菌株来源与保藏信息
粪肠球菌标准株 ATCC 33186(Enterococcus faecalis)是 ATCC 保藏的氨基糖苷类敏感株(HLAR 阴性),BSL-1。33186 不含 aac(6')-Ie-aph(2'')-Ia 双功能酶基因——对庆大霉素(MIC ≤ 500 mg/L)和链霉素(MIC ≤ 1,000 mg/L)保持敏感——是 CLSI M100 推荐的肠球菌 HLAR 筛选阴性对照菌株。33186 与 51299(HLAR 阳性——庆大霉素/链霉素高水平耐药)配对——构成 HLAR 筛选试验的完整敏感/耐药对照组合。33186 以冻干粉形式提供,附 ATCC 检测报告(COA)。
杭州康氧以 ATCC 原装冻干粉形式提供,适用于 CLSI 肠球菌 HLAR 筛选阴性对照及氨基糖苷类药敏 QC。
生物学特性
| 特征 | ATCC 33186 |
| 革兰染色 | 阳性球菌——成对或短链 |
| PYR | 阳性 |
| 胆汁七叶苷 | 阳性——黑色 |
| 6.5% NaCl | 阳性——肠球菌属特征 |
| 庆大霉素 120μg | 抑菌圈 ≥ 10 mm(敏感——HLAR 阴性) |
| 链霉素 300μg | 抑菌圈 ≥ 10 mm(敏感) |
| 万古霉素 | 敏感——MIC 1~4 mg/L(VSE) |
| 溶血性 | γ 溶血(不溶血) |
肠球菌对氨基糖苷类存在天然低水平耐药(细胞壁通透性降低——庆大霉素 MIC 8~64 mg/L)——常规 10 μg 庆大霉素纸片对所有肠球菌均显示耐药。仅当菌株获得 aac(6')-Ie-aph(2'')-Ia 等高水平修饰酶时才表现 HLAR(120 μg 纸片无抑菌圈)。33186 不携带这些修饰酶基因——120 μg 纸片产生清晰抑菌圈——是验证每批 HLAR 筛选纸片的敏感对照。
培养条件与保藏
| 参数 | 条件 |
|---|
| 固体培养基 | TSA、血琼脂、BHI |
| 液体培养基 | TSB、BHI、CAMHB(药敏) |
| 温度 | 35 ± 2°C |
| 培养时间 | 18~24 h |
保藏条件
| 保藏方式 | 条件 | 期限 |
|---|
| TSA斜面(4C) | 封口膜密封 | 1-2月 |
| TSB+15%甘油(-70C) | 冻存管 | 2年+ |
质控应用
CLSI M100 指定的肠球菌 HLAR 筛选阴性对照。33186(敏感——抑菌圈 ≥ 10 mm)与 51299(耐药——无抑菌圈)配对——每批庆大霉素 120 μg 和链霉素 300 μg 纸片在投入使用前须以两者同时验证——若 33186 的抑菌圈 < 10 mm(假耐药)或 51299 出现抑菌圈(假敏感)——该批次纸片不合格。这一配对也是临床微生物室培训和能力验证项目中 HLAR 判读的标准对照组合。
常见问题
Q: 33186 在 10 μg 庆大霉素纸片上也是敏感的吗?
不是。肠球菌对氨基糖苷类的天然低水平耐药使所有肠球菌(包括 33186)在 10 μg 纸片上均显示耐药(抑菌圈 0 mm)。这就是为什么 HLAR 筛选必须使用120 μg 高载量纸片——高浓度庆大霉素可突破细胞壁通透性屏障——若菌株无高水平修饰酶——120 μg 纸片即可显示敏感。
订购信息
| 产品名称 | 粪肠球菌 HLAR 阴性标准株 |
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| 拉丁名 | Enterococcus faecalis |
| 保藏中心编号 | ATCC 33186 |
| 产品形式 | 冻干粉,附 ATCC 检测报告(COA),含批号信息 |
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参考资料
- ATCC 官网 33186
- CLSI M100:肠球菌 HLAR 筛选标准
- Eliopoulos GM et al. (1988): High-level aminoglycoside resistance in enterococci