2012《食品安全国家标准 食品微生物学检验 志贺氏菌检验》
- ISO 21567:2004 Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal method for the detection of Shigella spp.
- 《化妆品安全技术规范》2015年版 微生物检验方法
服务热线： 
